Mingzu Yang, Bo Xu
Application R&D Center
Panimula
Ang mga antibiotic ay isang klase ng mga pangalawang metabolite na ginawa ng mga microorganism (kabilang ang bacteria, fungi, actinomycetes) o mga katulad na compound na chemically synthesize o semi-synthesize.Maaaring pigilan ng mga antibiotic ang paglaki at kaligtasan ng iba pang mga mikroorganismo.Ang unang antibiotic na natuklasan ng tao, ang penicillin, ay natuklasan ng British microbiologist na si Alexander Fleming noong 1928. Naobserbahan niya na ang bakterya sa paligid ng amag ay hindi maaaring tumubo sa staphylococcus culture dish na kontaminado ng amag.Ipinalagay niya na ang amag ay dapat na magsikreto ng isang antibacterial substance, na pinangalanan niyang penicillin noong 1928. Gayunpaman, ang mga aktibong sangkap ay hindi dinalisay noong panahong iyon.Noong 1939, nagpasya sina Ernst Chain at Howard Florey ng Oxford University na bumuo ng isang gamot na maaaring gamutin ang mga impeksyon sa bacterial.Pagkatapos makipag-ugnayan kay Fleming para makakuha ng mga strain, matagumpay nilang nakuha at napurify ang penicillin mula sa mga strain.Para sa kanilang matagumpay na pagbuo ng penicillin bilang isang therapeutic na gamot, ibinahagi ni Fleming, Chain at Florey ang 1945 Nobel Prize sa Medisina.
Ang mga antibiotic ay ginagamit bilang antibacterial agent para gamutin o maiwasan ang bacterial infection.Mayroong ilang pangunahing kategorya ng mga antibiotic na ginagamit bilang mga antibacterial agent: β-lactam antibiotics (kabilang ang penicillin, cephalosporin, atbp.), aminoglycoside antibiotics, macrolide antibiotics, tetracycline antibiotics, chloramphenicol (kabuuang synthetic antibiotic), at iba pa. Kabilang sa mga pinagmumulan ng antibiotics biological fermentation, semi-synthesis at kabuuang synthesis.Ang mga antibiotic na ginawa ng biological fermentation ay kailangang baguhin ang istruktura ng mga kemikal na pamamaraan dahil sa katatagan ng kemikal, nakakalason na epekto, antibacterial spectrum at iba pang mga isyu.Pagkatapos ng kemikal na pagbabago, ang mga antibiotic ay maaaring makamit ang mas mataas na katatagan, mabawasan ang nakakalason na epekto, pinalawak na antibacterial spectrum, nabawasan ang paglaban sa gamot, pinabuting bioavailability, at sa gayon ay pinabuting epekto ng paggamot sa droga.Samakatuwid, ang mga semi-synthetic na antibiotic ay kasalukuyang pinakasikat na direksyon sa pagbuo ng mga antibiotic na gamot.
Sa pagbuo ng mga semi-synthetic na antibiotic, ang mga antibiotic ay may mga katangian ng mababang kadalisayan, maraming by-product at kumplikadong mga bahagi dahil ang mga ito ay nagmula sa mga produktong microbial fermentation.Sa kasong ito, ang pagsusuri at kontrol ng mga impurities sa semi-synthetic antibiotics ay partikular na mahalaga.Upang epektibong makilala at makilala ang mga impurities, kinakailangan upang makakuha ng sapat na dami ng mga impurities mula sa synthetic na produkto ng semi-synthetic antibiotics.Kabilang sa mga karaniwang ginagamit na diskarte sa paghahanda ng karumihan, ang flash chromatography ay isang cost-effective na paraan na may mga pakinabang tulad ng malaking halaga ng pag-load ng sample, mababang gastos, pagtitipid ng oras, atbp. Ang flash chromatography ay higit na ginagamit ng mga sintetikong mananaliksik.
