Mingzu Yang, Bo Xu
Uygulama Ar -Ge Merkezi
giriiş
Antibiyotikler, kimyasal olarak sentezlenmiş veya yarı sentezlenen mikroorganizmalar (bakteriler, mantarlar, aktinomisetler dahil) veya benzeri bileşikler tarafından üretilen bir sekonder metabolit sınıfıdır. Antibiyotikler diğer mikroorganizmaların büyümesini ve hayatta kalmasını engelleyebilir. İnsan, penisilin tarafından keşfedilen ilk antibiyotik, 1928'de İngiliz mikrobiyolog Alexander Fleming tarafından keşfedildi. Kalıbın çevresindeki bakterilerin kalıp ile kontamine olan Staphylococcus kültür kabında yetişemediğini gözlemledi. Kalıpın 1928'de penisilin adını verdiği bir antibakteriyel madde salgılaması gerektiğini varsaydı. Ancak aktif bileşenler o sırada saflaştırılmadı. 1939'da Oxford Üniversitesi'nden Ernst Chain ve Howard Florey, bakteriyel enfeksiyonları tedavi edebilecek bir ilaç geliştirmeye karar verdiler. Suşlar elde etmek için Fleming ile temasa geçtikten sonra, suşlardan penisilini başarıyla çıkardılar ve saflaştırdılar. Terapötik bir ilaç olarak penisilin başarılı gelişmeleri için Fleming, Chain ve Florey 1945 Nobel Tıp Ödülü'nü paylaştı.
Antibiyotikler bakteriyel enfeksiyonları tedavi etmek veya önlemek için antibakteriyel ajanlar olarak kullanılır. Antibakteriyel ajanlar olarak kullanılan birkaç ana antibiyotik kategorisi vardır: β-laktam antibiyotikler (penisilin, sefalosporin, vb. Dahil), makrolid antibiyotikler, tetrasiklin antibiyotikler, tetrasiklin antibiyotikler, kloramfenikol, vb. Kaynaklar içerir (BİYOKSİKOLLAR da dahildir. Yarı sentez ve toplam sentez. Biyolojik fermantasyon ile üretilen antibiyotiklerin kimyasal stabilite, toksik yan etkiler, antibakteriyel spektrum ve diğer sorunlar nedeniyle kimyasal yöntemlerle yapısal olarak modifiye edilmesi gerekir. Kimyasal olarak modifiye edildikten sonra, antibiyotikler artan stabilite, azalmış toksik yan etkiler, genişletilmiş antibakteriyel spektrum, azaltılmış ilaç direncini, iyileştirilmiş biyoyararlanımı ve böylece ilaç tedavisinin etkisini artırabilir. Bu nedenle, yarı sentetik antibiyotikler şu anda antibiyotik ilaçların gelişiminde en popüler yöntür.
Yarı sentetik antibiyotiklerin gelişiminde, antibiyotikler, mikrobiyal fermantasyon ürünlerinden türetildikleri için düşük saflık, çok sayıda yan ürün ve karmaşık bileşen özelliklerine sahiptir. Bu durumda, yarı sentetik antibiyotiklerde safsızlıkların analizi ve kontrolü özellikle önemlidir. Safsızlıkları etkili bir şekilde tanımlamak ve karakterize etmek için, yarı sentetik antibiyotiklerin sentetik ürününden yeterli miktarda safsızlık elde etmek gerekir. Yaygın olarak kullanılan safsızlık hazırlama teknikleri arasında flaş kromatografisi, büyük örnek yükleme miktarı, düşük maliyet, zaman tasarrufu, vb.
Bu yazıda, yarı sentetik bir aminoglikozit antibiyotiğinin ana safsızlığı numune olarak kullanıldı ve flaş kromatografisi sistemi Sepabean ™ makinesi ile birleştirilmiş bir sepaflash C18AQ kartuşu ile saflaştırıldı. Gereksinimleri karşılayan hedef ürün başarıyla elde edildi, bu da bu bileşiklerin saflaştırılması için yüksek verimli bir çözüm olduğunu düşündürmektedir.
