Rui Huang, Bo Xu
Ohun elo R&D Center
Ifaara
Ion paṣipaarọ kiromatogirafi (IEC) jẹ ọna chromatographic ti o wọpọ ti a lo lati yapa ati sọ di mimọ awọn agbo ogun eyiti o gbekalẹ ni fọọmu ionic ni ojutu.Gẹgẹbi awọn ipinlẹ idiyele oriṣiriṣi ti awọn ions paṣipaarọ, IEC le pin si awọn oriṣi meji, chromatography paṣipaarọ cation ati chromatography paṣipaarọ anion.Ni cation paṣipaarọ kiromatogirafi, ekikan awọn ẹgbẹ ti wa ni iwe adehun si awọn dada ti awọn Iyapa media.Fun apẹẹrẹ, sulfonic acid (-SO3H) jẹ ẹgbẹ ti o wọpọ ni paṣipaarọ cation ti o lagbara (SCX), eyiti o yapa H + ati ẹgbẹ ti o gba agbara ni odi -SO3- le nitorinaa adsorb awọn cations miiran ni ojutu.Ni chromatography paṣipaarọ anion, awọn ẹgbẹ ipilẹ ti wa ni asopọ si oju ti media Iyapa.Fun apẹẹrẹ, amine quaternary (-NR3OH, nibiti R jẹ ẹgbẹ hydrocarbon) ni a maa n lo ni paṣipaarọ anion ti o lagbara (SAX), eyiti o yapa OH- ati ẹgbẹ ti o gba agbara daadaa -N + R3 le ṣe adsorb awọn anions miiran ninu ojutu, ti o yọrisi anion paṣipaarọ ipa.
Lara awọn ọja adayeba, awọn flavonoids ti fa akiyesi awọn oniwadi nitori ipa wọn ninu idena ati itọju awọn arun inu ọkan ati ẹjẹ.Niwọn bi awọn ohun elo flavonoid jẹ ekikan nitori wiwa ti awọn ẹgbẹ phenolic hydroxyl, chromatography paṣipaarọ ion jẹ aṣayan yiyan ni afikun si ipele deede ti aṣa tabi kiromatogirafi alakoso yipo fun ipinya ati isọdi awọn agbo ogun ekikan wọnyi.Ni chromatography filasi, media iyapa ti o wọpọ fun paṣipaarọ ion jẹ matrix gel silica nibiti awọn ẹgbẹ paṣipaarọ ion ti sopọ mọ oju rẹ.Awọn ipo paṣipaarọ ion ti o wọpọ julọ lo ni kiromatogirafi filasi jẹ SCX (nigbagbogbo ẹgbẹ sulfonic acid) ati SAX (nigbagbogbo ẹgbẹ amine quaternary).Ninu akọsilẹ ohun elo ti a tẹjade tẹlẹ pẹlu akọle “Awọn ohun elo ti SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns in the Purification of Alkaline Compounds” nipasẹ Santai Technologies, awọn ọwọn SCX ti wa ni iṣẹ fun isọdọtun ti awọn agbo ogun ipilẹ.Ninu ifiweranṣẹ yii, adalu didoju ati awọn iṣedede ekikan ni a lo bi apẹẹrẹ lati ṣawari ohun elo ti awọn ọwọn SAX ni isọdimọ ti awọn agbo ogun ekikan.
Abala adanwo
Ṣe nọmba 1. Aworan atọka ti ipele iduro ti a so mọ dada ti media Iyapa SAX.
Ninu ifiweranṣẹ yii, ọwọn SAX kan ti o ṣaju pẹlu silica amine quaternary ti o ni asopọ ti a ti lo (gẹgẹbi a ṣe han ni Nọmba 1).Adalu Chromone ati 2,4-dihydroxybenzoic acid ni a lo bi apẹẹrẹ lati sọ di mimọ (gẹgẹbi a ṣe han ni Nọmba 2).A ti tuka adalu naa ni kẹmika kẹmika ati ti kojọpọ sori katiriji filasi nipasẹ abẹrẹ kan.Iṣeto idanwo ti iwẹnumọ filasi jẹ atokọ ni Tabili 1.
Ṣe nọmba 2. Ilana kemikali ti awọn ẹya meji ti o wa ninu apopọ ayẹwo.
| Irinse | SepaBean™ ẹrọ T | |||||
| Awọn katiriji | 4 g SepaFlash Standard Series filasi katiriji (yanrin alaibamu, 40 - 63 μm, 60 Å, Nọmba aṣẹ: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX filasi katiriji (silika alaibamu, 40 - 63 μm, 60 Å, Nọmba aṣẹ: SW-5001-004-IR) | ||||
| Igi gigun | 254 nm (iwari), 280 nm (abojuto) | |||||
| Mobile alakoso | Solusan A: N-hexane | |||||
| Solusan B: Ethyl acetate | ||||||
| Oṣuwọn sisan | 30 milimita / min | 20 milimita / min | ||||
| Apeere ikojọpọ | 20 miligiramu (adapọ paati A ati paati B) | |||||
| Ilọsiwaju | Àkókò (CV) | Solusan B (%) | Àkókò (CV) | Solusan B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Awọn abajade ati ijiroro
Ni akọkọ, adalu apẹẹrẹ ti yapa nipasẹ katiriji filasi alakoso deede ti a ti ṣajọpọ pẹlu yanrin deede.Gẹgẹbi a ṣe afihan ni Nọmba 3, awọn paati meji ti o wa ninu ayẹwo ni a yọkuro lati inu katiriji kan lẹhin ekeji.Nigbamii ti, a lo katiriji filasi SAX kan fun isọdi mimọ ti ayẹwo naa.Gẹgẹbi afihan ni Nọmba 4, Ẹka ekikan B ti wa ni idaduro patapata lori katiriji SAX.Apakan didoju A ti yọkuro diẹdiẹ lati inu katiriji pẹlu elution ti alakoso alagbeka.