Sa post na ito, ang pangunahing karumihan ng isang semi-synthetic aminoglycoside antibiotic ay ginamit bilang sample at nilinis ng isang SepaFlash C18AQ cartridge na sinamahan ng flash chromatography system na SepaBean™ machine.Ang target na produkto na nakakatugon sa mga kinakailangan ay matagumpay na nakuha, na nagmumungkahi ng isang napakahusay na solusyon para sa paglilinis ng mga compound na ito.
Seksyon ng Eksperimental
Ang sample ay mabait na ibinigay ng isang lokal na kumpanya ng parmasyutiko.Ang sample ay isang uri ng amino polycyclic carbohydrates at ang molecular structure nito ay katulad ng aminoglycoside antibiotics.Ang polarity ng sample ay medyo mataas, na ginagawa itong lubhang natutunaw sa tubig.Ang schematic diagram ng molecular structure ng sample ay ipinakita sa Figure 1. Ang kadalisayan ng raw sample ay humigit-kumulang 88% gaya ng nasuri ng HPLC.Para sa paglilinis ng mga compound na ito ng mataas na polarity, ang sample ay halos hindi mananatili sa mga regular na column ng C18 ayon sa aming mga nakaraang karanasan.Samakatuwid, isang C18AQ column ang ginamit para sa sample na purification.
Figure 1. Ang schematic diagram ng molecular structure ng sample.
Upang ihanda ang sample na solusyon, 50 mg crude sample ay dissolved sa 5 ML purong tubig at pagkatapos ay ultrasonicated upang gawin itong ganap na malinaw na solusyon.Ang sample na solusyon ay pagkatapos ay iniksyon sa flash column ng isang injector.Ang pang-eksperimentong pag-setup ng flash purification ay nakalista sa Talahanayan 1.
| Instrumento | SepaBean™ machine 2 | |
| Mga Cartridge | 12 g SepaFlash C18AQ RP flash cartridge (spherical silica, 20 - 45μm, 100 Å, Order number：SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Haba ng daluyong | 204 nm, 220 nm | |
| Mobile phase | Solvent A: Tubig Solvent B: Acetonitrile | |
| Daloy ng rate | 15 mL/min | |
| Sample loading | 50 mg | |
| Gradient | Oras (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Resulta at diskusyon
Ang flash chromatogram ng sample sa C18AQ cartridge ay ipinakita sa Figure 2. Gaya ng ipinapakita sa Figure 2, ang highly polar sample ay epektibong napanatili sa C18AQ cartridge.Pagkatapos ng lyopholization para sa mga nakolektang fraction, ang target na produkto ay may kadalisayan na 96.2% (tulad ng ipinapakita sa Figure 3) sa pamamagitan ng pagsusuri ng HPLC.Ang mga resulta ay nagpahiwatig na ang purified na produkto ay maaaring higit pang magamit sa susunod na hakbang na pananaliksik at pag-unlad.
Figure 2. Ang flash chromatogram ng sample sa isang C18AQ cartridge.
Figure 3. Ang HPLC chromatogram ng target na produkto.
Sa konklusyon, ang SepaFlash C18AQ RP flash cartridge na sinamahan ng flash chromatography system na SepaBean™ machine ay maaaring mag-alok ng mabilis at epektibong solusyon para sa paglilinis ng mga napaka-polar na sample.
Tungkol sa SepaFlash C18AQ RP flash cartridges
Mayroong isang serye ng mga SepaFlash C18AQ RP flash cartridge na may iba't ibang mga detalye mula sa Santai Technology (tulad ng ipinapakita sa Talahanayan 2).
| Bilang | Laki ng Column | Daloy ng rate (mL/min) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Talahanayan 2. SepaFlash C18AQ RP flash cartridges.Mga materyales sa pag-iimpake: High-efficiency spherical C18(AQ)-bonded silica, 20 - 45 μm, 100 Å.
Para sa karagdagang impormasyon sa mga detalyadong detalye ng SepaBean™ machine, o ang impormasyon sa pag-order sa mga flash cartridge ng serye ng SepaFlash, mangyaring bisitahin ang aming website.
Oras ng post: Okt-26-2018