Руи Хуан, Бо Сю
Маркази татбиқи R&D
Муқаддима
Хроматографияи мубодилаи ионҳо (IEC) як усули хроматографӣ мебошад, ки маъмулан барои ҷудо ва тоза кардани пайвастагиҳое истифода мешавад, ки дар шакли ионӣ дар маҳлул пешниҳод карда мешаванд.Мувофиқи ҳолати зарядҳои гуногуни ионҳои ивазшаванда, IEC-ро метавон ба ду намуд тақсим кард, хроматографияи мубодилаи катион ва хроматографияи мубодилаи анион.Дар хроматографияи мубодилаи катионҳо гурӯҳҳои кислотаӣ ба сатҳи муҳити ҷудокунӣ пайваст мешаванд.Масалан, кислотаи сульфонӣ (-SO3H) як гурӯҳи маъмулан дар мубодилаи катионҳои қавӣ (SCX) истифода мешавад, ки H+-ро ҷудо мекунад ва гурӯҳи манфии заряднок -SO3- метавонад катионҳои дигари маҳлулро адсорб кунад.Дар хроматографияи мубодилаи анион гурӯҳҳои ишқӣ ба сатҳи муҳити ҷудокунӣ пайваст мешаванд.Масалан, амини чорум (-NR3OH, ки дар он R гурӯҳи карбогидрид аст) одатан дар мубодилаи аниони қавӣ (SAX) истифода мешавад, ки OH--ро ҷудо мекунад ва гурӯҳи заряди мусбат -N+R3 метавонад дигар анионҳоро дар маҳлул адсорб кунад, ки дар натиҷа анион ба вуҷуд меояд. таъсири мубодила.
Дар байни маҳсулоти табиӣ флавоноидҳо бо нақши худ дар пешгирӣ ва табобати бемориҳои дилу рагҳо таваҷҷӯҳи муҳаққиқонро ба худ ҷалб кардаанд.Азбаски молекулаҳои флавоноидҳо аз сабаби мавҷудияти гурӯҳҳои гидроксилҳои фенолӣ туршӣ мебошанд, хроматографияи мубодилаи ионҳо ба ғайр аз фазаи муқаррарии муқаррарӣ ё хроматографияи баръакси фаза барои ҷудо кардан ва тоза кардани ин пайвастагиҳои кислотаӣ як варианти алтернативӣ мебошад.Дар хроматографияи флешдор, васоити ҷудокунии маъмулан барои мубодилаи ионҳо матритсаи силикагель мебошад, ки дар он гурӯҳҳои мубодилаи ионҳо ба сатҳи он пайваст мешаванд.Усулҳои мубодилаи ионҳо дар хроматографияи флешдор маъмулан SCX (одатан гурӯҳи кислотаи сульфонӣ) ва SAX (одатан гурӯҳи аминҳои чорум) мебошанд.Дар ёддошти дархостии қаблан нашршуда бо унвони "Истифодаи сутунҳои мубодилаи катионҳои SepaFlash дар тозакунии пайвастагиҳои сілтӣ" аз ҷониби Santai Technologies, сутунҳои SCX барои тоза кардани пайвастагиҳои сілтӣ истифода шуданд.Дар ин паём, омехтаи стандартҳои нейтралӣ ва туршӣ ҳамчун намуна барои омӯхтани истифодаи сутунҳои SAX дар тозакунии пайвастагиҳои кислота истифода шудааст.
Бахши таҷрибавӣ
Расми 1. Диаграммаи схематикии марҳилаи статсионарӣ, ки ба сатҳи ВАО ҷудокунии SAX пайваст карда шудааст.
Дар ин паём, як сутуни SAX, ки бо кремнийи чоркунҷаи амин пайвастшуда қаблан баста шудааст, истифода шудааст (тавре ки дар расми 1 нишон дода шудааст).Омехтаи хромон ва кислотаи 2,4-дигидроксибензой ҳамчун намуна барои тоза карда шуд (чунон ки дар расми 2 нишон дода шудааст).Омехта дар метанол гудохта шуд ва ба воситаи инжектор ба картриджи флеш бор карда шуд.Танзимоти таҷрибавии тозакунии флеш дар ҷадвали 1 оварда шудааст.
