హాంగ్చెంగ్ వాంగ్, బో జు
అప్లికేషన్ R&D సెంటర్
పరిచయం
స్థిర దశ మరియు మొబైల్ దశ యొక్క సాపేక్ష ధ్రువణతల ప్రకారం, ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీని సాధారణ దశ క్రోమాటోగ్రఫీ (ఎన్‌పిసి) మరియు రివర్స్డ్ ఫేజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (ఆర్‌పిసి) గా విభజించవచ్చు. RPC కోసం, మొబైల్ దశ యొక్క ధ్రువణత స్థిరమైన దశ కంటే బలంగా ఉంది. అధిక సామర్థ్యం, మంచి రిజల్యూషన్ మరియు స్పష్టమైన నిలుపుదల విధానం కారణంగా RPC ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ విభజన మోడ్‌లలో ఎక్కువగా ఉపయోగించబడుతోంది. అందువల్ల రెలాయిడ్లు, కార్బోహైడ్రేట్లు, కొవ్వు ఆమ్లాలు, స్టెరాయిడ్స్, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు, అమైనో ఆమ్లాలు, పెప్టైడ్స్, ప్రోటీన్లు మొదలైన వాటితో సహా వివిధ ధ్రువ లేదా నాన్-పోలార్ సమ్మేళనాల విభజన మరియు శుద్దీకరణకు RPC అనుకూలంగా ఉంటుంది. ఈ బంధిత క్రియాత్మక సమూహాలు, ఎక్కువగా ఉపయోగించేది C18. RPC లో 80% కంటే ఎక్కువ ఇప్పుడు C18 బంధిత దశను ఉపయోగిస్తున్నారని అంచనా. అందువల్ల C18 క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్ ప్రతి ప్రయోగశాలకు తప్పనిసరిగా ఉన్న యూనివర్సల్ కాలమ్‌గా మారింది.
C18 కాలమ్‌ను చాలా విస్తృతమైన అనువర్తనాల్లో ఉపయోగించగలిగినప్పటికీ, చాలా ధ్రువ లేదా అధిక హైడ్రోఫిలిక్ అయిన కొన్ని నమూనాల కోసం, అటువంటి నమూనాలను శుద్ధి చేయడానికి ఉపయోగించినప్పుడు సాధారణ C18 నిలువు వరుసలు సమస్యలను కలిగి ఉండవచ్చు. RPC లో, సాధారణంగా ఉపయోగించే ఎల్యూషన్ ద్రావకాలను వాటి ధ్రువణత ప్రకారం ఆదేశించవచ్చు: నీరు <మిథనాల్ <అసిటోనిట్రైల్ <ఇథనాల్ <టెట్రాహైడ్రోఫ్యూరాన్ <ఐసోప్రొపనాల్. ఈ నమూనాల (బలమైన ధ్రువ లేదా అధిక హైడ్రోఫిలిక్) కాలమ్‌లో మంచి నిలుపుదలకి భరోసా ఇవ్వడానికి, మొబైల్ దశగా ఉపయోగించడానికి సజల వ్యవస్థ యొక్క అధిక నిష్పత్తి అవసరం. ఏదేమైనా, స్వచ్ఛమైన నీటి వ్యవస్థను (స్వచ్ఛమైన నీరు లేదా స్వచ్ఛమైన ఉప్పు ద్రావణంతో సహా) మొబైల్ దశగా ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, C18 కాలమ్ యొక్క స్థిరమైన దశలో పొడవైన కార్బన్ గొలుసు నీటిని నివారించడానికి మరియు ఒకదానితో ఒకటి కలపాలి, దీని ఫలితంగా కాలమ్ యొక్క నిలుపుదల సామర్థ్యం తక్షణమే తగ్గుతుంది లేదా నిలుపుదల లేదు. ఈ దృగ్విషయాన్ని "హైడ్రోఫోబిక్ దశ పతనం" అని పిలుస్తారు (మూర్తి 1 యొక్క ఎడమ భాగంలో చూపిన విధంగా). కాలమ్ మిథనాల్ లేదా అసిటోనిట్రైల్ వంటి సేంద్రీయ ద్రావకాలతో కడిగినప్పుడు ఈ పరిస్థితి రివర్సిబుల్ అయినప్పటికీ, ఇది ఇప్పటికీ కాలమ్‌కు నష్టాన్ని కలిగిస్తుంది. అందువల్ల, ఈ పరిస్థితి జరగకుండా నిరోధించడం అవసరం.
