نیوز بینر

خبریں

C18AQ کالموں کے ذریعہ اینٹی بائیوٹکس میں انتہائی قطبی نجاستوں کی صفائی

C18AQ کالموں کے ذریعہ اینٹی بائیوٹکس میں انتہائی قطبی نجاستوں کی صفائی

منگزو یانگ، بو سو
درخواست آر اینڈ ڈی سینٹر

تعارف
اینٹی بائیوٹکس ثانوی میٹابولائٹس کا ایک طبقہ ہے جو مائکروجنزموں (بشمول بیکٹیریا، فنگس، ایکٹینومیسیٹس) یا اس سے ملتے جلتے مرکبات کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے جو کیمیائی طور پر ترکیب شدہ یا نیم ترکیب شدہ ہوتے ہیں۔اینٹی بائیوٹکس دوسرے مائکروجنزموں کی نشوونما اور بقا کو روک سکتے ہیں۔انسان کی طرف سے دریافت ہونے والی پہلی اینٹی بائیوٹک، پینسلن، 1928 میں برطانوی مائکرو بایولوجسٹ الیگزینڈر فلیمنگ نے دریافت کی تھی۔ اس نے مشاہدہ کیا کہ سڑنا کے آس پاس کے بیکٹیریا سٹیفیلوکوکس کلچر ڈش میں نہیں بڑھ سکتے جو سڑنا سے آلودہ تھا۔اس نے فرض کیا کہ مولڈ کو ایک اینٹی بیکٹیریل مادہ خارج کرنا چاہیے، جسے اس نے 1928 میں پینسلن کا نام دیا۔ تاہم، اس وقت فعال اجزاء کو صاف نہیں کیا گیا تھا۔1939 میں آکسفورڈ یونیورسٹی کے ارنسٹ چین اور ہاورڈ فلوری نے ایک ایسی دوا تیار کرنے کا فیصلہ کیا جو بیکٹیریل انفیکشن کا علاج کر سکے۔تناؤ حاصل کرنے کے لیے فلیمنگ سے رابطہ کرنے کے بعد، انھوں نے تناؤ سے پینسلن کو کامیابی سے نکالا اور صاف کیا۔پینسلن کی بطور علاج دوائی کی ان کی کامیاب نشوونما کے لیے، فلیمنگ، چین اور فلوری نے طب میں 1945 کا نوبل انعام مشترکہ کیا۔

اینٹی بایوٹک کو بیکٹیریل انفیکشن کے علاج یا روکنے کے لیے اینٹی بیکٹیریل ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔اینٹی بیکٹیریل ایجنٹوں کے طور پر استعمال ہونے والی اینٹی بائیوٹکس کی کئی اہم اقسام ہیں: β-lactam اینٹی بائیوٹکس (بشمول پینسلن، سیفالوسپورن، وغیرہ)، امینوگلیکوسائیڈ اینٹی بائیوٹکس، میکولائڈ اینٹی بائیوٹکس، ٹیٹراسائکلین اینٹی بائیوٹکس، کلورامفینیکول (کل)، اینٹی بائیوٹک اور اینٹی بائیوٹک کے کل ذرائع۔ حیاتیاتی ابال، نیم ترکیب اور کل ترکیب۔حیاتیاتی ابال کے ذریعہ تیار کردہ اینٹی بایوٹک کو کیمیائی استحکام، زہریلے ضمنی اثرات، اینٹی بیکٹیریل سپیکٹرم اور دیگر مسائل کی وجہ سے کیمیائی طریقوں سے ساختی طور پر تبدیل کرنے کی ضرورت ہے۔کیمیائی طور پر ترمیم کرنے کے بعد، اینٹی بائیوٹکس زیادہ استحکام حاصل کر سکتے ہیں، زہریلے ضمنی اثرات کو کم کر سکتے ہیں، اینٹی بیکٹیریل سپیکٹرم کو بڑھا سکتے ہیں، منشیات کے خلاف مزاحمت کو کم کر سکتے ہیں، حیاتیاتی دستیابی کو بہتر بنا سکتے ہیں، اور اس طرح منشیات کے علاج کے بہتر اثرات کو حاصل کر سکتے ہیں۔لہذا، نیم مصنوعی اینٹی بائیوٹکس فی الحال اینٹی بائیوٹک ادویات کی ترقی میں سب سے زیادہ مقبول سمت ہیں۔

نیم مصنوعی اینٹی بائیوٹکس کی نشوونما میں، اینٹی بائیوٹکس میں کم طہارت، بہت سی ضمنی مصنوعات اور پیچیدہ اجزاء کی خصوصیات ہوتی ہیں کیونکہ وہ مائکروبیل ابال کی مصنوعات سے حاصل کیے جاتے ہیں۔اس صورت میں، نیم مصنوعی اینٹی بائیوٹکس میں نجاست کا تجزیہ اور کنٹرول خاص طور پر اہم ہے۔نجاستوں کی مؤثر طریقے سے شناخت اور خصوصیت کے لیے، نیم مصنوعی اینٹی بائیوٹکس کی مصنوعی مصنوعات سے کافی مقدار میں نجاست حاصل کرنا ضروری ہے۔عام طور پر استعمال ہونے والی ناپاکی کی تیاری کی تکنیکوں میں سے، فلیش کرومیٹوگرافی ایک سرمایہ کاری مؤثر طریقہ ہے جس کے فوائد جیسے بڑے نمونے کی لوڈنگ رقم، کم قیمت، وقت کی بچت وغیرہ۔ مصنوعی محققین کے ذریعہ فلیش کرومیٹوگرافی کو زیادہ سے زیادہ استعمال کیا گیا ہے۔

