رۈي خۇاڭ ، بو شۈ
Application R&D Center
تونۇشتۇرۇش
پېپتىد ئامىنو كىسلاتاسىدىن تەركىب تاپقان بىرىكمە بولۇپ ، ئامىنو كىسلاتا قالدۇقىنىڭ تۈرى ۋە تەرتىپىنىڭ ئوخشىماسلىقى سەۋەبىدىن ھەر بىرىنىڭ ئۆزگىچە فىزىكىلىق ۋە خىمىيىلىك خۇسۇسىيىتى بار.قاتتىق باسقۇچلۇق خىمىيىلىك بىرىكتۈرۈشنىڭ تەرەققىي قىلىشىغا ئەگىشىپ ، ھەر خىل ئاكتىپ پېپتىدلارنىڭ خىمىيىلىك بىرىكىشى زور ئىلگىرىلەشكە ئېرىشتى.قانداقلا بولمىسۇن ، قاتتىق فازا بىرىكتۈرۈش ئارقىلىق ئېرىشكەن پېپتىدنىڭ مۇرەككەپ تەركىبى سەۋەبىدىن ، ئاخىرقى مەھسۇلاتنى ئىشەنچلىك ئايرىش ئۇسۇلى ئارقىلىق ساپلاشتۇرۇش كېرەك.پېپتىدلارنىڭ كۆپ ئىشلىتىلىدىغان ساپلاشتۇرۇش ئۇسۇللىرى ئىئون ئالماشتۇرۇش خروموگرافىيىسى (IEC) ۋە تەتۈر باسقۇچلۇق يۇقىرى ئىقتىدارلىق سۇيۇقلۇق خروموگرافىيە (RP-HPLC) نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، بۇلار ئەۋرىشكە يۈكلەش ئىقتىدارىنىڭ تۆۋەن بولۇشى ، ئايرىش مېدىياسىنىڭ تەننەرخى يۇقىرى ، مۇرەككەپ ۋە قىممەت بولغان ئايرىش ئۈسكۈنىلىرى ، كىچىك مولېكۇلا پېپتىدلىرىنى تېز تازىلاش ئۈچۈن (MW <1 kDa) ، مۇۋەپپەقىيەتلىك ئىلتىماس دېلوسى سانتاي تېخنىكا شىركىتى تەرىپىدىن ئېلان قىلىنغان بولۇپ ، بۇنىڭدا SepaFlash RP C18 كارىدورى تىموپېنتىن (TP-5) نى تېز تازىلاشقا ئىشلىتىلگەن. تەلەپكە ماس كېلىدىغان نىشان مەھسۇلاتقا ئېرىشتى.
رەسىم 1. 20 كۆپ ئۇچرايدىغان ئامىنو كىسلاتاسى (www.bachem.com دىن كۆپەيتىلگەن).
پېپتىد تەركىبىدە كۆپ ئۇچرايدىغان 20 خىل ئامىنو كىسلاتاسى بار.بۇ خىل ئامىنو كىسلاتاسىنى قۇتۇپ ۋە كىسلاتا ئاساسى خۇسۇسىيىتىگە ئاساسەن تۆۋەندىكى گۇرۇپپىلارغا بۆلۈشكە بولىدۇ: قۇتۇپسىز (گىدروپوبىك) ، قۇتۇپ (توك تولۇقلانمىغان) ، كىسلاتالىق ياكى ئاساسىي (1-رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك).پېپتىد تەرتىپىدە ، ئەگەر بۇ تەرتىپنى تەشكىل قىلىدىغان ئامىنو كىسلاتاسى كۆپىنچە قۇتۇپلۇق بولسا (1-رەسىمدىكى ھالرەڭ رەڭدە كۆرسىتىلگەندەك) ، مەسىلەن سىستايىن ، گلۇتامىن ، ئاسپاراگىن ، سېرېن ، ترېئون ، تىروسىن قاتارلىقلار ، ئۇنداقتا بۇ پېپتىدنىڭ كۈچلۈك بولۇشى مۇمكىن. كۆپ قۇتۇپلۇق بولۇپ ، سۇدا ئېرىيدۇ.تەتۈر باسقۇچلۇق خروموگرافىيە ئارقىلىق بۇ كۈچلۈك قۇتۇپ پېپتىد ئەۋرىشكىسىنى تازىلاش جەريانىدا ، گىدروپوبىك فازا يىمىرىلىش دەپ ئاتىلىدىغان ھادىسە يۈز بېرىدۇ (سانتاي تېخنىكىسىنىڭ ئىلگىرى ئېلان قىلىنغان ئىلتىماس خاتىرىسىگە قاراڭ: گىدروپوبىك فازا يىمىرىلىشى ، AQ تەتۈر باسقۇچلۇق خروموگرافىيە تۈۋرۈكى ۋە ئۇلارنىڭ قوللىنىلىشى).ئادەتتىكى C18 تۈۋرۈكىگە سېلىشتۇرغاندا ، ياخشىلانغان C18AQ تۈۋرۈكى كۈچلۈك قۇتۇپ ياكى گىدروفىللىق ئەۋرىشكىنى تازىلاشقا ئەڭ ماس كېلىدۇ.بۇ يازمىدا كۈچلۈك قۇتۇپ پېپتىد ئەۋرىشكە سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن ۋە C18AQ ستون تەرىپىدىن ساپلاشتۇرۇلغان.نەتىجىدە ، تەلەپكە ماس كېلىدىغان مەھسۇلاتقا ئېرىشىپ ، تۆۋەندىكى تەتقىقات ۋە تەرەققىياتتا ئىشلىتىشكە بولىدۇ.
