خوڭچېڭ ۋاڭ ، بو شۈ
Application R&D Center
تونۇشتۇرۇش
تۇراقلىق باسقۇچ ۋە كۆچمە باسقۇچنىڭ نىسپىي قۇتۇپلىرىغا ئاساسەن ، سۇيۇق خروموگرافىيەنى نورمال فازا خروموگرافىيىسى (NPC) ۋە تەتۈر فازا خروموگرافىيىسى (RPC) دەپ ئايرىشقا بولىدۇ.RPC غا نىسبەتەن ، كۆچمە باسقۇچنىڭ قۇتۇپلىقى تۇراقلىق باسقۇچقا قارىغاندا كۈچلۈك.RPC يۇقىرى ئۈنۈملۈك ، ئېنىقلىق دەرىجىسى ۋە ئېنىق ساقلاش مېخانىزمى سەۋەبىدىن سۇيۇق خروموگرافىيە ئايرىش شەكلىدە ئەڭ كۆپ قوللىنىلىدىغان بىرىگە ئايلاندى.شۇڭلاشقا RPC ئالكالوئىد ، كاربون سۇ بىرىكمىلىرى ، ياغ كىسلاتاسى ، ستېروئىد ، يادرو كىسلاتاسى ، ئامىنو كىسلاتاسى ، پېپتىد ، ئاقسىل قاتارلىق ھەر خىل قۇتۇپ ياكى قۇتۇپسىز بىرىكمىلەرنى ئايرىش ۋە ساپلاشتۇرۇشقا ماس كېلىدۇ. RPC دا ، ئەڭ كۆپ ئىشلىتىلىدىغان تۇراقلىق باسقۇچ. سىلىتسىي يىلىمى ماترىسسا C18 ، C8 ، C4 ، فېنىل ، سىيانو ، ئامىنو قاتارلىق ھەر خىل ئىقتىدار گۇرۇپپىلىرى بىلەن تۇتىشىدۇ.مۆلچەرلىنىشىچە ، RPC نىڭ% 80 تىن كۆپرەكى ھازىر C18 باغلىنىش باسقۇچىنى ئىشلىتىۋاتىدۇ.شۇڭلاشقا C18 خروموگرافىيە ئىستونى ھەر بىر تەجرىبىخانىدا كەم بولسا بولمايدىغان ئۇنىۋېرسال تۈۋرۈككە ئايلاندى.
گەرچە C18 تۈۋرۈكىنى ناھايىتى كەڭ قوللىنىشچان پروگراممىلاردا ئىشلىتىشكە بولسىمۇ ، ئەمما ، ئىنتايىن قۇتۇپلۇق ياكى يۇقىرى گىدروفىللىق بەزى ئەۋرىشكەلەرگە نىسبەتەن ، دائىملىق C18 تۈۋرۈكلەردە بۇ ئەۋرىشكىلەرنى تازىلاشتا مەسىلە كۆرۈلۈشى مۇمكىن.RPC دا ، كۆپ ئىشلىتىلىدىغان ئېرىتكۈچى ئېرىتكۈچىنى ئۇلارنىڭ قۇتۇپلىقىغا ئاساسەن زاكاز قىلىشقا بولىدۇ: سۇ <مېتانول <ئاتسېتىنىترىل <ئېتانول <تېتراخايدروفۇران <ئىزوپروپانول).بۇ ئەۋرىشكىلەرنىڭ (كۈچلۈك قۇتۇپ ياكى يۇقىرى گىدروفىللىق) ستوننىڭ ياخشى ساقلىنىشىغا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، كۆچمە باسقۇچ سۈپىتىدە سۇ سىستېمىسىنىڭ يۇقىرى نىسبىتىنى ئىشلىتىش كېرەك.قانداقلا بولمىسۇن ، ساپ سۇ سىستېمىسى (ساپ سۇ ياكى ساپ تۇز ئېرىتمىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ) نى كۆچمە باسقۇچ سۈپىتىدە ئىشلەتكەندە ، C18 تۈۋرۈكىنىڭ تۇراقلىق باسقۇچىدىكى ئۇزۇن كاربون زەنجىرى سۇدىن ساقلىنىپ ، ئۆز-ئارا ئارىلىشىپ كېتىدۇ ، نەتىجىدە شۇ ھامان تۆۋەنلەيدۇ. ئىستوننىڭ ساقلاش سىغىمى ھەتتا ساقلاپ قېلىش يوق.بۇ ھادىسە «گىدروپوبىك فازا يىمىرىلىش» دەپ ئاتىلىدۇ (1-رەسىمنىڭ سول تەرىپىدە كۆرسىتىلگەندەك).گەرچە بۇ خىل ئەھۋالنى مېتانول ياكى ئاتسېتىنىترىل قاتارلىق ئورگانىك ئېرىتكۈچىلەر بىلەن يۇيغاندا ئەسلىگە كەلتۈرگىلى بولسىمۇ ، ئەمما ئۇ يەنىلا تۈۋرۈككە زىيان سالىدۇ.شۇڭلاشقا ، بۇ ئەھۋالنىڭ يۈز بېرىشىنىڭ ئالدىنى ئېلىش كېرەك.