اس پوسٹ میں، نیم مصنوعی امینوگلیکوسائیڈ اینٹی بائیوٹک کی بنیادی نجاست کو نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا اور فلیش کرومیٹوگرافی سسٹم SepaBean™ مشین کے ساتھ مل کر SepaFlash C18AQ کارٹریج کے ذریعے صاف کیا گیا۔ضروریات کو پورا کرنے والی ٹارگٹ پروڈکٹ کامیابی کے ساتھ حاصل کی گئی، جو ان مرکبات کو صاف کرنے کے لیے ایک انتہائی موثر حل تجویز کرتی ہے۔

تجرباتی جگہ
نمونہ برائے مہربانی ایک مقامی دوا ساز کمپنی نے فراہم کیا تھا۔یہ نمونہ ایک قسم کا امینو پولی سائکلک کاربوہائیڈریٹ تھا اور اس کی سالماتی ساخت امینوگلیکوسائیڈ اینٹی بائیوٹکس سے ملتی جلتی تھی۔نمونے کی قطبیت کافی زیادہ تھی، جس سے یہ پانی میں بہت گھلنشیل تھا۔نمونے کے مالیکیولر ڈھانچے کا اسکیمیٹک خاکہ شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔ HPLC کے تجزیہ کے مطابق خام نمونے کی پاکیزگی تقریباً 88% تھی۔اعلی قطبیت کے ان مرکبات کو صاف کرنے کے لیے، ہمارے پچھلے تجربات کے مطابق نمونے کو باقاعدہ C18 کالموں پر بمشکل ہی رکھا جائے گا۔لہذا، نمونہ صاف کرنے کے لیے ایک C18AQ کالم استعمال کیا گیا تھا۔

شکل 1. نمونے کی سالماتی ساخت کا اسکیمیٹک خاکہ۔
نمونے کے حل کو تیار کرنے کے لیے، 50 ملی گرام خام نمونہ 5 ملی لیٹر خالص پانی میں تحلیل کیا گیا اور پھر اسے مکمل طور پر واضح محلول بنانے کے لیے الٹراسونیکیٹ کیا گیا۔نمونے کے حل کو پھر ایک انجیکٹر کے ذریعہ فلیش کالم میں انجکشن کیا گیا۔فلیش پیوریفیکیشن کا تجرباتی سیٹ اپ ٹیبل 1 میں درج تھا۔

آلہ

SepaBean™ مشین 2

کارتوس

12 جی SepaFlash C18AQ RP فلیش کارتوس (کروی سیلیکا، 20 - 45μm، 100 Å، آرڈر نمبر:SW-5222-012-SP(AQ))

طول موج

204 nm، 220 nm

موبائل مرحلہ

سالوینٹ A: پانی

سالوینٹ بی: ایسیٹونیٹرائل

بہاؤ کی شرح

15 ملی لیٹر/منٹ

نمونہ لوڈ ہو رہا ہے۔

50 ملی گرام

میلان

وقت (منٹ)

سالوینٹ B (%)

0

0

19.0

8

47.0

80

52.0

80

نتائج اور مباحثہ
C18AQ کارتوس پر نمونے کا فلیش کرومیٹوگرام تصویر 2 میں دکھایا گیا ہے۔ جیسا کہ شکل 2 میں دکھایا گیا ہے، انتہائی قطبی نمونہ C18AQ کارتوس پر مؤثر طریقے سے برقرار رکھا گیا تھا۔جمع شدہ حصوں کے لیے لائوفولائزیشن کے بعد، HPLC تجزیہ کے ذریعے ہدف کی مصنوعات کی پاکیزگی 96.2% تھی (جیسا کہ شکل 3 میں دکھایا گیا ہے)۔نتائج نے اشارہ کیا کہ صاف شدہ مصنوعات کو اگلے مرحلے کی تحقیق اور ترقی میں مزید استعمال کیا جا سکتا ہے۔

شکل 2۔ C18AQ کارتوس پر نمونے کا فلیش کرومیٹوگرام۔

شکل 3۔ ہدف کی مصنوعات کا HPLC کرومیٹوگرام۔

آخر میں، SepaFlash C18AQ RP فلیش کارتوس فلیش کرومیٹوگرافی سسٹم SepaBean™ مشین کے ساتھ مل کر انتہائی قطبی نمونوں کو صاف کرنے کے لیے ایک تیز اور موثر حل پیش کر سکتا ہے۔

SepaFlash C18AQ RP فلیش کارتوس کے بارے میں
سانٹائی ٹیکنالوجی کی مختلف خصوصیات کے ساتھ SepaFlash C18AQ RP فلیش کارتوس کی ایک سیریز ہے (جیسا کہ جدول 2 میں دکھایا گیا ہے)۔

آئٹم نمبر

کالم کا سائز

بہاؤ کی شرح

(mL/منٹ)

زیادہ سے زیادہ دباؤ

(psi/bar)

SW-5222-004-SP(AQ)

5.4 جی

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP(AQ)

20 گرام

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP(AQ)

33 گرام

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP(AQ)

48 گرام

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP(AQ)

105 گرام

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP(AQ)

155 گرام

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP(AQ)

300 گرام

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP(AQ)

420 گرام

40-80

250/17.2

ٹیبل 2. SepaFlash C18AQ RP فلیش کارتوس۔پیکنگ مواد: اعلی کارکردگی کا کروی C18 (AQ) بانڈڈ سلکا، 20 - 45 μm، 100 Å۔

SepaBean™ مشین کی تفصیلی تفصیلات کے بارے میں مزید معلومات کے لیے، یا SepaFlash سیریز کے فلیش کارٹریجز پر آرڈر کرنے کی معلومات کے لیے، براہ کرم ہماری ویب سائٹ ملاحظہ کریں۔


پوسٹ ٹائم: اکتوبر 26-2018