| Instrument | SepaBean™machine 2 | |||
| Cartridges | 12 g SepaFlash C18 RP چاقماق كارىدورى (شارسىمان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å ، زاكاز راھىبى ： SW-5222-012-SP) | 12 g SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى (شارسىمان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å ، زاكاز نومۇرى ： SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| دولقۇن ئۇزۇنلۇقى | 254 nm, 220 nm | 214 nm | ||
| كۆچمە باسقۇچ | ئېرىتكۈچى A: سۇ Solvent B: Acetonitrile | |||
| ئېقىش نىسبىتى | 15 mL / min | 20 mL / min | ||
| ئۈلگە يۈكلەش | 30 mg | |||
| Gradient | ۋاقىت (CV) | Solvent B (%) | ۋاقىت (مىنۇت) | Solvent B (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
نەتىجە ۋە مۇلاھىزە
ئادەتتىكى C18 تۈۋرۈكى بىلەن C18AQ تۈۋرۈكى ئارىسىدىكى قۇتۇپ پېپتىد ئەۋرىشكىسىنىڭ ساپلاشتۇرۇش ئىقتىدارىنى سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن ، ئەۋرىشكىنى چاقماق تازىلاش ئۈچۈن دائىملىق C18 ستوندىن پايدىلاندۇق.2-رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، يۇقىرى سۇ نىسبىتى كەلتۈرۈپ چىقارغان C18 زەنجىرىنىڭ گىدروپوبىك باسقۇچىنىڭ يىمىرىلىشى سەۋەبىدىن ، ئەۋرىشكە ئادەتتىكى C18 كارىدورىدا ئاران ساقلىنىپ ، كۆچمە باسقۇچ بىلەن بىۋاسىتە چىقىرىۋېتىلدى.نەتىجىدە ئەۋرىشكە ئۈنۈملۈك ئايرىلمىدى ۋە ساپلاشتۇرۇلمىدى.
رەسىم 2. دائىملىق C18 كارىدورىدىكى ئەۋرىشكىنىڭ چاقماق خروموگراممىسى.
كېيىنكى قەدەمدە ، ئەۋرىشكىنى چاقماق تازىلاش ئۈچۈن C18AQ ستون ئىشلەتتۇق.3-رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، پېپتىد تۈۋرۈكتە ئۈنۈملۈك ساقلانغاندىن كېيىن چىقىرىۋېتىلگەن.نىشان مەھسۇلات خام ئەۋرىشكىدىكى بۇلغانمىلاردىن ئايرىپ يىغىۋېلىندى.لىيوفىللاشتۇرۇلغاندىن كېيىن ، ئاندىن HPLC تەرىپىدىن ئانالىز قىلىنغاندىن كېيىن ، ساپلاشتۇرۇلغان مەھسۇلاتنىڭ ساپلىقى% 98.2 بولۇپ ، كېيىنكى قەدەمدىكى تەتقىقات ۋە تەرەققىياتقا ئىشلىتىلىدۇ.
رەسىم 3. C18AQ كارىدورىدىكى ئەۋرىشكىنىڭ چاقماق خروموگراممىسى.
خۇلاسىلىگەندە ، SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى چاقماق خروموگرافىيە سىستېمىسى SepaBean بىلەن بىرلەشتۈرۈلگەن™ماشىنا كۈچلۈك قۇتۇپ ياكى گىدروفىللىق ئەۋرىشكىنى تازىلاش ئۈچۈن تېز ۋە ئۈنۈملۈك ھەل قىلىش چارىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ.
بۇ يەردە بىر يۈرۈش SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى بار بولۇپ ، سانتاي تېخنىكىسىنىڭ ئوخشىمىغان ئۆلچىمى بار (2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك).
| تۈر نومۇرى | ستون چوڭلۇقى | Flow Rate (mL / min) | Max.Pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
جەدۋەل 2. SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى.ئوراش ماتېرىياللىرى: يۇقىرى ئۈنۈملۈك شارسىمان C18 (AQ) باغلانغان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å.
SepaBean ™ ماشىنىسىنىڭ تەپسىلىي تەپسىلاتلىرى ياكى SepaFlash يۈرۈشلۈك چاقماق كارىدورىدىكى زاكاز ئۇچۇرلىرى ئۈچۈن تور بېتىمىزنى زىيارەت قىلىڭ.
يوللانغان ۋاقتى: 10-ئۆكتەبىردىن 12-ئۆكتەبىرگىچە