Việc áp dụng các cột sắc ký trao đổi anion mạnh mẽ trong việc tinh chế các hợp chất axit

Kết quả và thảo luận

Đầu tiên, hỗn hợp mẫu được phân tách bằng hộp flash pha bình thường được đóng gói sẵn bằng silica thông thường. Như thể hiện trong Hình 3, hai thành phần trong mẫu được rửa giải từ hộp mực lần lượt. Tiếp theo, một hộp mực flash sax được sử dụng để tinh chế mẫu. Như thể hiện trong Hình 4, thành phần A có tính axit B hoàn toàn được giữ lại trên hộp mực sax. Thành phần trung tính A dần dần được rửa giải từ hộp mực với sự rửa giải của pha di động.

Hình 3. Sắc ký flash của mẫu trên hộp mực pha thông thường thông thường.

Hình 4. Sắc ký flash của mẫu trên hộp mực sax.
So sánh Hình 3 và Hình 4, thành phần A có hình dạng cực đại không nhất quán trên hai hộp flash khác nhau. Để xác nhận xem đỉnh rửa giải có tương ứng với thành phần hay không, chúng ta có thể sử dụng tính năng quét bước sóng đầy đủ được tích hợp vào phần mềm điều khiển của máy Sepabean ™. Mở dữ liệu thử nghiệm của hai phân tách, kéo vào dòng chỉ báo trên trục thời gian (CV) trong sắc ký đồ đến điểm cao nhất và điểm cao thứ hai của đỉnh rửa giải tương ứng với thành phần A và phổ bước sóng đầy đủ của hai điểm này sẽ được hiển thị tự động dưới mức sắc ký (như trong Hình 5 và hình 6). So sánh dữ liệu phổ bước sóng đầy đủ của hai phân tách này, thành phần A có phổ hấp thụ nhất quán trong hai thí nghiệm. Vì lý do của thành phần A có hình dạng cực đại không nhất quán trên hai hộp mực flash khác nhau, người ta suy đoán rằng có tạp chất cụ thể trong thành phần A có khả năng lưu giữ khác nhau trên hộp mực pha thông thường và hộp mực sax. Do đó, trình tự rửa giải là khác nhau đối với thành phần A và tạp chất trên hai hộp mực flash này, dẫn đến hình dạng cực đại không nhất quán trên sắc ký đồ.

Hình 5. Phổ bước sóng đầy đủ của thành phần A và tạp chất được phân tách bằng hộp mực pha bình thường.

Hình 6. Phổ bước sóng đầy đủ của thành phần A và tạp chất được phân tách bằng hộp mực sax.

Nếu sản phẩm mục tiêu được thu thập là thành phần trung tính A, nhiệm vụ tinh chế có thể dễ dàng hoàn thành bằng cách trực tiếp sử dụng hộp mực SAX để rửa giải sau khi tải mẫu. Mặt khác, nếu sản phẩm mục tiêu được thu thập là thành phần A có tính axit B, cách bắt giữ bắt giữ chỉ có một điều chỉnh nhỏ trong các bước thử nghiệm: khi mẫu được tải trên hộp mực SAX và thành phần trung tính A hoàn toàn được rửa giải với dung môi hữu cơ bình thường, chuyển sang pha di động. Các ion acetate trong pha di động sẽ cạnh tranh với thành phần B để liên kết với các nhóm ion amin bậc bốn trên giai đoạn đứng yên của hộp mực sax, do đó giúp tách thành phần B từ hộp mực để lấy sản phẩm đích. Sắc ký của mẫu được phân tách trong chế độ trao đổi ion được hiển thị trong Hình 7.

Hình 7. Sắc ký flash của thành phần B được rửa giải trong chế độ trao đổi ion trên hộp mực sax.

Tóm lại, mẫu axit hoặc trung tính có thể được tinh chế nhanh chóng bằng hộp mực SAX kết hợp với hộp mực pha bình thường sử dụng các chiến lược tinh chế khác nhau. Hơn nữa, với sự trợ giúp của tính năng quét bước sóng đầy đủ được tích hợp trong phần mềm điều khiển của máy Sepabean ™, phổ hấp thụ đặc trưng của các phân số rửa giải có thể được so sánh và xác nhận dễ dàng, giúp các nhà nghiên cứu nhanh chóng xác định thành phần và độ tinh khiết của các phân số rửa giải và do đó cải thiện hiệu quả công việc.