SepaFlash™ کالم

سانٹائی سالوینٹ لائنز کٹ اور لوازمات

نہیں۔

C18 فلیش کالم کے ساتھ زیادہ سے زیادہ صاف کرنے کے لیے، براہ کرم ان اقدامات پر عمل کریں:
① 10 - 20 CVs (کالم والیوم) کے لیے 100% مضبوط (نامیاتی) سالوینٹ کے ساتھ کالم کو فلش کریں، عام طور پر میتھانول یا ایسٹونیٹرائل۔
② مزید 3 - 5 CVs کے لیے کالم کو 50% مضبوط + 50% آبی (اگر additives کی ضرورت ہو تو انہیں شامل کریں) کے ساتھ فلش کریں۔
③ 3 - 5 CVs کے لیے ابتدائی گریڈینٹ حالات کے ساتھ کالم کو فلش کریں۔

4g اور 330g کے درمیان کالم کے سائز کے لیے، ان فلیش کالمز میں معیاری Luer کنیکٹر استعمال کیا جاتا ہے۔ 800g، 1600g اور 3000g کے کالم سائز کے لیے، ان بڑے فلیش کالموں کو فلیش کرومیٹوگرافی سسٹم پر نصب کرنے کے لیے اضافی کنیکٹر اڈاپٹر استعمال کیے جائیں۔ مزید تفصیلات کے لیے برائے مہربانی 800g، 1600g، 3kg فلیش کالم کے لیے دستاویز Santai Adapter Kit دیکھیں۔

نارمل فیز کالم کے لیے موبائل فیز استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے جہاں میتھانول کا تناسب 25% سے زیادہ نہ ہو۔

عام طور پر، موبائل فیز کو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے جہاں قطبی سالوینٹس کا تناسب 5% سے زیادہ نہیں ہوتا ہے۔ قطبی سالوینٹس میں DMSO، DMF، THF، TEA وغیرہ شامل ہیں۔

ٹھوس نمونے کی لوڈنگ ایک مفید تکنیک ہے جو نمونے کو کالم پر صاف کرنے کے لیے لوڈ کرتی ہے، خاص طور پر کم حل پذیری کے نمونوں کے لیے۔ اس صورت میں، iLOK فلیش کارتوس ایک بہت موزوں انتخاب ہے۔
عام طور پر، نمونے کو ایک مناسب سالوینٹس میں تحلیل کیا جاتا ہے اور ایک ٹھوس جذب کرنے والے پر جذب کیا جاتا ہے جو کہ فلیش کالموں میں استعمال کیا جاتا ہے، بشمول ڈائیٹومیسیئس ارتھز یا سلکا یا دیگر مواد۔ بقایا سالوینٹ کو ہٹانے / بخارات بننے کے بعد، جذب کو جزوی طور پر بھرے ہوئے کالم کے اوپر یا خالی ٹھوس لوڈنگ کارٹریج میں ڈال دیا جاتا ہے۔ مزید تفصیلی معلومات کے لیے، براہ کرم مزید تفصیلات کے لیے دستاویز iLOK-SL کارٹریج صارف گائیڈ سے رجوع کریں۔

کالم کا حجم تقریباً ڈیڈ والیوم (VM) کے برابر ہوتا ہے جب کالم کو انجیکٹر اور ڈیٹیکٹر سے جوڑنے والی نلیاں میں اضافی حجم کو نظر انداز کیا جاتا ہے۔

ڈیڈ ٹائم (ٹی ایم) وہ وقت ہے جو کسی غیر محفوظ جزو کے اخراج کے لیے درکار ہوتا ہے۔

ڈیڈ والیوم (VM) موبائل فیز کا حجم ہے جو کسی غیر محفوظ جزو کے اخراج کے لیے درکار ہے۔ ڈیڈ والیوم کا حساب درج ذیل مساوات سے لگایا جا سکتا ہے: VM =F0*tM۔

مندرجہ بالا مساوات میں، F0 موبائل مرحلے کی بہاؤ کی شرح ہے۔

نہیں۔

سلیکا فلیش کالم ڈسپوزایبل اور واحد استعمال کے لیے ہیں، لیکن مناسب ہینڈلنگ کے ساتھ، سلیکا کارتوس کو کارکردگی کی قربانی کے بغیر دوبارہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔
دوبارہ استعمال کرنے کے لیے، سلیکا فلیش کالم کو کمپریسڈ ہوا سے خشک کرنے یا آئسوپروپینول کے ساتھ فلش کرکے محفوظ کرنے کی ضرورت ہے۔

مناسب اسٹوریج C18 فلیش کالمز کو دوبارہ استعمال کرنے کی اجازت دے گا:
• استعمال کرنے کے بعد کالم کو کبھی بھی خشک نہ ہونے دیں۔
کالم کو 80% میتھانول یا acetonitrile کے ساتھ پانی میں 3 - 5 CVs کے لیے فلش کرکے تمام آرگینک موڈیفائرز کو ہٹا دیں۔
• مذکورہ بالا فلشنگ سالوینٹس میں کالم کو اینڈ فٹنگ کے ساتھ اسٹور کریں۔

220 گرام سے اوپر کے بڑے سائز کے کالموں کے لیے، پری توازن کے عمل میں تھرمل اثر واضح ہے۔ واضح تھرمل اثر سے بچنے کے لیے پیشگی توازن کے عمل میں بہاؤ کی شرح کو تجویز کردہ بہاؤ کی شرح کے 50-60% پر سیٹ کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

مخلوط سالوینٹس کا تھرمل اثر سنگل سالوینٹ سے زیادہ واضح ہے۔ مثال کے طور پر سالوینٹ سسٹم سائکلوہیکسین/ایتھیل ایسیٹیٹ کو لیں، یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ پری توازن کے عمل میں 100% سائکلوہیکسین استعمال کریں۔ جب پری توازن مکمل ہو جاتا ہے، علیحدگی کا تجربہ پیش سیٹ سالوینٹ سسٹم کے مطابق کیا جا سکتا ہے۔