Cột SepaFlash™

Bộ phụ kiện và dây chuyền dung môi Santai

Không, silica có nắp cuối không hòa tan trong bất kỳ dung môi hữu cơ thường sử dụng nào.

Để tinh sạch tối ưu với cột flash C18, vui lòng làm theo các bước sau:
① Rửa cột bằng 100% dung môi mạnh (hữu cơ) trong 10 – 20 CV (thể tích cột), điển hình là metanol hoặc axetonitril.
② Xả cột bằng 50% mạnh + 50% dung dịch nước (nếu cần thêm chất phụ gia thì thêm vào) thêm 3 – 5 CV nữa.
③ Làm sạch cột với các điều kiện gradient ban đầu trong 3 – 5 CV.

Đối với kích thước cột từ 4g đến 330g, đầu nối Luer tiêu chuẩn được sử dụng trong các cột flash này. Đối với kích thước cột 800g, 1600g và 3000g, nên sử dụng bộ chuyển đổi đầu nối bổ sung để gắn các cột nhanh này vào hệ thống sắc ký nhanh. Vui lòng tham khảo tài liệu Bộ chuyển đổi Santai cho Cột Flash 800g, 1600g, 3kg để biết thêm chi tiết.

Đối với cột pha thông thường nên sử dụng pha động với tỷ lệ metanol không vượt quá 25%.

Nói chung, nên sử dụng pha động trong đó tỷ lệ dung môi phân cực không vượt quá 5%. Các dung môi phân cực bao gồm DMSO, DMF, THF, TEA, v.v.

Nạp mẫu rắn là một kỹ thuật hữu ích để nạp mẫu cần tinh khiết vào cột, đặc biệt đối với các mẫu có độ hòa tan thấp. Trong trường hợp này, flash flash iLOK là sự lựa chọn rất phù hợp.
Nói chung, mẫu được hòa tan trong dung môi thích hợp và được hấp phụ trên chất hấp phụ rắn có thể giống như chất hấp phụ được sử dụng trong cột nhanh, bao gồm đất tảo cát hoặc silic hoặc các vật liệu khác. Sau khi loại bỏ/làm bay hơi dung môi còn sót lại, chất hấp phụ được đặt lên trên cột đã được lấp đầy một phần hoặc vào hộp chứa chất rắn rỗng. Để biết thêm thông tin chi tiết, vui lòng tham khảo tài liệu Hướng dẫn sử dụng hộp mực iLOK-SL để biết thêm chi tiết.

Thể tích cột xấp xỉ bằng thể tích chết (VM) khi bỏ qua thể tích bổ sung trong các ống nối cột với bộ phun và đầu dò.

Thời gian chết (tM) là thời gian cần thiết để rửa giải thành phần không được giữ lại.

Thể tích chết (VM) là thể tích của pha động cần thiết để rửa giải thành phần không được giữ lại. Khối lượng chết có thể được tính theo phương trình sau: VM =F0*tM.

Trong phương trình trên, F0 là tốc độ dòng của pha động.

Không, silica có nắp cuối không hòa tan trong bất kỳ dung môi hữu cơ thường sử dụng nào.

Cột silica flash là loại dùng một lần và chỉ sử dụng một lần, nhưng nếu xử lý thích hợp, cột silica có thể được tái sử dụng mà không làm giảm hiệu suất.
Để có thể tái sử dụng, cột nhanh silica cần được làm khô đơn giản bằng khí nén hoặc được rửa sạch và bảo quản trong isopropanol.

Bảo quản đúng cách sẽ cho phép tái sử dụng cột flash C18:
• Không bao giờ để cột bị khô sau khi sử dụng.
• Loại bỏ tất cả các chất biến tính hữu cơ bằng cách rửa cột bằng metanol 80% hoặc axetonitril trong nước trong 3 – 5 CV.
• Bảo quản cột trong dung môi rửa đã đề cập ở trên với các đầu nối cố định.

Đối với các cột có kích thước lớn trên 220g, hiệu ứng nhiệt thể hiện rõ trong quá trình tiền cân bằng. Nên đặt tốc độ dòng chảy ở mức 50-60% tốc độ dòng chảy được đề xuất trong quá trình cân bằng trước để tránh hiệu ứng nhiệt rõ ràng.

Hiệu ứng nhiệt của dung môi hỗn hợp rõ ràng hơn dung môi đơn lẻ. Lấy hệ dung môi cyclohexane/ethyl acetate làm ví dụ, người ta đề xuất sử dụng 100% cyclohexane trong quá trình tiền cân bằng. Khi quá trình cân bằng trước hoàn tất, thí nghiệm tách có thể được thực hiện theo hệ dung môi đã cài đặt sẵn.