Гонченг Ван, Бо Сю
Заявка R & D үзәге
Кереш
Стационар Фаза һәм мобиль этапның чагыштырмача полярлары буенча, сыек хроматография гадәттә гадәти фазага бүленергә мөмкин (NPC) һәм кире фазир хромографиясе (RPC). RPC өчен мобиль этапның полярлыгы стационар этаптан көчлерәк. RPC тирән эффективлыгы, яхшы эффективлыгы һәм ачык тоту механизациясе аркасында иң киң кулланылган. Шуңа күрә RPC төрле поляр исемлекләрне аеру һәм чистартылмаган, май кислоталары, иң еш кулланылган стеродесталар, төрле функциональ төркемнәр, шул исәптән C18, C8, C4, Фенил, Cyano, Amino, һ.б. Бу бәйләнешләр арасында функциональ төркемнәр арасында иң киң кулланылган кеше C18. RPC 80% тан артык хәзер C18 Бәйләнешле этапны куллануы. Шуңа күрә C18 хроматографиясе баганасы һәр лаборатория өчен универсаль баганага ия булырга тиеш.
Ләкин c18 баганасы бик күп гаризаларда, бик күп үрнәкләр өчен кулланылырга мөмкин, алар шундый үрнәкләрне чистарта торган C18 баганалары проблемалар булырга мөмкин. RPCда, гадәттә кулланылган конверсияләр аларның полярлыгы нигезендә заказ бирергә мөмкин: су <метанол <ацетонитрил <этанол <атрохадрофорран <изопропанол. Бу үрнәкләр өчен баганада яхшы тоту өчен (көчле поляр яки бик гидроцилик), мобиль этап булып кулланылырга тиеш. Ләкин, саф су системасын кулланганда, Кәрәзле этаплы студия этапында озын углерод чәйнәсе кебек озын углерод чылбыры. Бу күренеш "гидрофби фазасы җимерелү" дип атала (1 нче рәсемнең сул өлешендә күрсәтелгәнчә). Бу хәл башлангач, метанол яки ацетонитрил кебек органик эреткечләр белән юылганда, ул әле баганага зыян китерергә мөмкин. Шуңа күрә бу хәлне булдырмаска кирәк.
Рәсем 1. Сармика гель фазаларын регуляр C18 баганасында (сулда) һәм C18ак баганасы (уңда) бәйләнгән этапларның схематик схемасы.
Aboveгарыда күрсәтелгән проблемаларны чишү өчен хроматографик төрү материаллары җитештерүчеләре техник яктан яхшыртылды. Бу яхшыртуның берсе - гидрофилик циано төркемнәрен кертү (1-нче рәсемнең уң өлешендә күрсәтелгәнчә), кремний гель өслеген күрсәтү өчен, гидрофиликаны ясау өчен, кремни матрицасы. Шулай итеп, кремница өслегендә C18 чылбырлары бик якты шартларда һәм гидрофобик фаза җимерелүеннән сакланырга мөмкин. Бу үзгәртелгән C18 баганалары аукцион c18 баганалары дип атала, ягъни C18ак баганалары дип атала, алар бик яклау шартлары өчен эшләнгән һәм 100% суюз системасына түзә ала. C18ак баганалары көчле поляр кушылмаларны аеруда һәм чистартуда киң кулланылды, шул исәптән органик кислоталар, поттидалар, ямьсез витаминнар.
Десизацияләү - C18Q баганаларының берсе - соңрак тикшеренүләрдә үрнәкне җиңеләйтү өчен эретү өчен С18ак баганаларының берсе. Бу язмада көчле полярлык белән ачык зәңгәр fcf C18AQ баганасында чистарту буларак кулланылган. Elrентер үрнәге органик эретүче белән буфер чишелешеннән аны алыштырды, шулай итеп түбәндәге роэт парга әйләнүен, эреткечләрне һәм эш вакыты саклап калуны җиңеләйтә. Моннан тыш, үрнәктә кайбер пычракларны бетереп, үрнәкнең чисталыгы яхшырды.
Эксперименталь бүлек
Рәсем 2. Үрнәкнең химик структурасы.
Якты зәңгәр FCF бу язмада үрнәк булып кулланылды. Чималның чисталыгы 86% һәм үрнәкнең химик структурасы 2 нче рәсемдә күрсәтелгән. Vaby-ның химик структурасы күрсәтелгән. Аннары үрнәк чишелеше инжектор тарафыннан флеш баганага кергән иде. Флеш чистарту эксперименталь урнаштыру 1 нче таблицада күрсәтелгән.