رەسىم 1. دائىملىق C18 ستون (سولدا) ۋە C18AQ ستون (ئوڭدا) سىلىتسىي يىلىمى يۈزىدىكى باغلانغان باسقۇچلارنىڭ سىخېما دىئاگراممىسى.
يۇقىرىدا تىلغا ئېلىنغان مەسىلىلەرنى ھەل قىلىش ئۈچۈن ، خروموگرافىك ئورالما ماتېرىيال ئىشلەپچىقارغۇچىلار تېخنىكىلىق ياخشىلاندى.بۇ ياخشىلىنىشلارنىڭ بىرى سىلىتسىيلىق ماترىسسا يۈزىدە گىدروفىللىق سىئونو گۇرۇپپىسىنىڭ كىرگۈزۈلۈشى (1-رەسىمنىڭ ئوڭ تەرىپىدە كۆرسىتىلگەندەك) بەزى ئۆزگەرتىشلەرنى ئېلىپ بېرىپ ، سىلىتسىي گېلىنىڭ يۈزىنى تېخىمۇ سۇيۇقلاندۇرۇۋاتىدۇ.شۇڭا سىلىتسىي يۈزىدىكى C18 زەنجىرىنى يۇقىرى سۇ شارائىتىدا تولۇق ئۇزارتقىلى ۋە گىدروپوبىك باسقۇچىنىڭ يىمىرىلىشىدىن ساقلانغىلى بولىدۇ.بۇ ئۆزگەرتىلگەن C18 تۈۋرۈكلىرى سۇ C18 تۈۋرۈكى دەپ ئاتىلىدۇ ، يەنى C18AQ تۈۋرۈكى ، ئۇلار يۇقىرى سۇ چىقىرىش شارائىتى ئۈچۈن لايىھەلەنگەن ،% 100 سۇ سىستېمىسىغا بەرداشلىق بېرەلەيدۇ.C18AQ تۈۋرۈكى كۈچلۈك قۇتۇپ بىرىكمىلىرىنى ئايرىش ۋە ساپلاشتۇرۇشتا كەڭ قوللىنىلدى ، بۇلار ئورگانىك كىسلاتا ، پېپتىد ، يادرو ۋە سۇدا ئېرىيدىغان ۋىتامىنلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.
تۇزسىزلاندۇرۇش ئەۋرىشكە ئۈچۈن چاقماق تازىلاشتا C18AQ تۈۋرۈكىنىڭ تىپىك قوللىنىلىشى بولۇپ ، ئەۋرىشكە ئېرىتمىسىدىكى تۇز ياكى بۇففېر زاپچاسلىرىنى چىقىرىپ تاشلاپ ، كېيىنكى تەتقىقاتلاردا ئەۋرىشكىنىڭ قوللىنىلىشىغا قۇلايلىق يارىتىدۇ.بۇ يازمىدا كۈچلۈك قۇتۇپلۇق پارلاق كۆك FCF ئەۋرىشكە سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن ۋە C18AQ ئىستونىدا ساپلاشتۇرۇلغان.ئەۋرىشكە ئېرىتمىسىنىڭ ئورنىنى بۇففېر ئېرىتمىسىدىن ئورگانىك ئېرىتكۈچى ئالماشتۇردى ، بۇنىڭ بىلەن تۆۋەندىكى ئايلانما پارغا ئايلىنىش شۇنداقلا ئېرىتكۈچى ۋە مەشغۇلات ۋاقتى تېجىلىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئەۋرىشكە تەركىبىدىكى بەزى بۇلغانمىلارنى چىقىرىپ تاشلاشنىڭ ساپلىقى يۇقىرى كۆتۈرۈلدى.
