Руи Хуанг, Бо Сю
Тапшыру фәнни-тикшеренү үзәге
Кереш сүз
Ион алмашу хроматографиясе (IEC) - ион формасында эремәдә тәкъдим ителгән кушылмаларны аеру һәм чистарту өчен кулланыла торган хроматографик ысул.Алмаштырыла торган ионнарның төрле корылма шартлары буенча, IECны ике төргә бүлеп була, катион алмашу хроматографиясе һәм анион алмашу хроматографиясе.Кион алмашу хроматографиясендә кислота төркемнәре аеру медиасы өслегенә бәйләнгән.Мәсәлән, сульфон кислотасы (-SO3H) - көчле катион алмашу (SCX) еш кулланыла торган төркем, ул H + ны аера һәм тискәре корылган группа -SO3 - шулай итеп чишелештә бүтән катионнарны үзләштерә ала.Анион алмашу хроматографиясендә эшкәртү төркемнәре аергыч медиа өслегенә бәйләнгән.Мәсәлән, дүртенче амин (-NR3OH, монда R углеводород төркеме) гадәттә көчле анион алмашуда кулланыла (SAX), ул OHны аера һәм уңай корылган группа -N + R3 чишелештә башка анионнарны сеңдерә ала, нәтиҗәдә анион барлыкка килә. алмашу эффекты.
Табигый продуктлар арасында флавоноидлар йөрәк-кан тамырлары авыруларын профилактикалау һәм дәвалаудагы роле аркасында тикшерүчеләрнең игътибарын җәлеп иттеләр.Флавоноид молекулалары фенолик гидроксил төркемнәре булганлыктан кислота булганлыктан, ион алмашу хроматографиясе гадәти нормаль фазага яки кире киселгән фаза хроматографиясенә өстәп альтернатив вариант булып тора, бу кислоталы кушылмаларны аеру һәм чистарту өчен.Флеш хроматографиядә ион алмашу өчен еш кулланыла торган аеру чарасы - кремний гел матрицасы, анда ион алмашу төркемнәре аның өслегенә бәйләнгән.Флеш хроматографиядә иң еш кулланыла торган ион алмашу режимнары - SCX (гадәттә сульфон кислотасы төркеме) һәм SAX (гадәттә дүртенче амин төркеме).Элегерәк бастырылган заявка язмасында "SepaFlash көчле катион алмашу хроматография баганаларын эшкәртү кушылмаларын чистартуда куллану" исеме белән, Сантаи Технологияләр тарафыннан эшкәртү кушылмаларын чистарту өчен SCX баганалары кулланылган.Бу язмада SAX баганаларының кислоталы кушылмаларны чистартуда кулланылышы өчен үрнәк буларак нейтраль һәм кислоталы стандартлар катнашмасы кулланылды.
Эксперименталь бүлек
Рәсем 1. Стационар фазаның схематик схемасы SAX аеру медиа өслегенә бәйләнгән.
Бу язмада дүртенче амин бәйләнгән кремний белән алдан тутырылган SAX баганасы кулланылды (1 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә).Чистарту өчен үрнәк буларак Хромон һәм 2,4-дихидроксибензоид кислотасы катнашмасы кулланылды (2 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә).Бу катнашма метанолда эретелде һәм инжектор тарафыннан флеш картриджга йөкләнде.Флеш чистартуның эксперименталь көйләнеше 1 нче таблицада күрсәтелгән.
Рәсем 2. ampleрнәк катнашмасында ике компонентның химик төзелеше.
| Инструмент | SepaBean ™ машинасы T. | |||||
| Картридж | 4 г SepaFlash Стандарт Серия флеш картридж (тәртипсез кремний, 40 - 63 μm, 60 Å, Заказ номеры: S-5101-0004) | 4 г SepaFlash бәйләнгән серия SAX флеш картридж (тәртипсез кремний, 40 - 63 μm, 60 Å, заказ номеры ： SW-5001-004-IR) | ||||
| Дулкын озынлыгы | 254 нм (ачыклау), 280 нм (мониторинг) | |||||
| Кәрәзле этап | Чыгаручы А: Н-гексан | |||||
| В эретүче: Этил asetat | ||||||
| Агым тизлеге | 30 мл / мин | 20 мл / мин | ||||
| Ampleрнәк йөкләү | 20 мг (А компоненты һәм В компоненты катнашмасы) | |||||
| Градиент | Вакыт (РВ) | В эретүче В (%) | Вакыт (РВ) | В эретүче В (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Нәтиҗәләр һәм фикерләү
Беренчедән, үрнәк катнашма гадәти кремний белән алдан тутырылган гадәти фаз картридж белән аерылды.3 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә, үрнәктәге ике компонент картридждан бер-бер артлы чыгарылды.Аннары, үрнәкне чистарту өчен SAX флеш картридж кулланылды.4 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә, В кислоталы компонент SAX картриджында тулысынча сакланган.А нейтраль компонент акрынлап картридждан мобиль фаза элитасы белән чыгарылды.