మూర్తి 1. సాధారణ C18 కాలమ్ (ఎడమ) మరియు C18AQ కాలమ్ (కుడి) లో సిలికా జెల్ యొక్క ఉపరితలంపై బంధిత దశల యొక్క స్కీమాటిక్ రేఖాచిత్రం.
పైన పేర్కొన్న సమస్యలను పరిష్కరించడానికి, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్యాకింగ్ మెటీరియల్స్ తయారీదారులు సాంకేతిక మెరుగుదలలు చేశారు. ఈ మెరుగుదలలలో ఒకటి సిలికా మాతృక యొక్క ఉపరితలంపై కొన్ని మార్పులు చేయడం, హైడ్రోఫిలిక్ సైనో సమూహాల పరిచయం (మూర్తి 1 యొక్క కుడి భాగంలో చూపిన విధంగా), సిలికా జెల్ యొక్క ఉపరితలం మరింత హైడ్రోఫిలిక్ గా మార్చడం. అందువల్ల సిలికా ఉపరితలంపై ఉన్న C18 గొలుసులు అధిక సజల పరిస్థితులలో పూర్తిగా విస్తరించవచ్చు మరియు హైడ్రోఫోబిక్ దశ పతనం నివారించవచ్చు. ఈ సవరించిన C18 నిలువు వరుసలను సజల C18 నిలువు వరుసలు అని పిలుస్తారు, అవి C18AQ నిలువు వరుసలు, ఇవి అధిక సజల ఎలుషన్ పరిస్థితుల కోసం రూపొందించబడ్డాయి మరియు 100% సజల వ్యవస్థను తట్టుకోగలవు. సేంద్రీయ ఆమ్లాలు, పెప్టైడ్స్, న్యూక్లియోసైడ్లు మరియు నీటిలో కరిగే విటమిన్లు సహా బలమైన ధ్రువ సమ్మేళనాల విభజన మరియు శుద్దీకరణలో C18AQ నిలువు వరుసలు విస్తృతంగా వర్తించబడ్డాయి.
నమూనాల కోసం ఫ్లాష్ శుద్దీకరణలోని C18AQ నిలువు వరుసల యొక్క సాధారణ అనువర్తనాల్లో డీసాల్టింగ్ ఒకటి, ఇది తరువాతి అధ్యయనాలలో నమూనా యొక్క అనువర్తనాన్ని సులభతరం చేయడానికి నమూనా ద్రావకంలోని ఉప్పు లేదా బఫర్ భాగాలను తొలగిస్తుంది. ఈ పోస్ట్‌లో, బలమైన ధ్రువణత కలిగిన అద్భుతమైన నీలం FCF ను నమూనాగా ఉపయోగించారు మరియు C18AQ కాలమ్‌లో శుద్ధి చేశారు. నమూనా ద్రావకం బఫర్ ద్రావణం నుండి సేంద్రీయ ద్రావకం ద్వారా భర్తీ చేయబడింది, తద్వారా ఈ క్రింది రోటరీ బాష్పీభవనంతో పాటు ద్రావకాలు మరియు ఆపరేటింగ్ సమయాన్ని ఆదా చేస్తుంది. ఇంకా, నమూనాలోని కొన్ని మలినాలను తొలగించడం ద్వారా నమూనా యొక్క స్వచ్ఛత మెరుగుపరచబడింది.
ప్రయోగాత్మక విభాగం
మూర్తి 2. నమూనా యొక్క రసాయన నిర్మాణం.