Расми 2. Сохтори химиявии ду компонент дар омехтаи намуна.
| Асбоб | Мошини SepaBean™ Т | |||||
| Картриджҳо | 4 г картриджи флеши SepaFlash Standard Series (силика номунтазам, 40 - 63 мкм, 60 Å, Рақами фармоиш: S-5101-0004) | 4 г картриджи флеши SepaFlash Bonded Series SAX (силика номунтазам, 40 - 63 мкм, 60 Å, рақами фармоиш: SW-5001-004-IR) | ||||
| Дарозии мавҷ | 254 нм (ошкоркунӣ), 280 нм (мониторинг) | |||||
| Марҳилаи мобилӣ | Халкунанда А: N-гексан | |||||
| Халкунанда B: этилацетат | ||||||
| Суръати ҷараён | 30 мл/дақ | 20 мл/дақ | ||||
| Боркунии намуна | 20 мг (омехтаи Компонент А ва Компонент В) | |||||
| Градиент | Вақт (CV) | ҳалкунанда B (%) | Вақт (CV) | ҳалкунанда B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Натиҷа ва Гуфтугӯ
Аввалан, омехтаи намуна бо картриджи флеши фазавии муқаррарӣ, ки қаблан бо кремнийи муқаррарӣ баста шудааст, ҷудо карда шуд.Тавре ки дар расми 3 нишон дода шудааст, ду ҷузъҳои намуна аз картридж паи ҳам ҷудо карда шуданд.Баъдан, барои тоза кардани намуна як картриджи флеши SAX истифода шуд.Тавре ки дар расми 4 нишон дода шудааст, ҷузъи B кислотаи пурра дар картриджи SAX нигоҳ дошта шуд.Компоненти бетарафи А тадриҷан аз картридж бо элюсияи марҳилаи мобилӣ хориҷ карда шуд.
Расми 3. Хроматограммаи флеши намуна дар картриджи фазаи муқаррарии муқаррарӣ.
Расми 4. Хроматограммаи флеши намуна дар картриджи SAX.
Дар муқоиса бо расми 3 ва расми 4, ҷузъи А дар ду картриджҳои гуногуни флеш шакли қуллаи номувофиқ дорад.Барои тасдиқи он, ки оё қуллаи элюсия ба ҷузъ мувофиқат мекунад, мо метавонем хусусияти пурраи сканкунии дарозии мавҷро, ки дар нармафзори идоракунии мошини SepaBean™ сохта шудааст, истифода барем.Маълумоти таҷрибавии ду ҷудокуниро кушоед, ба хати индикатор дар меҳвари вақт (CV) дар хроматограмма ба нуқтаи баландтарин ва нуқтаи дуюми баландтарини қуллаи элюционӣ, ки ба ҷузъи А мувофиқ аст ва спектри пурраи дарозии мавҷи ин дуро кашед. нуқтаҳо ба таври худкор дар зери хроматограмма нишон дода мешаванд (тавре ки дар расми 5 ва расми 6 нишон дода шудааст).Муқоисаи маълумоти спектри пурраи дарозии мавҷи ин ду ҷудокунӣ, ҷузъи А дар ду таҷриба спектри азхудкунии пайваста дорад.Аз сабаби он, ки Компонент А дар ду картриджи флешҳои гуногун шакли қуллаи номувофиқ дорад, тахмин карда мешавад, ки дар ҷузъи А наҷосати мушаххас мавҷуд аст, ки дар картриджи фазавии муқаррарӣ ва картриджи SAX нигоҳдории гуногун дорад.Аз ин рӯ, пайдарпаии пошидан барои Компонент А ва наҷосат дар ин ду картриджҳои флешдор фарқ мекунад, ки дар натиҷа шакли қуллаи хроматограммаҳо номувофиқ аст.