Рәсем 3. Гадәттәге нормаль фаз картриджында үрнәкнең флеш хроматограммасы.
Рәсем 4. SAX картриджындагы үрнәкнең флеш хроматограммасы.
3 нче рәсем һәм 4 нче рәсем белән чагыштырганда, А компоненты ике төрле флеш патронда туры килмәгән иң югары формага ия.Элитациянең иң югары компоненты туры килү-килмәвен раслау өчен, без SepaBean ™ машинасының контроль программасына салынган тулы дулкын озынлыгын сканерлау функциясен куллана алабыз.Ике аерылуның эксперименталь мәгълүматларын ачыгыз, хроматограммадагы вакыт күчәрендә (CV) күрсәткеч сызыгына иң югары ноктага һәм А компонентына туры килүче иң югары ноктага, һәм бу икесенең тулы дулкын озынлыгы спектрына сузыгыз. нокталар автоматик рәвештә хроматограмма астында күрсәтеләчәк (5 нче рәсемдә һәм 6 нчы рәсемдә күрсәтелгәнчә).Бу ике аерылуның тулы дулкын озынлыгы спектры мәгълүматларын чагыштырганда, А компоненты ике экспериментта эзлекле үзләштерү спектрына ия.А компоненты ике төрле флеш патронда туры килмәгән иң югары формага ия булганлыктан, А компонентында гадәти фаз картриджында һәм SAX картриджында төрле саклану булган махсус пычраклык бар дип уйланыла.Шуңа күрә, А компоненты өчен һәм бу ике флеш патрондагы пычраклык төрле, хроматограммаларда туры килмәгән иң югары форма.
Рәсем 5. А компонентының тулы дулкын озынлыгы спектры һәм нормаль фаз картридж белән аерылган пычраклык.
Рәсем 6. А компонентының тулы дулкын озынлыгы спектры һәм SAX картридж белән аерылган пычраклык.
Collectedыелырга тиешле продукт нейтраль А компоненты булса, чистарту бурычы җиңел йөкләнгәннән соң SAX картриджын кулланып җиңел тәмамланырга мөмкин.Икенче яктан, тупланырга тиешле продукт В кислоталы компонент булса, эксперимент адымнарында аз гына көйләү белән кабул ителергә мөмкин: үрнәк SAX картриджына һәм нейтраль А компонентына йөкләнгәндә. нормаль фазалы органик эреткечләр белән тулысынча чыгарылды, мобиль фазаны 5% кислотасы булган метанол эремәсенә күчерегез.Кәрәзле этаптагы ацетат ионнары SA компоненты картинасының стационар этабында дүртенче амин ион төркемнәрен бәйләү өчен В компоненты белән көч сынашачак, шуның белән максат компонентын алу өчен карт компонентыннан В компонентын чыгарып җибәрә.Ион алмашу режимында аерылган үрнәкнең хроматограммасы 7 нче рәсемдә күрсәтелгән.
Рәсем 7. В компонентының флеш хроматограммасы SAX картриджында ион алмашу режимында сузылган.
Ахырда, кислоталы яки нейтраль үрнәк SAX картридж белән тиз арада чистартылырга мөмкин, төрле чистарту стратегияләрен кулланып, гадәти фаз картридж белән кушылган.Моннан тыш, SepaBean ™ машинасының контроль программасына салынган тулы дулкын озынлыгын сканерлау үзенчәлеге ярдәмендә сузылган фракцияләрнең характеристик үзләштерү спектрын җиңел чагыштырып була һәм раслый, тикшерүчеләргә тиз арада фракцияләрнең составын һәм чисталыгын ачыкларга булыша һәм шулай итеп яхшыра. эш нәтиҗәлелеге.
| Предмет саны | Колонның размеры | Агым темплары (мл / мин) | Макс (psi / bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 г. | 10-20 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 г. | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 г. | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 г. | 20-40 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 г. | 30-60 | 350 / 24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 г. | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 г. | 50-100 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 г. | 50-100 | 250 / 17.2
|
Таблица 2. SepaFlash Bonded Series SAX флеш патроннары.Урнаштыру материаллары: Ультра-саф тәртипсез SAX бәйләнгән кремний, 40 - 63 μm, 60 Å.
SepaBean ™ ның җентекле спецификасы турында тулырак мәгълүмат өченмашина, яки SepaFlash серияле флеш патроннарда заказ бирү мәгълүматы, зинһар, безнең сайтка керегез.
Пост вакыты: Ноябрь-09-2018