అద్భుతమైన నీలిరంగు FCF ఈ పోస్ట్‌లో నమూనాగా ఉపయోగించబడింది. ముడి నమూనా యొక్క స్వచ్ఛత 86% మరియు నమూనా యొక్క రసాయన నిర్మాణం మూర్తి 2 లో చూపబడింది. నమూనా ద్రావణాన్ని సిద్ధం చేయడానికి, 300 మి.గ్రా పౌదరి ముడి ముడి ఘన ఘన ఘన ఘన 1 m nah2po4 బఫర్ ద్రావణంలో కరిగిపోయింది మరియు పూర్తిగా స్పష్టమైన పరిష్కారంగా మారింది. నమూనా పరిష్కారం అప్పుడు ఫ్లాష్ కాలమ్‌లోకి ఇంజెక్టర్ ద్వారా ఇంజెక్ట్ చేయబడింది. ఫ్లాష్ శుద్దీకరణ యొక్క ప్రయోగాత్మక సెటప్ టేబుల్ 1 లో ఇవ్వబడింది.
| పరికరం | సెపాబీన్ ™ మెషిన్2 | |||
| గుళికలు | 12 గ్రా సెపాఫ్లాష్ C18 RP ఫ్లాష్ కార్ట్రిడ్జ్ (గోళాకార సిలికా, 20-45 μm, 100 Å, ఆర్డర్ సంఖ్య: SW-5222-012-SP) | 12 గ్రా సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ కార్ట్రిడ్జ్ (గోళాకార సిలికా, 20-45 μm, 100 Å, ఆర్డర్ సంఖ్య ： SW-5222-012-SP (AQ)） | ||
| తరంగదైర్ఘ్యం | 254 ఎన్ఎమ్ | |||
| మొబైల్ దశ | ద్రావకం A ： నీరు ద్రావకం B జో మిథనాల్ | |||
| ప్రవాహం రేటు | 30 మి.లీ/నిమి | |||
| నమూనా లోడింగ్ | 300 మి.గ్రా (86%స్వచ్ఛతతో అద్భుతమైన నీలం ఎఫ్‌సిఎఫ్) | |||
| ప్రవణత | సమయం (సివి) | ద్రావకం B (%) | సమయం (సివి) | ద్రావకం B (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
ఫలితాలు మరియు చర్చ
సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికను నమూనా డీసల్టింగ్ మరియు శుద్దీకరణ కోసం ఉపయోగించారు. స్టెప్ ప్రవణత ఉపయోగించబడింది, దీనిలో స్వచ్ఛమైన నీటిని ఎలుషన్ ప్రారంభంలో మొబైల్ దశగా ఉపయోగించారు మరియు 10 కాలమ్ వాల్యూమ్ల (సివి) కోసం నడుస్తుంది. మూర్తి 3 లో చూపినట్లుగా, స్వచ్ఛమైన నీటిని మొబైల్ దశగా ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, నమూనా పూర్తిగా ఫ్లాష్ గుళికపై ఉంచబడింది. తరువాత, మొబైల్ దశలో మిథనాల్ నేరుగా 100% కి పెంచబడింది మరియు ప్రవణత 7.5 సివికి నిర్వహించబడింది. నమూనా 11.5 నుండి 13.5 సివి వరకు తొలగించబడింది. సేకరించిన భిన్నాలలో, నమూనా ద్రావణాన్ని NAH2PO4 బఫర్ ద్రావణం నుండి మిథనాల్ వరకు భర్తీ చేశారు. అత్యంత సజల ద్రావణంతో పోల్చినప్పుడు, తరువాతి దశలో రోటరీ బాష్పీభవనం ద్వారా మిథనాల్ తొలగించడం చాలా సులభం, ఇది ఈ క్రింది పరిశోధనలను సులభతరం చేస్తుంది.
మూర్తి 3. C18AQ గుళికపై నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రామ్.