| Инструмент | Dlebean ™2 | |||
| Патроннар | 12 G Speflash C18 RP Flash Carrordge (Сферик å, 20 - 45 000 м, 20 μ м, 100 μ м, заказ номеры: sw-52222 -01012-СП) | 12 G Speflash C18AQ РП Флеш Картридж (Сферик å 45 000, 100 μ, заказ номеры: sw-5222-012-СП (AQ)) | ||
| Дулкын озынлыгы | 254 нм | |||
| Мобиль этап | Эретүче: су Эретү б: метанол | |||
| Агым ставкасы | 30 мл / мин | |||
| Йөкләү үрнәге | 300 мг (чиста зәңгәр FCF 86% чисталыгы белән) | |||
| Градиент | Вакыт (рз) | Эретү б (%) | Вакыт (рз) | Эретү б (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
Нәтиҗәләр һәм фикер алышу
C18AQ RP Flash Carcridge җан иясе һәм чистарту өчен кулланылган. Аңлаткыч грентентта саф су элюнгы башында мобиль этап буларак кулланылган һәм 10 багана күләменә кадәр (CV) үткәрүдә кулланылганда кулланылды. 3 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә, мобиль этап буларак чиста су кулланганда, үрнәк флеш картриджда тулысынча саклана. Аннары, мобиль этапта метанол турыдан-туры 100% ка артты һәм 12,5 ев өчен градиент сакланды. Ampleрнәк 11,5 дән 13,5 гә кадәр эте. Collectedыелган фракцияләрдә үрнәк чишелеше Nah2po4 буфер-моннан метанолга кадәр алыштырылды. Бик ачылган югары чишелеш белән чагыштырганда, метанол түбәндәге тикшеренүләр белән җиңеләйтүче киләсе адымда әйләнеп кайту күпкә җиңелрәк булган.
Рәсем 3.. C18 вак картриджындагы үрнәкнең флеш хроматографы.
C18AQ картриджның һәм көчле полярлык үрнәкләре өчен регуляр C18 картриджны чагыштыру өчен, параллель чагыштыру тесты башкарылды. Spereflas C18 Rp Flash Carprertge кулланылды һәм үрнәк өчен флеш хроматографлык күрсәтелде. Регуляр рәвештә C18 патроннары өчен иң югары тетрияле аю фазасы якынча 90%. Шуңа күрә старт градиенты 90% суда 10% метанолда куелган. 4 нче рәсемдә күрсәтелгәнчә, C18 чылбырының гидрофобик фазасы аркасында, үрнәк С18 чылбыры аркасында, үрнәк C18 картриджында саклана һәм мобиль этап белән турыдан-туры эреп бетте. Нәтиҗәдә, җан иясе яки чистарту эшен тәмамлап булмый.
Рәсем 4. Регуляр C18 картриджындагы үрнәкнең флеш хроматографы.
Сызык градиент белән чагыштырганда, киңәйтелгән грентентаны куллану түбәндәге өстенлекләргә ия:
1. Setзгәртү өчен чистарту вакыты һәм эш вакыты бетү кимеде.
2. Максатлы продукт, тупланган фракцияләр күләмен киметә һәм шулай итеп түбәндәге роэт парга әйләнүен җиңеләйтә, шулай ук вакытны саклау.
3. Collectedыелган продукт метандаолда, бу парга әйләнү җиңел, шулай итеп киптерү вакыты кими.
Ахырда, көчле поляр чистарту, бик көчле поляр чистарту, SYFLASH C18AQ RP флеш-флешкалары тиз һәм эффектив чишелеш тәкъдим итә ала.
Speriflash Bords серияле серия сериясе C18 RP Flash Carridges турында
Сантаи технологияләреннән төрле үзенчәлекле SPEFLASH C18AQ RP Flash Carridgers бар (2 нче таблицада күрсәтелгәнчә).
| Пункт номеры | Багана зурлыгы | Агым ставкасы (мл / мин) | Max.pressure (psi / bar) |
| Sw-5222-004-SP (AQ) | 5.4 г. | 5-15 | 400/15 |
| Sw-5222-012-SP (AQ) | 20 г. | 10-25 | 400/15 |
| Sw-5222-025-SP (AQ) | 33 г. | 10-25 | 400/15 |
| Sw-5222-040-sp (AQ) | 48 г. | 15-30 | 400/15 |
| Sw-5222-080-СП (AQ) | 105 г. | 25-50 | 350 / 24.0 |
| Sw-5222-120-sp (AQ) | 155 г. | 30-60 | 300/20.7 |
| Sw-5222-220-SP (AQ) | 300 г. | 40-80 | 300/20.7 |
| Sw-5222-330-SP (AQ) | 420 г. | 40-80 | 250 / 17.2 |
2 нче таблица. Showflas C18AQ RP Flash Cardridgers.
Түләү материаллары: югары эффективлык сферик C18 (AQ) - Силика, 20 - 45 μ м, 100 μ м, 100 μ м, 20 μ м, 100 μ м, 100 μ м, 20 μ м, 100 μ м,
логи (2 нче таблицада күрсәтелгәнчә).
Пост вакыты: 27-2018