Rui Huang, Bo Şu
Gözleg we gözleg merkezi
Giriş
Ion alyş-çalyş hromatografiýasy (IEC), ion görnüşinde erginde görkezilen birleşmeleri aýyrmak we arassalamak üçin köplenç ulanylýan hromatografiki usuldyr.Çalyşýan ionlaryň dürli zarýad ýagdaýlaryna görä IEC iki görnüşe bölünip bilner, kation alyş-çalyş hromatografiýasy we anion alyş-çalyş hromatografiýasy.Kation alyş-çalyş hromatografiýasynda kislotaly toparlar aýralyk serişdeleriniň ýüzüne baglanýar.Mysal üçin, sulfan kislotasy (-SO3H) güýçli kation alyş-çalşygynda (SCX) köp ulanylýan topar bolup, H + -ni bölýär we negatiw zarýadly topar -SO3 - şeýlelik bilen ergindäki beýleki kationlary adsorb edip biler.Anion alyş-çalyş hromatografiýasynda aşgazan toparlary aýralyk serişdeleriniň ýüzüne baglanýar.Mysal üçin, dört taraplaýyn amin (-NR3OH, bu ýerde R uglewodorod topary) adatça güýçli anion alyş-çalyşynda (SAX) ulanylýar, OH-ny bölýär we pololyitel zarýadly topar -N + R3 erginde beýleki anionlary siňdirip biler, netijede anion döreýär. alyş-çalyş täsiri.
Tebigy önümleriň arasynda flawonoidler ýürek-damar keselleriniň öňüni almakda we bejermekde tutýan orny sebäpli gözlegçileriň ünsüni özüne çekdi.Fenolik gidroksil toparlarynyň bolmagy sebäpli flawonoid molekulalary kislotaly bolansoň, bu kislotaly birleşmeleri bölmek we arassalamak üçin adaty adaty faza ýa-da tersine faza hromatografiýasyna goşmaça ion alyş-çalyş hromatografiýasy alternatiw wariantdyr.Fleş hromatografiýada, ion çalşygy üçin köplenç ulanylýan aýralyk serişdesi, ion alyş-çalyş toparlary onuň ýüzüne baglanan silisiýa gel matrisasydyr.Fleş hromatografiýada iň köp ulanylýan ion alyş-çalyş usullary SCX (köplenç sulfan kislotasy topary) we SAX (köplenç dört taraplaýyn amin topary).Santai Technologies tarapyndan ozal çap edilen “SepaFlash güýçli kation alyş-çalyş hromatografiýa sütünleriniň aşgazan birleşmelerini arassalamakda ulanylyşy” ady bilen ýazylan bellikde, gidroksidi birleşmeleri arassalamak üçin SCX sütünleri ulanyldy.Bu ýazgyda SAX sütünleriniň kislotaly birleşmeleri arassalamakda ulanylyşyny öwrenmek üçin nusga hökmünde bitarap we kislotaly ülňüleriň garyndysy ulanyldy.
Synag bölümi
Surat 1. SAX bölüji mediýanyň ýüzüne baglanan stasionar fazanyň shemasy.
Bu ýazgyda dört taraplaýyn amin baglanan kremniden öňünden gaplanan SAX sütüni ulanyldy (1-nji suratda görkezilişi ýaly).Arassalanmak üçin nusga hökmünde Hromon bilen 2,4-dihidroksibenzo kislotasynyň garyndysy ulanyldy (2-nji suratda görkezilişi ýaly).Garyndy metanolda eräp, injektor tarapyndan fleş kartrijine ýüklendi.Fleş arassalamasynyň synag synaglary 1-nji tablisada görkezilýär.
Surat 2. Nusga garyndysynda iki komponentiň himiki gurluşy.
| Gural | SepaBean ™ maşyn T. | |||||
| Kartrijler | 4 g SepaFlash Standard Series fleş kartrij (tertipsiz silisiýa, 40 - 63 μm, 60 Å, Sargyt belgisi: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX fleş kartrij (tertipsiz silisiýa, 40 - 63 μm, 60 Å, Sargyt belgisi ： SW-5001-004-IR) | ||||
| Tolkun uzynlygy | 254 nm (ýüze çykarmak), 280 nm (gözegçilik) | |||||
| Jübi tapgyry | Solvent A: N-heksan | |||||
| Solvent B: Etil asetat | ||||||
| Akyş tizligi | 30 ml / min | 20 ml / min | ||||
| Adingükleme nusgasy | 20 mg (A komponenti we B komponentiniň garyndysy) | |||||
| Gradient | Wagt (CV) | Solvent B (%) | Wagt (CV) | Solvent B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Netijeler we çekişme
Ilki bilen, nusga garyndysy adaty kremniý bilen öňünden gaplanan adaty fazaly kartrij bilen bölünipdi.3-nji suratda görkezilişi ýaly, nusgadaky iki komponent kartrijden birin-birin çykaryldy.Ondan soň, nusgany arassalamak üçin SAX fleş kartrij ulanyldy.4-nji suratda görkezilişi ýaly, B kislotaly komponent SAX patronynda doly saklandy.Bitarap komponent A ykjam fazanyň uzalmagy bilen kartrijden kem-kemden çykaryldy.
