Ứng dụng của cột sắc ký trao đổi anion mạnh SepaFlash trong quá trình tinh chế các hợp chất có tính axit

Kết quả và thảo luận

Đầu tiên, hỗn hợp mẫu được phân tách bằng hộp flash pha thông thường được đóng gói sẵn bằng silica thông thường.Như thể hiện trong Hình 3, hai thành phần trong mẫu lần lượt được rửa giải khỏi hộp mực.Tiếp theo, hộp flash SAX được sử dụng để tinh chế mẫu.Như thể hiện trong Hình 4, Thành phần B có tính axit được giữ lại hoàn toàn trên hộp SAX.Thành phần trung tính A dần dần được rửa giải khỏi hộp bằng quá trình rửa giải của pha động.

Hình 3. Sắc ký đồ nhanh của mẫu trên hộp pha chuẩn thông thường.

Hình 4. Sắc ký đồ nhanh của mẫu trên hộp SAX.
So sánh Hình 3 và Hình 4, Thành phần A có hình dạng đỉnh không nhất quán trên hai hộp đèn nháy khác nhau.Để xác nhận xem đỉnh rửa giải có tương ứng với thành phần hay không, chúng ta có thể sử dụng tính năng quét toàn bộ bước sóng được tích hợp trong phần mềm điều khiển của máy SepaBean™.Mở dữ liệu thực nghiệm của hai lần tách, kéo đến vạch chỉ thị trên trục thời gian (CV) trong sắc ký đồ đến điểm cao nhất và điểm cao thứ hai của pic rửa giải tương ứng với Thành phần A và toàn bộ phổ bước sóng của hai lần tách này. các điểm sẽ được tự động hiển thị bên dưới biểu đồ sắc ký (như trong Hình 5 và Hình 6).So sánh dữ liệu phổ bước sóng đầy đủ của hai lần phân tách này, Thành phần A có phổ hấp thụ nhất quán trong hai thí nghiệm.Vì lý do Thành phần A có hình dạng đỉnh không nhất quán trên hai hộp mực flash khác nhau, người ta suy đoán rằng có tạp chất cụ thể trong Thành phần A có khả năng lưu giữ khác nhau trên hộp mực pha thông thường và hộp mực SAX.Do đó, trình tự rửa giải là khác nhau đối với Thành phần A và tạp chất trên hai hộp nhanh này, dẫn đến hình dạng cực đại không nhất quán trên sắc ký đồ.

Hình 5. Phổ bước sóng đầy đủ của Thành phần A và tạp chất được phân tách bằng hộp mực pha thông thường.

Hình 6. Phổ bước sóng đầy đủ của Thành phần A và tạp chất được phân tách bằng hộp SAX.

Nếu sản phẩm mục tiêu được thu thập là Thành phần A trung tính, thì có thể dễ dàng hoàn thành nhiệm vụ tinh chế bằng cách sử dụng trực tiếp hộp SAX để rửa giải sau khi nạp mẫu.Mặt khác, nếu sản phẩm mục tiêu được thu thập là Thành phần B có tính axit, thì có thể áp dụng cách thu giữ-giải phóng chỉ với một chút điều chỉnh trong các bước thử nghiệm: khi mẫu được nạp vào hộp SAX và Thành phần A trung tính được rửa giải hoàn toàn bằng dung môi hữu cơ pha thường, chuyển pha động sang dung dịch metanol chứa 5% axit axetic.Các ion axetat trong pha động sẽ cạnh tranh với Thành phần B để liên kết với các nhóm ion amin bậc bốn trên pha tĩnh của hộp SAX, do đó rửa giải Thành phần B khỏi hộp để thu được sản phẩm mục tiêu.Sắc ký đồ của mẫu được tách ở chế độ trao đổi ion được thể hiện trong Hình 7.

Hình 7. Sắc ký đồ nhanh của Thành phần B rửa giải ở chế độ trao đổi ion trên hộp SAX.

Tóm lại, mẫu có tính axit hoặc trung tính có thể được tinh chế nhanh chóng bằng hộp SAX kết hợp với hộp pha thông thường sử dụng các chiến lược tinh chế khác nhau.Hơn nữa, với sự trợ giúp của tính năng quét bước sóng đầy đủ được tích hợp trong phần mềm điều khiển của máy SepaBean™, phổ hấp thụ đặc trưng của các phân đoạn rửa giải có thể dễ dàng so sánh và xác nhận, giúp các nhà nghiên cứu nhanh chóng xác định thành phần và độ tinh khiết của các phân đoạn rửa giải, từ đó cải thiện hiệu quả công việc.