-
ہمیں علیحدگی سے پہلے کالم کو متوازن کرنے کی ضرورت کیوں ہے؟
کالم کا توازن کالم کو خارجی اثر سے نقصان پہنچنے سے بچا سکتا ہے جب سالوینٹ کالم میں تیزی سے فلش ہوتا ہے۔ جبکہ کالم میں پہلے سے پیک شدہ خشک سلیکا کو سالوینٹس کے ذریعے پہلی بار علیحدگی کے دوران رابطہ کیا جاتا ہے، خاص طور پر جب سالوینٹ بہت زیادہ بہاؤ کی شرح میں بہہ جاتا ہے تو بہت زیادہ گرمی جاری ہو سکتی ہے۔ یہ گرمی کالم کے جسم کو خراب کرنے اور اس طرح کالم سے سالوینٹ کے رساو کا سبب بن سکتی ہے۔ بعض صورتوں میں، یہ گرمی گرمی کے حساس نمونے کو بھی نقصان پہنچا سکتی ہے۔
-
جب پمپ کی آواز پہلے سے زیادہ بلند ہو تو کیسے کریں؟
یہ پمپ کے گھومنے والے شافٹ میں چکنا کرنے والے تیل کی کمی کی وجہ سے ہوسکتا ہے۔
-
آلے کے اندر نلیاں اور کنکشن کا حجم کیا ہے؟
سسٹم نلیاں، کنیٹرز اور مکسنگ چیمبر کا کل حجم تقریباً 25 ملی لیٹر ہے۔
-
جب فلیش کرومیٹوگرام میں منفی سگنل کا ردعمل، یا فلیش کرومیٹوگرام میں ایلوٹنگ چوٹی غیر معمولی ہو تو کیسے کریں…
ڈیٹیکٹر ماڈیول کا فلو سیل اس نمونے سے آلودہ ہوتا ہے جس میں مضبوط UV جذب ہوتا ہے۔ یا یہ سالوینٹ UV جذب کی وجہ سے ہوسکتا ہے جو ایک عام رجحان ہے۔ براہ کرم درج ذیل آپریشن کریں:
1۔ فلیش کالم کو ہٹائیں اور سسٹم نلیاں کو مضبوط قطبی سالوینٹ سے فلش کریں پھر کمزور قطبی سالوینٹ کے ساتھ۔
2. سالوینٹ UV جذب کا مسئلہ: جیسے کہ n-hexane اور dichloromethane (DCM) کو ایلوٹنگ سالوینٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، جیسا کہ DCM کا تناسب بڑھتا ہے، DCM کے جذب ہونے کے بعد سے Y-axis پر کرومیٹوگرام کی بیس لائن صفر سے نیچے رہ سکتی ہے۔ 254 nm پر n-hexane سے کم ہے۔ ایسا ہونے کی صورت میں، ہم SepaBean ایپ میں علیحدگی کے چلنے والے صفحہ پر "زیرو" بٹن پر کلک کرکے اسے سنبھال سکتے ہیں۔
3. ڈیٹیکٹر ماڈیول کا فلو سیل بہت زیادہ آلودہ ہے اور اسے الٹراسونک طریقے سے صاف کرنے کی ضرورت ہے۔
-
جب کالم ہولڈر کا سر خود بخود اوپر نہیں اٹھتا ہے تو کیسے کریں؟
اس کی وجہ یہ ہو سکتی ہے کہ کالم ہولڈر کے سر کے ساتھ ساتھ بنیادی حصے پر کنیکٹر سالوینٹ کے ذریعے پھول گئے ہیں تاکہ کنیکٹر پھنس جائیں۔
صارف تھوڑی سی طاقت کا استعمال کرکے کالم ہولڈر کے سر کو دستی طور پر اٹھا سکتا ہے۔ جب کالم ہولڈر ہیڈ کو ایک خاص اونچائی تک اٹھایا جاتا ہے، تو کالم ہولڈر ہیڈ کو اس پر موجود بٹنوں کو چھو کر حرکت کرنے کے قابل ہونا چاہیے۔ اگر کالم ہولڈر ہیڈ کو دستی طور پر نہیں اٹھایا جا سکتا تو صارف کو مقامی تکنیکی مدد سے رابطہ کرنا چاہیے۔
ہنگامی متبادل طریقہ: صارف اس کے بجائے کالم ہولڈر ہیڈ کے اوپری حصے پر کالم انسٹال کرسکتا ہے۔ مائع نمونہ براہ راست کالم پر انجکشن کیا جا سکتا ہے. ٹھوس نمونہ لوڈنگ کالم علیحدگی کالم کے سب سے اوپر پر نصب کیا جا سکتا ہے.