Surat 3. Adaty adaty faza kartrijinde nusganyň fleş hromatogrammasy.
Surat 4. SAX kartrijindäki nusganyň fleş hromatogrammasy.
3-nji surat we 4-nji surat bilen deňeşdirilende, A komponenti iki dürli fleş patronynda biri-birine gabat gelmeýän pik görnüşine eýe.Elýus pikiniň komponente laýyk gelýändigini ýa-da ýokdugyny tassyklamak üçin, SepaBean ™ enjamynyň dolandyryş programma üpjünçiligine gurlan tolkun uzynlygyny skanerden doly ulanyp bileris.Iki bölünişigiň synag maglumatlaryny açyň, hromatogrammadaky wagt okunda (CV) görkeziji setirine iň ýokary nokada we A komponentine gabat gelýän iň ýokary nokadyň ikinji belentligine süýşüriň we bu ikisiniň doly tolkun uzynlygy spektri nokatlar hromatogrammanyň aşagynda awtomatiki görkeziler (5-nji we 6-njy suratda görkezilişi ýaly).Bu iki bölünişigiň doly tolkun uzynlygy spektr maglumatlary bilen deňeşdirilende, A komponenti iki synagda yzygiderli siňdiriş spektrine eýe.A komponentiniň iki dürli fleş kartrijinde biri-birine gabat gelmeýän iň ýokary görnüşi barlygy sebäpli, A komponentinde adaty faza kartrijinde we SAX kartrijinde dürli saklanylýan aýratyn hapalyk bar diýlip çaklanylýar.Şol sebäpden, yzygiderlilik A komponenti we bu iki fleş patronyň hapalygy bilen tapawutlanýar, netijede hromatogrammalarda iň ýokary pik şekili ýok.
Surat 5. A komponentiniň doly tolkun uzynlygy spektri we adaty faza kartrij bilen bölünen haramlyk.
Surat 6. A komponentiniň doly tolkun uzynlygy spektri we SAX kartrij bilen bölünen haramlyk.
Collectedygnaljak maksatly önüm bitarap komponent A bolsa, arassalamak meselesi nusga ýüklenenden soň elitasiýa üçin SAX patronyny gönüden-göni ulanmak arkaly aňsatlyk bilen tamamlanyp bilner.Başga bir tarapdan, ýygnaljak maksatly önüm B kislotaly komponent bolsa, synag synaglarynda azajyk düzediş girizmek bilen: nusga SAX kartrijine we bitarap A komponentine ýüklenende, surata düşürmek usuly kabul edilip bilner. Adaty fazaly organiki erginler bilen doly çykaryldy, ykjam fazany 5% sirke kislotasy bolan metanol erginine geçiriň.Jübi fazasyndaky asetat ionlary, SAX kartrijiniň stasionar fazasynda dördünji amin ion toparlaryny baglanyşdyrmak üçin B komponenti bilen bäsleşer we şeýlelik bilen maksatly önümi almak üçin kartonjdan B komponentini çykarar.Ion alyş-çalyş tertibinde bölünen nusganyň hromatogrammasy 7-nji suratda görkezildi.
Surat 7. B komponentiniň fleş hromatogrammasy SAX kartrijinde ion alyş-çalyş re modeiminde uzaldyldy.
Sözümiň ahyrynda, dürli arassalama strategiýalaryny ulanyp, adaty faza kartrij bilen birleşdirilen SAX kartrij bilen kislotaly ýa-da bitarap nusga çalt arassalanyp bilner.Mundan başga-da, SepaBean ™ enjamynyň dolandyryş programma üpjünçiliginde gurlan doly tolkun uzynlygyny skanerlemek aýratynlygynyň kömegi bilen, uzaldylan fraksiýalaryň häsiýetli siňdiriş spektrini aňsatlyk bilen deňeşdirip we tassyklap bolýar, gözlegçilere uzaldylan fraksiýalaryň düzümini we arassalygyny çalt kesgitlemäge we şeýlelik bilen gowulaşmaga kömek edýär. iş netijeliligi.
| Haryt belgisi | Sütüniň ululygy | Akyş tizligi (mL / min) | Maks (psi / bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 gr | 10-20 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 gr | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 gr | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 gr | 20-40 | 400 / 27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 gr | 30-60 | 350 / 24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 gr | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 gr | 50-100 | 300 / 20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 gr | 50-100 | 250 / 17.2
|
Tablisa 2. “SepaFlash Bonded Series SAX” fleş kartrijleri.Gaplaýyş materiallary: Ultra-arassa tertipsiz SAX bilen baglanyşykly silisiýa, 40 - 63 μm, 60 Å.
SepaBean ™ jikme-jik aýratynlyklary barada has giňişleýin maglumat üçinmaşyn, ýa-da SepaFlash seriýaly fleş patronlarynda sargyt maglumatlary, web sahypamyza girmegiňizi haýyş edýäris.
Iş wagty: Noýabr-09-2018