تەجرىبە بۆلۈمى
رەسىم 2. ئەۋرىشكىنىڭ خىمىيىلىك قۇرۇلمىسى.
پارلاق كۆك FCF بۇ يازمىدا ئەۋرىشكە سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.خام ئەۋرىشكىنىڭ ساپلىقى% 86 بولۇپ ، ئەۋرىشكىنىڭ خىمىيىلىك قۇرۇلمىسى 2-رەسىمدە كۆرسىتىلدى. ئەۋرىشكە ئېرىتمىسىنى تەييارلاش ئۈچۈن ، Brilliant Blue FCF نىڭ 300 مىللىگىرام پاراشوك خام قاتتىقلىقى 1 M NaH2PO4 بۇففېر ئېرىتمىسىدە ئېرىپ ياخشى سىلكىنىپ كەتتى. پۈتۈنلەي ئېنىق ھەل قىلىش چارىسى.ئاندىن ئەۋرىشكە ئېرىتمىسى چاقماق لامپىسىغا ئوكۇل ئۇردى.چاقماق تازىلاشنىڭ تەجرىبە قۇرۇلمىسى 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى.
| Instrument | SepaBean ™ ماشىنا2 | |||
| Cartridges | 12 g SepaFlash C18 RP چاقماق كارىدورى (شارسىمان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å ، زاكاز نومۇرى: SW-5222-012-SP) | 12 g SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى (شارسىمان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å ، زاكاز نومۇرى ： SW-5222-012-SP (AQ))） | ||
| دولقۇن ئۇزۇنلۇقى | 254 nm | |||
| كۆچمە باسقۇچ | Solvent A ： Water Solvent B ： Methanol | |||
| ئېقىش نىسبىتى | 30 mL / min | |||
| ئۈلگە يۈكلەش | 300 مىللىگىرام (پارقىراق كۆك FCF ساپلىقى% 86) | |||
| Gradient | ۋاقىت (CV) | Solvent B (%) | ۋاقىت (CV) | Solvent B (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
نەتىجە ۋە مۇلاھىزە
ئەۋرىشكە تۇزسىزلاشتۇرۇش ۋە ساپلاشتۇرۇش ئۈچۈن SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى ئىشلىتىلگەن.قەدەم باسقۇچلىرى ساپ سۇنى يوقىتىش باسقۇچىدا كۆچمە باسقۇچ سۈپىتىدە ئىشلىتىپ ، 10 ئىستون ھەجىمى (CV) ئۈچۈن ئىشلىتىلگەن.3-رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، ساپ سۇنى كۆچمە باسقۇچ قىلىپ ئىشلەتكەندە ، ئەۋرىشكە چاقماق كارىدورىدا پۈتۈنلەي ساقلانغان.كېيىنكى قەدەمدە ، كۆچمە باسقۇچتىكى مېتانول بىۋاسىتە% 100 كە ئۆستۈرۈلۈپ ، 7.5 CV لىك گرادېنت ساقلاپ قېلىندى.ئەۋرىشكە 11.5 دىن 13.5 CV غىچە چىقىرىۋېتىلدى.توپلانغان بۆلەكلەردە ئەۋرىشكە ئېرىتمىسى NaH2PO4 بۇففېر ئېرىتمىسىدىن مېتانولغا ئالماشتۇرۇلغان.يۇقىرى سۇ ئېرىتمىسى بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، كېيىنكى باسقۇچتا ئايلانما پارغا ئايلىنىش ئارقىلىق مېتانولنى ئېلىۋېتىش تېخىمۇ ئاسان بولۇپ ، تۆۋەندىكى تەتقىقاتلارنى ئاسانلاشتۇرىدۇ.
