C18AQ柱在強極性勝肽純化的應用

黃銳、徐波
應用研發中心

介紹
勝肽是由胺基酸組成的化合物，由於構成其序列的胺基酸殘基的類型和順序不同，每種胺基酸都具有獨特的物理和化學性質。隨著固相化學合成的發展，各種活性勝肽的化學合成取得了長足的進步。然而，由於固相合成所得的勝肽成分複雜，最終產物需要透過可靠的分離方法進行純化。常用的多肽純化方法有離子交換層析法（IEC）和反相高效液相層析法（RP-HPLC），其缺點是載樣量低、分離介質成本高、分離設備複雜且昂貴，針對小分子勝肽（MW < 1 kDa）的快速純化，三泰科技先前曾發表過一個成功的應用案例，其中使用SepaFlash RP C18小柱快速純化胸腺五肽（TP-5）和得到符合要求的目標產物。

圖 1. 20 種常見胺基酸（轉載自 www.bachem.com）。

肽的組成中常見的胺基酸有20種。這些胺基酸可依其極性和酸鹼性質分為以下幾類：非極性（疏水性）、極性（不含電）、酸性或鹼性（如圖1所示）。在一條勝肽序列中，如果構成此序列的胺基酸大部分是極性胺基酸（如圖1中粉紅色所示），如半胱胺酸、麩醯胺酸、天門冬胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸等，那麼該勝肽可能具有很強的極性。極性，極易溶於水。在透過反相層析純化這些強極性勝肽樣本的過程中，會發生一種稱為疏水相塌陷的現象（參見三台科技先前發表的應用說明：疏水相塌陷，AQ反相層析管及其應用）。與常規C18色譜管柱相比，改良後的C18AQ色譜管最適合強極性或親水性樣品的純化。在這篇文章中，使用強極性勝肽作為樣品並透過 C18AQ 柱進行純化。從而獲得了符合要求的目標產品，可用於後續的研發。