బలమైన ధ్రువణత యొక్క నమూనాల కోసం C18AQ గుళిక మరియు సాధారణ C18 గుళిక యొక్క నిలుపుదల ప్రవర్తనను పోల్చడానికి, సమాంతర పోలిక పరీక్ష జరిగింది. సెపాఫ్లాష్ C18 RP ఫ్లాష్ గుళిక ఉపయోగించబడింది మరియు నమూనా కోసం ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రామ్ మూర్తి 4 లో చూపబడింది. సాధారణ C18 గుళికల కోసం, అత్యధిక తట్టుకోగల సజల దశ నిష్పత్తి 90%. అందువల్ల ప్రారంభ ప్రవణత 90% నీటిలో 10% మిథనాల్ వద్ద సెట్ చేయబడింది. మూర్తి 4 లో చూపినట్లుగా, అధిక సజల నిష్పత్తి వల్ల కలిగే C18 గొలుసుల హైడ్రోఫోబిక్ దశ పతనం కారణంగా, నమూనా సాధారణ C18 గుళికపై మాత్రమే ఉంచబడలేదు మరియు మొబైల్ దశ ద్వారా నేరుగా తొలగించబడింది. ఫలితంగా, నమూనా డీసల్టింగ్ లేదా శుద్దీకరణ యొక్క ఆపరేషన్ పూర్తి చేయబడదు.
మూర్తి 4. సాధారణ C18 గుళికపై నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రామ్.
సరళ ప్రవణతతో పోల్చినప్పుడు, దశ ప్రవణత యొక్క ఉపయోగం ఈ క్రింది ప్రయోజనాలను కలిగి ఉంది:
1. నమూనా శుద్దీకరణ కోసం ద్రావణి వినియోగం మరియు రన్ సమయం తగ్గుతుంది.
2. లక్ష్య ఉత్పత్తి పదునైన శిఖరాన్ని సూచిస్తుంది, ఇది సేకరించిన భిన్నాల పరిమాణాన్ని తగ్గిస్తుంది మరియు తద్వారా ఈ క్రింది రోటరీ బాష్పీభవనంతో పాటు సమయాన్ని ఆదా చేస్తుంది.
3. సేకరించిన ఉత్పత్తి మిథనాల్‌లో ఉంది, ఇది ఆవిరైపోవడం సులభం, తద్వారా ఎండబెట్టడం సమయం తగ్గుతుంది.
ముగింపులో, బలంగా ధ్రువ లేదా అధిక హైడ్రోఫిలిక్ ఉన్న నమూనా యొక్క శుద్దీకరణ కోసం, సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికలు సన్నాహక ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రఫీ సిస్టమ్ సెపాబీన్ ™ మెషీన్ వేగవంతమైన మరియు సమర్థవంతమైన పరిష్కారాన్ని అందించగలవు.
సెపాఫ్లాష్ బాండెడ్ సిరీస్ C18 RP ఫ్లాష్ గుళికల గురించి
శాంటాయ్ టెక్నాలజీ నుండి వేర్వేరు స్పెసిఫికేషన్లతో సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికల శ్రేణి ఉన్నాయి (టేబుల్ 2 లో చూపిన విధంగా).
| అంశం సంఖ్య | కాలమ్ పరిమాణం | ప్రవాహం రేటు (ML/min) | గరిష్టంగా (psi/బార్) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 గ్రా | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 గ్రా | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 గ్రా | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 గ్రా | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 గ్రా | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120 SP (AQ) | 155 గ్రా | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220 SP (AQ) | 300 గ్రా | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 గ్రా | 40-80 | 250/17.2 |
టేబుల్ 2. సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికలు.
ప్యాకింగ్ పదార్థాలు: అధిక-సామర్థ్యం గోళాకార C18 (AQ)-బాండెడ్ సిలికా, 20-45 μm, 100 Å.
లాజి (టేబుల్ 2 లో చూపిన విధంగా).
పోస్ట్ సమయం: ఆగస్టు -27-2018