Расми 5. Спектри пурраи дарозии мавҷҳои ҷузъи А ва наҷосати бо картриджи фазавии муқаррарӣ ҷудошуда.
Тасвири 6. Спектри пурраи дарозии мавҷи ҷузъи А ва наҷосати бо картриджи SAX ҷудошуда.
Агар маҳсулоте, ки бояд ҷамъоварӣ карда шавад, ҷузъи бетарафи А бошад, вазифаи поксозӣ метавонад ба осонӣ тавассути истифодаи бевоситаи картриджи SAX барои элюсия пас аз боркунии намуна анҷом дода шавад.Аз тарафи дигар, агар маҳсулоти мавриди ҳадаф ҷамъоварӣшаванда ҷузъи кислотаи В бошад, усули гирифтан ва озод кардан мумкин аст танҳо бо ислоҳи андаке дар марҳилаҳои таҷрибавӣ қабул карда шавад: вақте ки намуна ба картриджи SAX ва ҷузъи бетарафи А бор карда шуд. бо ҳалкунандаҳои органикии муқаррарии фаза пурра тоза карда шуд, марҳилаи сайёрро ба маҳлули метаноли дорои кислотаи 5% сирко иваз кунед.Ионҳои ацетат дар марҳилаи мобилӣ бо Компоненти В барои пайвастан ба гурӯҳҳои ионҳои чоруми амини дар марҳилаи стационарии картриджи SAX рақобат мекунанд ва ба ин васила ҷузъи В-ро аз картридж ҷудо мекунанд, то маҳсулоти мавриди ҳадафро ба даст оранд.Хроматограммаи намунае, ки дар режими мубодилаи ион ҷудо карда шудааст, дар расми 7 нишон дода шудааст.
Тасвири 7. Хроматограммаи флеши Компоненти В дар реҷаи мубодилаи ионҳо дар картриджи SAX.
Хулоса, намунаи туршӣ ё нейтралиро тавассути картриджи SAX дар якҷоягӣ бо картриджи фазавии муқаррарӣ бо истифода аз стратегияҳои гуногуни тозакунӣ зуд тоза кардан мумкин аст.Ғайр аз он, бо ёрии хусусияти сканкунии пурраи дарозии мавҷ, ки дар нармафзори назоратии мошини SepaBean ™ сохта шудааст, спектри азхудкунии хоси фраксияҳои элютсияшударо ба осонӣ муқоиса ва тасдиқ кардан мумкин аст, ки ба тадқиқотчиён дар зуд муайян кардани таркиб ва тозагии фраксияҳои ҷудошуда ва ба ин васила беҳтар кардани самаранокии кор.
| Рақами адад | Андозаи сутун | Меъёри ҷараён (мл/дақ) | Максимум.Фишор (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5,9 г | 10-20 | 400/27,5 |
| SW-5001-012-IR | 23 гр | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5001-025-IR | 38 гр | 15-30 | 400/27,5 |
| SW-5001-040-IR | 55 г | 20-40 | 400/27,5 |
| SW-5001-080-IR | 122 гр | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 гр | 40-80 | 300/20,7 |
| SW-5001-220-IR | 340 гр | 50-100 | 300/20,7 |
| SW-5001-330-IR | 475 гр | 50-100 | 250/17.2
|
Ҷадвали 2. Картриджҳои флеши SepaFlash Bonded Series SAX.Маводҳои бастабандӣ: Ультра тозаи кремнийи номунтазами SAX, 40 - 63 мкм, 60 Å.
Барои маълумоти иловагӣ дар бораи мушаххасоти муфассали SepaBean™мошин ё маълумоти фармоиш дар картриджҳои флеши SepaFlash, лутфан ба вебсайти мо муроҷиат кунед.
Вақти фиристодан: Ноябр-09-2018