روئی ہوانگ ، بو سو
درخواست آر اینڈ ڈی سینٹر
تعارف
ایک پیپٹائڈ ایک مرکب ہے جو امینو ایسڈ پر مشتمل ہوتا ہے ، جس میں سے ہر ایک میں مختلف اقسام اور امینو ایسڈ کی باقیات کی ترتیب کی وجہ سے جسمانی اور کیمیائی خصوصیات کی انوکھی ہوتی ہے۔ ٹھوس مرحلے کیمیائی ترکیب کی نشوونما کے ساتھ ، مختلف فعال پیپٹائڈس کی کیمیائی ترکیب نے بہت ترقی کی ہے۔ تاہم ، ٹھوس مرحلے کی ترکیب کے ذریعہ حاصل کردہ پیپٹائڈ کی پیچیدہ ترکیب کی وجہ سے ، حتمی مصنوع کو قابل اعتماد علیحدگی کے طریقوں سے پاک کیا جانا چاہئے۔ پیپٹائڈس کے لئے عام طور پر استعمال ہونے والے طہارت کے طریقوں میں آئن ایکسچینج کرومیٹوگرافی (آئی ای سی) اور الٹ فیز فیز ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی (آر پی-ایچ پی ایل سی) شامل ہیں ، جن میں کم نمونے کی بوجھ کی گنجائش ، علیحدگی میڈیا کی اعلی قیمت ، پیچیدہ اور مہنگا طور پر علیحدگی کے سامان ، وغیرہ کے چھوٹے مولیکیول پیپٹائڈس (ایم ڈبلیو <1 کے ڈی اے) کی تیزی سے طہارت کے لئے نقصانات ہیں۔ جس میں ایک سیپفلاش آر پی سی 18 کارتوس کو تیموپینٹن (ٹی پی -5) کی تیزی سے طہارت کے لئے استعمال کیا گیا تھا اور تقاضوں کو پورا کرنے والے ہدف کی مصنوعات کو حاصل کیا گیا تھا۔
چترا 1۔ 20 عام امینو ایسڈ (www.bachem.com سے دوبارہ تیار کیا گیا ہے)۔
یہاں 20 قسم کے امینو ایسڈ ہیں جو پیپٹائڈس کی تشکیل میں عام ہیں۔ ان امینو ایسڈ کو ان کی قطبی اور تیزابیت کی پراپرٹی کے مطابق درج ذیل گروہوں میں تقسیم کیا جاسکتا ہے: غیر قطبی (ہائیڈرو فوبک) ، قطبی (غیرضروری) ، تیزابیت یا بنیادی (جیسا کہ شکل 1 میں دکھایا گیا ہے)۔ ایک پیپٹائڈ تسلسل میں ، اگر تسلسل تشکیل دینے والے امینو ایسڈ زیادہ تر قطبی ہوتے ہیں (جیسا کہ شکل 1 میں گلابی رنگ میں نشان زد کیا جاتا ہے) ، جیسے سیسٹین ، گلوٹامین ، اسپرجین ، سیرین ، تھرینائن ، ٹائروسین ، وغیرہ۔ پھر اس پیپٹائڈ میں ایک مضبوط پولریٹی ہوسکتی ہے اور وہ پانی میں انتہائی گھلنشیل ہے۔ الٹ فیز کرومیٹوگرافی کے ذریعہ ان مضبوط قطبی پیپٹائڈ نمونوں کے طہارت کے طریقہ کار کے دوران ، ہائیڈروفوبک فیز کے خاتمے کے نام سے ایک رجحان واقع ہوگا (سنتائی ٹیکنالوجیز کے ذریعہ پہلے شائع شدہ ایپلی کیشن نوٹ کا حوالہ دیں: ہائیڈرو فوبک فیز میں کمی ، اے کیو ریورسڈ فیز کرومیٹوگرافی کالم اور ان کے استعمال)۔ باقاعدہ C18 کالموں کے مقابلے میں ، بہتر C18AQ کالم مضبوط قطبی یا ہائیڈرو فیلک نمونوں کی تطہیر کے لئے سب سے زیادہ موزوں ہیں۔ اس پوسٹ میں ، ایک مضبوط قطبی پیپٹائڈ کو نمونہ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا اور C18AQ کالم کے ذریعہ پاک کیا گیا تھا۔ اس کے نتیجے میں ، تقاضوں کو پورا کرنے والے ہدف کی مصنوعات کو حاصل کیا گیا تھا اور اسے مندرجہ ذیل تحقیق اور ترقی میں استعمال کیا جاسکتا ہے۔
| آلہ | سیپابین™مشین 2 | |||
| کارتوس | 12 جی سیپفلاش سی 18 آر پی فلیش کارتوس (کروی سلکا ، 20-45 μm ، 100 Å ، آرڈر نونبر ： SW-5222-012-SP) | 12 جی سیپفلاش سی 18 اے کیو آر پی فلیش کارتوس (کروی سلکا ، 20-45 μm ، 100 Å ، آرڈر نمبر ： SW-522-012-SP (AQ)) | ||
