اکثر پوچھے گئے سوالات

کسی بھی نجاست کو دور کرنے کے لیے سالوینٹ فلٹر ہیڈ کو مکمل طور پر صاف کریں، الٹراسونک صفائی کا استعمال کرنا بہتر ہے۔

1. ڈیٹیکٹر کا فلو سیل آلودہ تھا۔

2. روشنی کے منبع کی کم توانائی۔

3. پمپ پلس کا اثر.

4. ڈیٹیکٹر کے درجہ حرارت کا اثر.

5. ٹیسٹ پول میں بلبلے ہیں.

6. کالم یا موبائل مرحلے کی آلودگی۔

تیاری کے کرومیٹوگرافی میں، ایک چھوٹی سی مقدار میں بیس لائن شور کا علیحدگی پر بہت کم اثر پڑتا ہے۔

1. مشین کے پچھلے حصے میں ٹیوب کنیکٹر ڈھیلا یا خراب ہے؛ ٹیوب کنیکٹر کو تبدیل کریں؛

2. گیس وے چیک والو کو نقصان پہنچا ہے۔ چیک والو کو تبدیل کریں۔

علیحدگی کے بعد، تجرباتی ریکارڈ کی سالمیت کو یقینی بنانے کے لیے شٹ ڈاؤن سے پہلے 3-5 منٹ انتظار کرنا ضروری ہے۔

کالم کا توازن کالم کو خارجی اثر سے نقصان پہنچنے سے بچا سکتا ہے جب سالوینٹ کالم میں تیزی سے فلش ہوتا ہے۔ جبکہ کالم میں پہلے سے پیک شدہ خشک سلیکا کو سالوینٹس کے ذریعے پہلی بار علیحدگی کے دوران رابطہ کیا جاتا ہے، خاص طور پر جب سالوینٹ بہت زیادہ بہاؤ کی شرح میں بہہ جاتا ہے تو بہت زیادہ گرمی جاری ہو سکتی ہے۔ یہ گرمی کالم کے جسم کو خراب کرنے اور اس طرح کالم سے سالوینٹ کے رساو کا سبب بن سکتی ہے۔ بعض صورتوں میں، یہ گرمی گرمی کے حساس نمونے کو بھی نقصان پہنچا سکتی ہے۔

یہ پمپ کے گھومنے والے شافٹ میں چکنا کرنے والے تیل کی کمی کی وجہ سے ہوسکتا ہے۔

سسٹم نلیاں، کنیٹرز اور مکسنگ چیمبر کا کل حجم تقریباً 25 ملی لیٹر ہے۔

ڈیٹیکٹر ماڈیول کا فلو سیل اس نمونے سے آلودہ ہوتا ہے جس میں مضبوط UV جذب ہوتا ہے۔ یا یہ سالوینٹ UV جذب کی وجہ سے ہوسکتا ہے جو ایک عام رجحان ہے۔ براہ کرم درج ذیل آپریشن کریں:

1۔ فلیش کالم کو ہٹائیں اور سسٹم نلیاں کو مضبوط قطبی سالوینٹ سے فلش کریں پھر کمزور قطبی سالوینٹ کے ساتھ۔

2. سالوینٹ UV جذب کا مسئلہ: جیسے کہ n-hexane اور dichloromethane (DCM) کو ایلوٹنگ سالوینٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، جیسا کہ DCM کا تناسب بڑھتا ہے، DCM کے جذب ہونے کے بعد سے Y-axis پر کرومیٹوگرام کی بیس لائن صفر سے نیچے رہ سکتی ہے۔ 254 nm پر n-hexane سے کم ہے۔ ایسا ہونے کی صورت میں، ہم SepaBean ایپ میں علیحدگی کے چلنے والے صفحہ پر "زیرو" بٹن پر کلک کرکے اسے سنبھال سکتے ہیں۔

3. ڈیٹیکٹر ماڈیول کا فلو سیل بہت زیادہ آلودہ ہے اور اسے الٹراسونک طریقے سے صاف کرنے کی ضرورت ہے۔

اس کی وجہ یہ ہو سکتی ہے کہ کالم ہولڈر کے سر کے ساتھ ساتھ بنیادی حصے پر کنیکٹر سالوینٹ کے ذریعے پھول گئے ہیں تاکہ کنیکٹر پھنس جائیں۔

صارف تھوڑی سی طاقت کا استعمال کرکے کالم ہولڈر کے سر کو دستی طور پر اٹھا سکتا ہے۔ جب کالم ہولڈر ہیڈ کو ایک خاص اونچائی تک اٹھایا جاتا ہے، تو کالم ہولڈر ہیڈ کو اس پر موجود بٹنوں کو چھو کر حرکت کرنے کے قابل ہونا چاہیے۔ اگر کالم ہولڈر ہیڈ کو دستی طور پر نہیں اٹھایا جا سکتا تو صارف کو مقامی تکنیکی مدد سے رابطہ کرنا چاہیے۔

ہنگامی متبادل طریقہ: صارف اس کے بجائے کالم ہولڈر ہیڈ کے اوپری حصے پر کالم انسٹال کرسکتا ہے۔ مائع نمونہ براہ راست کالم پر انجکشن کیا جا سکتا ہے. ٹھوس نمونہ لوڈنگ کالم علیحدگی کالم کے سب سے اوپر پر نصب کیا جا سکتا ہے.

1. روشنی کے منبع کی کم توانائی؛

2. گردشی تالاب آلودہ ہے۔ بدیہی طور پر، کوئی سپیکٹرل چوٹی نہیں ہے یا اسپیکٹرل چوٹی علیحدگی میں چھوٹی ہے، انرجی سپیکٹرا 25% سے کم کی قدر ظاہر کرتا ہے۔

براہ کرم ٹیوب کو 30 منٹ کے لیے 10ml/min پر مناسب سالوینٹ کے ساتھ فلش کریں اور انرجی اسپیکٹرم کا مشاہدہ کریں۔ اگر سپیکٹرم بدل گیا ہے تو، گردش پول آلودہ ہے، براہ کرم مناسب سالوینٹ کے ساتھ صاف کرنا جاری رکھیں.

براہ کرم ٹیوب اور کنیکٹر کو باقاعدگی سے چیک کریں۔

پتہ لگانے کی طول موج 245 nm سے کم طول موج پر سیٹ کی جاتی ہے کیونکہ ایتھائل ایسیٹیٹ کا پتہ لگانے کی حد 245nm سے کم پر مضبوط جذب ہوتا ہے۔ جب ایتھیل ایسیٹیٹ کو ایلوٹنگ سالوینٹ کے طور پر استعمال کیا جائے گا اور ہم 220 nm کا پتہ لگانے والی طول موج کے طور پر انتخاب کریں گے تو بیس لائن ڈرفٹنگ سب سے زیادہ غالب ہوگی۔

براہ کرم پتہ لگانے کی طول موج کو تبدیل کریں۔ پتہ لگانے کی طول موج کے طور پر 254nm کا انتخاب کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔ اگر نمونے کی کھوج کے لیے 220 nm واحد طول موج موزوں ہے، تو صارف کو احتیاط کے ساتھ ایلیونٹ جمع کرنا چاہیے اور اس معاملے میں ضرورت سے زیادہ سالوینٹ جمع کیا جا سکتا ہے۔