-
วิธีการเชื่อมต่อคอลัมน์ iLOK ที่ว่างเปล่าบนระบบ Biotage?
-
ซิลิกาที่ทำหน้าที่ละลายในน้ำหรือไม่
ไม่ ซิลิกาที่มีฝาปิดปลายไม่ละลายในตัวทำละลายอินทรีย์ที่ใช้กันทั่วไป
-
จุดสนใจในการใช้คอลัมน์แฟลช C18 คืออะไร
เพื่อการทำให้บริสุทธิ์อย่างเหมาะสมด้วยคอลัมน์แฟลช C18 โปรดทำตามขั้นตอนเหล่านี้:
① ล้างคอลัมน์ด้วยตัวทำละลายเข้มข้น (อินทรีย์) 100% สำหรับ 10 – 20 CVs (ปริมาตรคอลัมน์) โดยทั่วไปคือเมธานอลหรืออะซิโตไนไตรล์
2) ล้างคอลัมน์ด้วยน้ำเข้มข้น 50% + น้ำ 50% (หากจำเป็นต้องใช้สารเติมแต่ง ให้รวมไว้ด้วย) อีก 3 - 5 CV
3 ล้างคอลัมน์ด้วยเงื่อนไขการไล่ระดับสีเริ่มต้นเป็นเวลา 3 – 5 CV -
ขั้วต่อสำหรับคอลัมน์แฟลชขนาดใหญ่คืออะไร?
สำหรับคอลัมน์ขนาดระหว่าง 4g ถึง 330g จะใช้ตัวเชื่อมต่อ Luer มาตรฐานในคอลัมน์แฟลชเหล่านี้ สำหรับคอลัมน์ขนาด 800 ก. 1600 ก. และ 3000 ก. ควรใช้อะแดปเตอร์ตัวเชื่อมต่อเพิ่มเติมเพื่อติดตั้งคอลัมน์แฟลชขนาดใหญ่เหล่านี้บนระบบแฟลชโครมาโตกราฟี โปรดดูเอกสารชุดอะแดปเตอร์ Santai สำหรับคอลัมน์แฟลช 800 ก., 1600 ก. และ 3 กก. สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม
-
ตลับซิลิกาสามารถชะด้วยเมทานอลได้หรือไม่
สำหรับคอลัมน์เฟสปกติ ขอแนะนำให้ใช้เฟสเคลื่อนที่ซึ่งมีอัตราส่วนเมทานอลไม่เกิน 25%
-
การใช้ตัวทำละลายมีขั้ว เช่น DMSO, DMF มีขีดจำกัดเท่าใด
โดยทั่วไป ขอแนะนำให้ใช้เฟสเคลื่อนที่โดยที่อัตราส่วนของตัวทำละลายมีขั้วไม่เกิน 5% ตัวทำละลายที่มีขั้ว ได้แก่ DMSO, DMF, THF, TEA เป็นต้น
-
วิธีแก้ปัญหาสำหรับการโหลดตัวอย่างที่เป็นของแข็ง?
การโหลดตัวอย่างที่เป็นของแข็งเป็นเทคนิคที่มีประโยชน์ในการโหลดตัวอย่างที่จะบริสุทธิ์ลงในคอลัมน์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างที่มีความสามารถในการละลายต่ำ ในกรณีนี้ แฟลชคาร์ทริดจ์ iLOK เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมมาก
โดยทั่วไป ตัวอย่างจะถูกละลายในตัวทำละลายที่เหมาะสมและถูกดูดซับลงบนตัวดูดซับที่เป็นของแข็งซึ่งอาจเป็นแบบเดียวกับที่ใช้ในคอลัมน์แฟลช รวมถึงดินเบาหรือซิลิกาหรือวัสดุอื่นๆ หลังจากการขจัด/การระเหยตัวทำละลายที่ตกค้าง ตัวดูดซับจะถูกวางบนคอลัมน์ที่เติมบางส่วนหรือลงในคาร์ทริดจ์บรรจุของแข็งเปล่า สำหรับข้อมูลโดยละเอียดเพิ่มเติม โปรดดูเอกสารคู่มือผู้ใช้ตลับหมึก iLOK-SL สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม -
วิธีทดสอบปริมาตรคอลัมน์สำหรับคอลัมน์แฟลชคืออะไร?