| طول موج | 254 این ایم ، 220 این ایم | 214 این ایم | ||
| موبائل مرحلہ | سالوینٹ اے: پانی سالوینٹ بی: ایسٹونیٹرائل | |||
| بہاؤ کی شرح | 15 ملی لیٹر/منٹ | 20 ملی لیٹر/منٹ | ||
| نمونہ لوڈنگ | 30 ملی گرام | |||
| تدریجی | وقت (سی وی) | سالوینٹ بی (٪) | وقت (منٹ) | سالوینٹ بی (٪) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
نتائج اور بحث
پولر پیپٹائڈ نمونے کے لئے طہارت کی کارکردگی کو باقاعدہ C18 کالم اور C18AQ کالم کے مابین موازنہ کرنے کے ل we ، ہم نے شروع کے طور پر نمونے کی فلیش صاف کرنے کے لئے باقاعدہ C18 کالم کا استعمال کیا۔ جیسا کہ شکل 2 میں دکھایا گیا ہے ، اعلی آبی تناسب کی وجہ سے سی 18 زنجیروں کے ہائیڈروفوبک مرحلے کے خاتمے کی وجہ سے ، نمونہ کو باقاعدگی سے سی 18 کارتوس پر بمشکل برقرار رکھا گیا تھا اور موبائل فیز کے ذریعہ براہ راست اس کا استعمال ختم کردیا گیا تھا۔ اس کے نتیجے میں ، نمونہ مؤثر طریقے سے الگ اور صاف نہیں کیا گیا تھا۔
چترا 2۔ باقاعدہ C18 کارتوس پر نمونے کا فلیش کرومیٹوگرام۔
اگلا ، ہم نے نمونے کی فلیش صاف کرنے کے لئے C18AQ کالم استعمال کیا۔ جیسا کہ شکل 3 میں دکھایا گیا ہے ، پیپٹائڈ کو کالم پر مؤثر طریقے سے برقرار رکھا گیا تھا اور پھر اسے باہر نکال دیا گیا تھا۔ ہدف کی مصنوعات کو خام نمونے میں نجاست سے الگ کیا گیا تھا اور جمع کیا گیا تھا۔ لائو فیلائزیشن کے بعد اور پھر ایچ پی ایل سی کے ذریعہ تجزیہ کیا گیا ، صاف شدہ مصنوعات کی پاکیزگی 98.2 ٪ ہے اور اسے اگلے مرحلہ تحقیق اور ترقی کے لئے مزید استعمال کیا جاسکتا ہے۔
چترا 3۔ C18AQ کارتوس پر نمونے کا فلیش کرومیٹوگرام۔
آخر میں ، Sepaflash C18AQ RP فلیش کارتوس نے فلیش کرومیٹوگرافی سسٹم سیپابین کے ساتھ مل کر™مشین مضبوط قطبی یا ہائیڈرو فیلک نمونوں کی تطہیر کے لئے تیز اور موثر حل پیش کرسکتی ہے۔
سینٹائی ٹکنالوجی (جیسا کہ ٹیبل 2 میں دکھایا گیا ہے) سے مختلف خصوصیات کے ساتھ سیپفلاش سی 18 اے کیو آر پی فلیش کارتوس کی ایک سیریز ہے۔
| آئٹم نمبر | کالم کا سائز | بہاؤ کی شرح (ایم ایل/منٹ) | زیادہ سے زیادہ دباؤ (PSI/بار) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 جی | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 جی | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 جی | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 جی | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 جی | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 جی | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 جی | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 جی | 40-80 | 250/17.2 |
ٹیبل 2۔ سیپفلاش سی 18 اے کیو آر پی فلیش کارتوس۔ پیکنگ میٹریل: اعلی کارکردگی والے کروی C18 (AQ) -بنڈڈ سلکا ، 20-45 μm ، 100 Å۔
سیپابین ™ مشین کی تفصیلی وضاحتوں ، یا سیپفلاش سیریز فلیش کارتوس کے بارے میں آرڈرنگ کی معلومات کے بارے میں مزید معلومات کے ل please ، براہ کرم ہماری ویب سائٹ ملاحظہ کریں۔
پوسٹ ٹائم: اکتوبر -12-2018