Ṣe nọmba 3. Kromatogram filasi ti apẹẹrẹ lori katiriji alakoso deede deede.
Ṣe nọmba 4. Kromatogram filasi ti ayẹwo lori katiriji SAX kan.
Ti a ṣe afiwe olusin 3 ati olusin 4, Ẹya A ni apẹrẹ ti o ga julọ ti ko ni ibamu lori awọn katiriji filasi meji ti o yatọ.Lati jẹrisi boya oke elution jẹ ibamu si paati, a le lo ẹya ibojuwo gigun ni kikun eyiti a ṣe sinu sọfitiwia iṣakoso ti ẹrọ SepaBean™.Ṣii data esiperimenta ti awọn ipinya meji, fa si laini itọka lori aaye akoko (CV) ninu chromatogram si aaye ti o ga julọ ati aaye keji ti o ga julọ ti oke elution ti o baamu si Abala A, ati iwoye gigun kikun ti awọn meji wọnyi. Awọn aaye yoo han laifọwọyi ni isalẹ chromatogram (gẹgẹbi a ṣe han ni Figure 5 ati Figure 6).Ti a ṣe afiwe awọn alaye iwoye gigun ni kikun ti awọn ipinya meji wọnyi, Ẹya A ni irisi gbigba deede ni awọn adanwo meji.Fun idi ti paati A ni apẹrẹ ti o ga julọ ti ko ni ibamu lori awọn katiriji filasi meji ti o yatọ, o ṣe akiyesi pe aimọ kan pato wa ninu Ẹka A ti o ni idaduro oriṣiriṣi lori katiriji alakoso deede ati SAX katiriji.Nitoribẹẹ, ọkọọkan eluting yatọ fun paati A ati aimọ lori awọn katiriji filasi meji wọnyi, ti o yọrisi apẹrẹ tente oke ti ko ni ibamu lori awọn chromatograms.
Ṣe nọmba 5. Iwọn oju-iwe gigun kikun ti Ẹka A ati aimọ ti a yapa nipasẹ katiriji alakoso deede.
Ṣe nọmba 6. Iwọn iwọn gigun kikun ti Ẹka A ati aimọ ti a yapa nipasẹ SAX katiriji.
Ti ọja ibi-afẹde lati gba jẹ paati didoju A, iṣẹ-ṣiṣe mimọ le ni irọrun pari nipasẹ lilo taara katiriji SAX fun elution lẹhin ikojọpọ apẹẹrẹ.Ni apa keji, ti ọja ibi-afẹde lati gba jẹ apakan ekikan B, ọna itusilẹ le ṣee gba pẹlu atunṣe diẹ nikan ni awọn igbesẹ idanwo: nigbati a ba gbe apẹẹrẹ naa sori katiriji SAX ati apakan didoju A. ti yọkuro patapata pẹlu awọn olufoji Organic alakoso deede, yipada ipele alagbeka si ojutu kẹmika ti o ni 5% acetic acid.Awọn ions acetate ti o wa ninu alakoso alagbeka yoo dije pẹlu paati B fun sisopọ si awọn ẹgbẹ ion amine quaternary lori ipo iduro ti SAX katiriji, nitorinaa yọkuro Ẹka B lati katiriji lati gba ọja ibi-afẹde naa.Kromatogram ti ayẹwo ti o yapa ni ipo paṣipaarọ ion ti han ni Nọmba 7.
Nọmba 7. Kromatogram filasi ti paati B ti jade ni ipo paṣipaarọ ion lori katiriji SAX kan.
Ni ipari, apẹẹrẹ ekikan tabi didoju le jẹ mimọ ni iyara nipasẹ katiriji SAX ni idapo pẹlu katiriji alakoso deede ni lilo awọn ọgbọn isọdi oriṣiriṣi.Pẹlupẹlu, pẹlu iranlọwọ ti ẹya ibojuwo gigun ni kikun ti a ṣe sinu sọfitiwia iṣakoso ti ẹrọ SepaBean ™, iwoye gbigba abuda ti awọn ida ti a ti yọkuro le ni irọrun ni afiwe ati timo, ṣe iranlọwọ fun awọn oniwadi ni iyara lati pinnu akopọ ati mimọ ti awọn ida ti o yọ kuro ati nitorinaa ni ilọsiwaju iṣẹ ṣiṣe.
| Nọmba Nkan | Iwọn Iwọn | Oṣuwọn sisan (milimita/iṣẹju) | O pọju.Titẹ (psi/ọgọ) |
| SW-5001-004-IR | 5.9g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Table 2. SepaFlash iwe adehun Series SAX filasi katiriji.Awọn ohun elo iṣakojọpọ: Ultra-pure alaibamu SAX ti o ni asopọ siliki, 40 - 63 μm, 60 Å.
Fun alaye siwaju sii lori awọn alaye alaye ti SepaBean™ẹrọ, tabi alaye aṣẹ lori SepaFlash jara filasi katiriji, jọwọ ṣabẹwo si oju opo wẹẹbu wa.
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu kọkanla-09-2018