Deney bölümü
Örnek, yerel bir ilaç şirketi tarafından nazikçe sağlanmıştır. Numune bir tür amino polisiklik karbonhidratlardı ve moleküler yapısı aminoglikozit antibiyotikleri ile benzerdi. Numunenin polaritesi oldukça yüksekti, suda çok çözünür hale getirdi. Numunenin moleküler yapısının şematik diyagramı Şekil 1'de gösterilmiştir. Ham numunenin saflığı HPLC ile analiz edildiği gibi yaklaşık% 88 idi. Bu yüksek polarite bileşiklerinin saflaştırılması için, numune önceki deneyimlerimize göre normal C18 sütunlarında zar zor tutulacaktır. Bu nedenle, numune saflaştırması için bir C18AQ sütunu kullanıldı.
Şekil 1. Numunenin moleküler yapısının şematik diyagramı.
Numune çözeltisini hazırlamak için, 50 mg ham numune 5 mL saf su içinde çözündürüldü ve daha sonra tamamen net bir çözüm haline gelmesi için ultrasonikleştirildi. Örnek çözeltisi daha sonra bir enjektör tarafından flaş kolonuna enjekte edildi. Flaş saflaştırmasının deney kurulumu Tablo 1'de listelenmiştir.
| Enstrüman | Sepabean ™ makinesi 2 | |
| Kartuşlar | 12 G Sepaflash C18AQ RP Flaş Kartuşu (Küresel Silika, 20-45μm, 100 Å, Sipariş Numarası ： SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Dalga boyu | 204 nm, 220 nm | |
| Mobil aşama | Solvent A: Su Solvent B: Asetonitril | |
| Akış hızı | 15 ml/dakika | |
| Örnek Yükleme | 50 mg | |
| Eğim | Zaman (Min) | Çözücü B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Sonuçlar ve tartışma
C18AQ kartuşundaki numunenin flaş kromatogramı Şekil 2'de gösterilmiştir. Şekil 2'de gösterildiği gibi, yüksek polar numune C18AQ kartuşu üzerinde etkili bir şekilde tutulmuştur. Toplanan fraksiyonlar için liyofolizasyondan sonra, hedef ürün HPLC analizi ile% 96.2'lik bir saflığa (Şekil 3'te gösterildiği gibi) sahipti. Sonuçlar, saflaştırılmış ürünün bir sonraki adım araştırma ve geliştirmesinde daha fazla kullanılabileceğini göstermiştir.
Şekil 2. Bir C18AQ kartuşu üzerindeki numunenin flaş kromatogramı.
Şekil 3. Hedef ürünün HPLC kromatogramı.
Sonuç olarak, flaş kromatografisi sistemi Sepabean ™ makinesi ile birleştirildiğinde Sepaflash C18AQ RP flaş kartuşu, yüksek polar numunelerin saflaştırılması için hızlı ve etkili bir çözüm sunabilir.
Sepaflash C18AQ RP Flash Kartuşlar Hakkında
Santai teknolojisinden farklı özelliklere sahip bir dizi Sepaflash C18AQ RP flaş kartuşları vardır (Tablo 2'de gösterildiği gibi).
| Öğe numarası | Sütun boyutu | Akış hızı (ml/dk) | Maks. Baskı (psi/çubuk) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tablo 2. Sepaflash C18AQ RP Flash Kartuşlar. Paketleme Malzemeleri: Yüksek Verimli Küresel C18 (AQ)-Bidalı Silika, 20-45 μm, 100 Å.
Sepabean ™ makinesinin ayrıntılı özellikleri veya Sepaflash serisi flaş kartuşları hakkındaki sipariş bilgileri hakkında daha fazla bilgi için lütfen web sitemizi ziyaret edin.
Gönderme Zamanı:-26-2018 Ekim