ปริมาตรของคอลัมน์จะเท่ากับปริมาตรเสีย (VM) โดยประมาณ เมื่อละเว้นปริมาตรเพิ่มเติมในท่อที่เชื่อมต่อคอลัมน์กับหัวฉีดและเครื่องตรวจจับ
เวลาตาย (tM) คือเวลาที่ต้องใช้ในการชะล้างส่วนประกอบที่ไม่มีการตกค้าง
ปริมาตรที่เสีย (VM) คือปริมาตรของเฟสเคลื่อนที่ที่จำเป็นสำหรับการชะส่วนประกอบที่ไม่มีการกักเก็บ ปริมาตรที่เสียสามารถคำนวณได้จากสมการต่อไปนี้:VM =F0*tM
จากสมการข้างต้น F0 คืออัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่
-
ซิลิกาที่ทำหน้าที่ละลายในเมทานอลหรือตัวทำละลายอินทรีย์มาตรฐานอื่นๆ หรือไม่
ไม่ ซิลิกาที่มีฝาปิดปลายไม่ละลายในตัวทำละลายอินทรีย์ที่ใช้กันทั่วไป
-
ซิลิกาแฟลชคาร์ทริดจ์สามารถใช้ซ้ำๆ ได้หรือไม่
คอลัมน์แฟลชซิลิกาเป็นแบบใช้แล้วทิ้งและสำหรับการใช้งานครั้งเดียว แต่ด้วยการจัดการที่เหมาะสม ตลับซิลิกาจึงสามารถนำมาใช้ซ้ำได้โดยไม่ทำให้ประสิทธิภาพลดลง
เพื่อนำมาใช้ซ้ำ คอลัมน์แฟลชซิลิกาจะต้องทำให้แห้งด้วยลมอัด หรือล้างด้วยและเก็บไว้ในไอโซโพรพานอล -
เงื่อนไขการเก็บรักษาที่เหมาะสมสำหรับตลับแฟลช C18 คืออะไร?
การจัดเก็บที่เหมาะสมจะทำให้คอลัมน์แฟลช C18 สามารถนำมาใช้ซ้ำได้:
• อย่าปล่อยให้คอลัมน์แห้งหลังการใช้งาน
• ลบตัวดัดแปลงอินทรีย์ทั้งหมดโดยล้างคอลัมน์ด้วยเมทานอล 80% หรืออะซิโตไนไตรล์ในน้ำเป็นเวลา 3 – 5 CV
• เก็บคอลัมน์ไว้ในตัวทำละลายแบบชะล้างที่กล่าวถึงข้างต้นโดยให้อุปกรณ์ปลายเข้าที่ -
มีคำถามเกี่ยวกับผลกระทบทางความร้อนในกระบวนการปรับสมดุลเบื้องต้นสำหรับคอลัมน์แฟลชหรือไม่
สำหรับคอลัมน์ขนาดใหญ่ที่มีน้ำหนักมากกว่า 220 กรัม ผลกระทบด้านความร้อนจะเห็นได้ชัดในกระบวนการสมดุลก่อน ขอแนะนำให้ตั้งค่าอัตราการไหลที่ 50-60% ของอัตราการไหลที่แนะนำในกระบวนการสมดุลก่อนเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบทางความร้อนที่ชัดเจน
ผลกระทบทางความร้อนของตัวทำละลายแบบผสมนั้นชัดเจนกว่าตัวทำละลายตัวเดียว ยกตัวอย่างระบบตัวทำละลายไซโคลเฮกเซน/เอทิลอะซิเตต แนะนำให้ใช้ไซโคลเฮกเซน 100% ในกระบวนการสมดุลก่อน เมื่อการปรับสมดุลล่วงหน้าเสร็จสิ้น การทดลองการแยกสามารถดำเนินการได้ตามระบบตัวทำละลายที่ตั้งไว้ล่วงหน้า