رەسىم 3. C18AQ كارىدورىدىكى ئەۋرىشكىنىڭ چاقماق خروموگراممىسى.
كۈچلۈك قۇتۇپ ئەۋرىشكىسى ئۈچۈن C18AQ كارىدورى ۋە دائىملىق C18 كارىدورىنىڭ ساقلاش ھەرىكىتىنى سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن ، پاراللېل سېلىشتۇرۇش سىنىقى ئېلىپ بېرىلدى.SepaFlash C18 RP چاقماق كارىدورى ئىشلىتىلگەن بولۇپ ، ئەۋرىشكە ئۈچۈن چاقماق خروموگرامما 4-رەسىمدە كۆرسىتىلدى.شۇڭلاشقا باشلىنىش دەرىجىسى% 90 سۇدا% 10 مېتانول قىلىپ بېكىتىلدى.4-رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، يۇقىرى سۇ نىسبىتى كەلتۈرۈپ چىقارغان C18 زەنجىرىنىڭ گىدروپوبىك فازا يىمىرىلىشى سەۋەبىدىن ، ئەۋرىشكە ئادەتتىكى C18 كارىدورىدا ئاران ساقلىنىپ ، كۆچمە باسقۇچ تەرىپىدىن بىۋاسىتە چىقىرىۋېتىلدى.نەتىجىدە ئەۋرىشكە تۇزسىزلاندۇرۇش ياكى تازىلاش مەشغۇلاتى تاماملانمايدۇ.
رەسىم 4. دائىملىق C18 كارىدورىدىكى ئەۋرىشكىنىڭ چاقماق خروموگراممىسى.
سىزىقلىق گرادېنتقا سېلىشتۇرغاندا ، قەدەم باسقۇچنى ئىشلىتىشنىڭ تۆۋەندىكىدەك ئەۋزەللىكى بار:
1. ئەۋرىشكە تازىلاشنىڭ ئېرىتىش ۋە ئىشلىتىش ۋاقتى قىسقىرايدۇ.
2. نىشانلىق مەھسۇلات ئۆتكۈر چوققىلاردا يۇقىرى كۆتۈرۈلۈپ ، يىغىلغان بۆلەكلەرنىڭ مىقدارىنى ئازايتىدۇ ۋە شۇ ئارقىلىق تۆۋەندىكى ئايلانما پارغا ئايلىنىشقا شۇنداقلا ۋاقىتنى تېجەيدۇ.
3. يىغىلغان مەھسۇلات مېتانولدا بولۇپ ، ئاسانلا پارغا ئايلىنىدۇ ، شۇڭا قۇرۇتۇش ۋاقتى قىسقىرايدۇ.
خۇلاسىلىگەندە ، كۈچلۈك قۇتۇپ ياكى يۇقىرى گىدروفىللىق ئەۋرىشكىنى تازىلاش ئۈچۈن ، SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى تەييارلىق چاقماق خروموگرافىيە سىستېمىسى SepaBean ™ ماشىنىسى بىلەن بىرلەشتۈرۈلۈپ ، تېز ۋە ئۈنۈملۈك ھەل قىلىش چارىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ.
SepaFlash باغلانغان يۈرۈشلۈك C18 RP چاقماق كارىدورى ھەققىدە
بۇ يەردە بىر يۈرۈش SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى بار بولۇپ ، سانتاي تېخنىكىسىنىڭ ئوخشىمىغان ئۆلچىمى بار (2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك).
| تۈر نومۇرى | ستون چوڭلۇقى | Flow Rate (mL / min) | Max.Pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
جەدۋەل 2. SepaFlash C18AQ RP چاقماق كارىدورى.
ئوراش ماتېرىياللىرى: يۇقىرى ئۈنۈملۈك شارسىمان C18 (AQ) باغلانغان سىلىتسىي ، 20 - 45 مىللىمېتىر ، 100 Å.
لوگى (2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك).
يوللاش ۋاقتى: 27-ئاۋغۇستتىن 27-ئاۋغۇستقىچە