
Meiyuan Qian,Yuefeng Tan,Bo Xu
申請研發中心
介紹
出租車(Taxus Chinensis或中國紫杉)是受國家保護的野生植物。這是第四紀冰川留下的罕見且瀕臨滅絕的植物。它也是世界上唯一的天然藥用植物。出租車分佈在北半球的溫帶區域中,到蒙面地區中部地區,世界上約有11種物種。中國有4種和1種種類,即東北出租車,雲南出租車,出租車,藏族出租車和南部出租車。這五種物種分佈在中國西南部,中國南部,中國東部,中國西北部,中國東北部和台灣。出租車植物包含多種化學成分,包括紫杉烷,類黃酮,木糖,類固醇,酚酸,倍半萜和糖苷。著名的抗腫瘤藥物紫杉醇(或紫杉醇)是一種紫杉烷。紫杉醇具有獨特的抗癌機制。紫杉醇可以通過與它們梳理並防止微管在細胞分裂時分離染色體來“凍結”微管,從而導致分裂細胞的死亡,尤其是快速增殖的癌細胞[1]。此外,通過激活巨噬細胞,紫杉醇會導致TNF-α(腫瘤壞死因子)受體的降低並釋放TNF-α,從而殺死或抑制腫瘤細胞[2]。此外,紫杉醇可以通過在FAS/FASL介導的凋亡受體途徑上作用或激活半胱氨酸蛋白酶系統來誘導凋亡[3]。由於其多重靶抗癌作用,紫杉醇廣泛用於治療卵巢癌,乳腺癌,非小細胞肺癌(NSCLC),胃癌,食管癌,膀胱癌,前列腺癌,惡性黑色素瘤,頭部和頸部癌症[4]。特別是對於晚期乳腺癌和晚期卵巢癌,紫杉醇具有出色的治療作用,因此被稱為“癌症治療的最后防禦措施”。
紫杉醇是近年來國際市場上最受歡迎的抗癌藥物,被認為是未來20年中人類最有效的抗癌藥之一。近年來,隨著人口和癌症發病率的爆炸性增長,對紫杉醇的需求也大大增加。當前,臨床或科學研究所需的紫杉醇主要是直接從出租車中提取的。不幸的是,植物中紫杉醇的含量很低。例如,在Taxus Brevifolia的樹皮中,紫杉醇含量僅為0.069%,通常認為這是最高的。對於提取1 g紫杉醇的提取,它需要大約13.6 kg的出租車樹皮。基於此估計,需要3 - 12棵出租車樹來治療卵巢癌患者。結果,已經砍伐了大量的出租車樹,導致這種珍貴物種幾乎滅絕。此外,出租車的資源非常差,增長緩慢,這使得紫杉醇的進一步開發和利用變得困難。
目前,紫杉醇的總合成已成功完成。但是,它的合成路線非常複雜且高成本,因此沒有工業意義。紫杉醇的半合成方法現在相對成熟,被認為是擴展紫杉醇來源的有效方法。簡而言之,在紫杉醇的半合成中,紫杉醇前體化合物在出租車植物中相對豐富,然後通過化學合成轉化為紫杉醇。出租車baccata針中的10-二乙酰基脂蛋白的含量可高達0.1%。而且針很容易與樹皮進行比較。因此,基於10-二乙酰基鈣蛋白ⅲ的紫杉醇的半合成引起了研究人員的越來越關注[5](如圖1所示)。
圖1。基於10二乙基巴accatin的紫杉醇的半合成途徑。
在這篇文章中,出租車植物提取物通過閃光劑製備液相色譜系統Sepabean™機器純化,並結合Santai Technologies生產的Sepaflash C18 C18反向相(RP)閃光鏡片。達到純度要求的目標產品已獲得,可用於隨後的科學研究中,為快速純化這種天然產品提供了具有成本效益的解決方案。
樂器 | Sepabean™機器 | |
墨水匣 | 12 G Sepaflash C18 RP閃光彈藥筒(球形二氧化矽,20-45μm,100Å,訂單編號:SW-5222-012-SP) | |
波長 | 254 nm(檢測),280 nm(監視) | |
移動階段 | 溶劑A:水 | |
溶劑B:甲醇 | ||
流速 | 15毫升/分鐘 | |
樣品加載 | 溶解在1 ml DMSO中的20 mg原始樣品 | |
坡度 | 時間(最小) | 溶劑B(%) |
0 | 10 | |
5 | 10 | |
7 | 28 | |
14 | 28 | |
16 | 40 | |
20 | 60 | |
27 | 60 | |
30 | 72 | |
40 | 72 | |
43 | 100 | |
45 | 100 |
結果與討論
通過分析色譜圖,目標產物和實現基線分離的雜質,顯示了從出租車中的粗提取物的閃光色譜圖。此外,多次樣本注射也實現了良好的可重複性(數據未顯示)。用玻璃柱完成手動色譜法的分離大約需要4個小時。與傳統的手動色譜法相比,本文中的自動純化方法只需要44分鐘即可完成整個純化任務(如圖3所示)。使用自動方法可以節省80%以上的時間和大量溶劑,從而可以有效地降低成本並大大提高工作效率。
圖2。從出租車中的粗提取物的閃光色譜圖。
圖3。手動色譜法與自動純化方法的比較。
總之,用Sepabean™機器梳理Sepaflash C18 RP閃光彈藥筒可以為快速純化天然產品(例如Taxus提取物)提供快速有效的解決方案。
參考
1。AlushinGM,Lander GC,Kellogg EH,Zhang R,Baker D和Nogales E.高分辨率的微管結構揭示了GTP水解後αβ-微管蛋白的結構過渡。 Cell,2014,157(5),1117-1129。
2。BurkhartCA,Berman JW,Swindell CS和Horwitz SB。紫杉醇結構與其他紫杉烷的結構與誘導腫瘤壞死因子-α基因表達和細胞毒性的關係。癌症研究,1994,54(22),5779-5782。
3。ParkSJ,Wu CH,Gordon JD,Zhong X,Emami A和Safa AR。紫杉醇誘導caspase-10依賴性凋亡,J。Biol。 Chem。,2004,279,51057-51067。
4。紫杉醇。美國衛生系統藥劑師學會。 [2015年1月2日]
5。BruceGanem和Roland R. Franke。紫杉醇來自主要紫杉烷:有條件化學創意發明的觀點。 J. org。 Chem。,2007,72(11),3981-3987。
有一系列的Sepaflash C18 RP閃存彈藥筒,其規格與Santai技術不同(如表2所示)。
項目編號 | 列大小 | 流速 (ml/min) | 最大壓力 (psi/bar) |
SW-5222-004-sp | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
SW-5222-012-sp | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-025-sp | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
SW-5222-120-SP | 155克 | 30-60 | 300/20.7 |
SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
表2。SepaflashC18 RP閃光彈藥筒。
包裝材料:高效球形C18鍵合二氧化矽,20-45μm,100Å
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發佈時間:2018年9月20日