Ang Application ng SepaFlash Strong Anion Exchange Chromatography Columns sa Paglilinis ng Acidic Compounds

Resulta at diskusyon

Una, ang sample mixture ay pinaghiwalay ng isang normal na phase flash cartridge na paunang naka-pack na may regular na silica.Tulad ng ipinapakita sa Figure 3, ang dalawang sangkap sa sample ay na-eluted mula sa cartridge nang isa-isa.Susunod, isang SAX flash cartridge ang ginamit para sa paglilinis ng sample.Tulad ng ipinapakita sa Figure 4, ang acidic na Component B ay ganap na napanatili sa SAX cartridge.Ang neutral na Component A ay unti-unting natanggal mula sa cartridge na may elution ng mobile phase.

Figure 3. Ang flash chromatogram ng sample sa isang regular na normal na phase cartridge.

Figure 4. Ang flash chromatogram ng sample sa isang SAX cartridge.
Paghahambing ng Figure 3 at Figure 4, ang Component A ay may hindi pare-parehong peak na hugis sa dalawang magkaibang flash cartridge.Upang kumpirmahin kung ang elution peak ay tumutugma sa bahagi, maaari naming gamitin ang buong wavelength scanning feature na nakapaloob sa control software ng SepaBean™ machine.Buksan ang pang-eksperimentong data ng dalawang paghihiwalay, i-drag sa linya ng tagapagpahiwatig sa time axis (CV) sa chromatogram hanggang sa pinakamataas na punto at ang pangalawang pinakamataas na punto ng elution peak na tumutugma sa Component A, at ang buong wavelength spectrum ng dalawang ito. Ang mga puntos ay awtomatikong ipapakita sa ibaba ng chromatogram (tulad ng ipinapakita sa Figure 5 at Figure 6).Ang paghahambing ng buong wavelength spectrum data ng dalawang paghihiwalay na ito, ang Component A ay may pare-parehong spectrum ng pagsipsip sa dalawang eksperimento.Para sa kadahilanang ang Component A ay may hindi pare-parehong peak na hugis sa dalawang magkaibang flash cartridge, ito ay ispekulasyon na mayroong tiyak na karumihan sa Component A na may iba't ibang retention sa normal na phase cartridge at SAX cartridge.Samakatuwid, ang eluting sequence ay iba para sa Component A at ang impurity sa dalawang flash cartridge na ito, na nagreresulta sa hindi pare-parehong peak shape sa chromatograms.

Figure 5. Ang buong wavelength spectrum ng Component A at ang karumihan na pinaghihiwalay ng normal na phase cartridge.

Figure 6. Ang buong wavelength spectrum ng Component A at ang impurity na pinaghihiwalay ng SAX cartridge.

Kung ang target na produkto na kokolektahin ay ang neutral na Component A, ang gawain sa paglilinis ay madaling makumpleto sa pamamagitan ng direktang paggamit ng SAX cartridge para sa elution pagkatapos ng sample loading.Sa kabilang banda, kung ang target na produkto na kokolektahin ay ang acidic na Component B, ang paraan ng pag-capture-release ay maaaring gamitin na may kaunting pagsasaayos lamang sa mga pang-eksperimentong hakbang: kapag ang sample ay na-load sa SAX cartridge at ang neutral na Component A ay ganap na na-eluted out gamit ang normal na phase organic solvents, ilipat ang mobile phase sa methanol solution na naglalaman ng 5% acetic acid.Ang mga acetate ions sa mobile phase ay makikipagkumpitensya sa Component B para sa pagbubuklod sa mga quaternary amine ion group sa nakatigil na yugto ng SAX cartridge, at sa gayon ay inilalabas ang Component B mula sa cartridge upang makuha ang target na produkto.Ang chromatogram ng sample na pinaghiwalay sa ion exchange mode ay ipinakita sa Figure 7.

Figure 7. Ang flash chromatogram ng Component B ay na-eluted sa ion exchange mode sa isang SAX cartridge.

Sa konklusyon, ang acidic o neutral na sample ay maaaring mabilis na linisin ng SAX cartridge na sinamahan ng normal na phase cartridge na gumagamit ng iba't ibang mga diskarte sa paglilinis.Higit pa rito, sa tulong ng buong wavelength scanning feature na nakapaloob sa control software ng SepaBean™ machine, ang katangian ng absorption spectrum ng mga eluted fraction ay madaling maikumpara at makumpirma, na tumutulong sa mga mananaliksik na mabilis na matukoy ang komposisyon at kadalisayan ng mga eluted fraction at sa gayon ay mapabuti. kahusayan sa trabaho.