-
ڈیٹیکٹر کی شدت کمزور ہو جائے تو کیسے کریں؟
1. روشنی کے منبع کی کم توانائی؛
2. گردشی تالاب آلودہ ہے۔ بدیہی طور پر، کوئی سپیکٹرل چوٹی نہیں ہے یا اسپیکٹرل چوٹی علیحدگی میں چھوٹی ہے، انرجی سپیکٹرا 25% سے کم کی قدر ظاہر کرتا ہے۔
براہ کرم ٹیوب کو 30 منٹ کے لیے 10ml/min پر مناسب سالوینٹ کے ساتھ فلش کریں اور انرجی اسپیکٹرم کا مشاہدہ کریں۔ اگر سپیکٹرم بدل گیا ہے تو، گردش پول آلودہ ہے، براہ کرم مناسب سالوینٹ کے ساتھ صاف کرنا جاری رکھیں.
-
جب مشین کے اندر سے سیال نکلے تو کیسے کریں؟
براہ کرم ٹیوب اور کنیکٹر کو باقاعدگی سے چیک کریں۔
-
جب ایتھیل ایسیٹیٹ کو ایلوٹنگ سالوینٹ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا تو بیس لائن اوپر کی طرف بڑھتی رہے تو کیسے کریں؟
پتہ لگانے کی طول موج 245 nm سے کم طول موج پر سیٹ کی جاتی ہے کیونکہ ایتھائل ایسیٹیٹ کا پتہ لگانے کی حد 245nm سے کم پر مضبوط جذب ہوتا ہے۔ جب ایتھیل ایسیٹیٹ کو ایلوٹنگ سالوینٹ کے طور پر استعمال کیا جائے گا اور ہم 220 nm کا پتہ لگانے والی طول موج کے طور پر انتخاب کریں گے تو بیس لائن ڈرفٹنگ سب سے زیادہ غالب ہوگی۔
براہ کرم پتہ لگانے کی طول موج کو تبدیل کریں۔ پتہ لگانے کی طول موج کے طور پر 254nm کا انتخاب کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔ اگر نمونے کی کھوج کے لیے 220 nm واحد طول موج موزوں ہے، تو صارف کو احتیاط کے ساتھ ایلیونٹ جمع کرنا چاہیے اور اس معاملے میں ضرورت سے زیادہ سالوینٹ جمع کیا جا سکتا ہے۔
-
جب پری کالم ٹیوبنگ میں بلبلے پائے جائیں تو کیسے کریں؟
کسی بھی نجاست کو دور کرنے کے لیے سالوینٹ فلٹر ہیڈ کو مکمل طور پر صاف کریں۔ ناقابل حل سالوینٹ کے مسائل سے بچنے کے لیے سسٹم کو مکمل طور پر فلش کرنے کے لیے ایتھنول یا آئسوپروپینول کا استعمال کریں۔
سالوینٹ فلٹر ہیڈ کو صاف کرنے کے لیے، فلٹر کو فلٹر ہیڈ سے الگ کریں اور اسے چھوٹے برش سے صاف کریں۔ پھر فلٹر کو ایتھنول سے دھو کر بلو ڈرائی کریں۔ مستقبل کے استعمال کے لیے فلٹر ہیڈ کو دوبارہ جمع کریں۔
-
عام مرحلے کی علیحدگی اور الٹ مرحلے کی علیحدگی کے درمیان کیسے سوئچ کریں؟
یا تو عام مرحلے کی علیحدگی سے الٹ مرحلے کی علیحدگی کی طرف سوئچ کریں یا اس کے برعکس، ایتھنول یا آئسوپروپانول کو ٹرانزیشن سالوینٹس کے طور پر استعمال کیا جانا چاہیے تاکہ نلیاں میں کسی بھی ناقابل حل سالوینٹس کو مکمل طور پر باہر نکال دیا جائے۔
سالوینٹ لائنوں اور تمام اندرونی نلیوں کو فلش کرنے کے لیے بہاؤ کی شرح 40 ملی لیٹر/منٹ مقرر کرنے کا مشورہ دیا جاتا ہے۔
-
جب کالم ہولڈر کو کالم ہولڈر کے نیچے کے ساتھ مکمل طور پر جوڑا نہیں جا سکتا ہے تو کیسے کریں؟
براہ کرم سکرو کو ڈھیلا کرنے کے بعد کالم ہولڈر کے نیچے کی جگہ تبدیل کریں۔
-
اگر نظام کا دباؤ بہت زیادہ ہو جائے تو کیسے کریں؟
1. موجودہ فلیش کالم کے لیے سسٹم کے بہاؤ کی شرح بہت زیادہ ہے۔
2. نمونے میں حل پذیری کم ہوتی ہے اور موبائل مرحلے سے تیز ہوتی ہے، اس طرح نلیاں بند ہوجاتی ہیں۔
3. دوسری وجہ نلیاں بند ہونے کا سبب بنتی ہے۔
