ரூய் ஹுவாங், போ சூ
விண்ணப்ப R&D மையம்
அறிமுகம்
பெப்டைட் என்பது அமினோ அமிலங்களால் ஆன ஒரு சேர்மமாகும், அவை ஒவ்வொன்றும் அதன் வரிசையை உருவாக்கும் அமினோ அமில எச்சங்களின் வெவ்வேறு வகைகள் மற்றும் வரிசையின் காரணமாக தனித்துவமான இயற்பியல் மற்றும் வேதியியல் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன.திட நிலை வேதியியல் தொகுப்பின் வளர்ச்சியுடன், பல்வேறு செயலில் உள்ள பெப்டைட்களின் வேதியியல் தொகுப்பு பெரும் முன்னேற்றம் அடைந்துள்ளது.இருப்பினும், திட கட்ட தொகுப்பு மூலம் பெறப்பட்ட பெப்டைட்டின் சிக்கலான கலவை காரணமாக, இறுதி தயாரிப்பு நம்பகமான பிரிப்பு முறைகளால் சுத்திகரிக்கப்பட வேண்டும்.பெப்டைடுகளுக்கு பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் சுத்திகரிப்பு முறைகளில் அயன் எக்ஸ்சேஞ்ச் க்ரோமடோகிராபி (IEC) மற்றும் தலைகீழ்-கட்ட உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்தம் (RP-HPLC) ஆகியவை அடங்கும், இவை குறைந்த மாதிரி ஏற்றுதல் திறன், பிரிப்பு ஊடகத்தின் அதிக விலை, சிக்கலான மற்றும் விலையுயர்ந்த பிரிப்பு உபகரணங்கள் போன்ற குறைபாடுகளைக் கொண்டுள்ளன. சிறிய மூலக்கூறு பெப்டைட்களின் (MW <1 kDa) விரைவான சுத்திகரிப்புக்காக, சாண்டாய் டெக்னாலஜிஸ் மூலம் ஒரு வெற்றிகரமான பயன்பாட்டு வழக்கு முன்பு வெளியிடப்பட்டது, இதில் தைமோபென்டின் (TP-5) மற்றும் விரைவான சுத்திகரிப்புக்காக SepaFlash RP C18 கார்ட்ரிட்ஜ் பயன்படுத்தப்பட்டது. தேவைகளை பூர்த்தி செய்யும் இலக்கு தயாரிப்பு பெறப்பட்டது.
படம் 1. 20 பொதுவான அமினோ அமிலங்கள் (www.bachem.com இலிருந்து இனப்பெருக்கம் செய்யப்பட்டது).
பெப்டைட்களின் கலவையில் பொதுவாக 20 வகையான அமினோ அமிலங்கள் உள்ளன.இந்த அமினோ அமிலங்கள் அவற்றின் துருவமுனைப்பு மற்றும் அமில-அடிப்படை பண்புகளின்படி பின்வரும் குழுக்களாக பிரிக்கப்படலாம்: துருவமற்ற (ஹைட்ரோபோபிக்), துருவ (சார்ஜ் செய்யப்படாத), அமில அல்லது அடிப்படை (படம் 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது).ஒரு பெப்டைட் வரிசையில், சிஸ்டைன், குளுட்டமைன், அஸ்பாரகின், செரின், த்ரோயோனைன், டைரோசின் போன்ற வரிசையை உருவாக்கும் அமினோ அமிலங்கள் பெரும்பாலும் துருவமாக இருந்தால் (படம் 1 இல் இளஞ்சிவப்பு நிறத்தில் குறிக்கப்பட்டுள்ளது), இந்த பெப்டைட் வலுவானதாக இருக்கலாம். துருவமுனைப்பு மற்றும் தண்ணீரில் மிகவும் கரையக்கூடியது.ரிவர்ஸ்-ஃபேஸ் குரோமடோகிராஃபி மூலம் இந்த வலுவான துருவ பெப்டைட் மாதிரிகளை சுத்திகரிக்கும் செயல்முறையின் போது, ஹைட்ரோபோபிக் ஃபேஸ் சரிவு எனப்படும் ஒரு நிகழ்வு ஏற்படும் (சாண்டாய் டெக்னாலஜிஸ் மூலம் முன்னர் வெளியிடப்பட்ட பயன்பாட்டுக் குறிப்பைப் பார்க்கவும்: ஹைட்ரோபோபிக் ஃபேஸ் கொலாப்ஸ், ஏக்யூ ரிவர்ஸ்டு ஃபேஸ் க்ரோமடோகிராஃபி நெடுவரிசைகள் மற்றும் அவற்றின் பயன்பாடுகள்).வழக்கமான C18 நெடுவரிசைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, மேம்படுத்தப்பட்ட C18AQ நெடுவரிசைகள் வலுவான துருவ அல்லது ஹைட்ரோஃபிலிக் மாதிரிகளை சுத்திகரிக்க மிகவும் பொருத்தமானவை.இந்த இடுகையில், ஒரு வலுவான துருவ பெப்டைட் மாதிரியாகப் பயன்படுத்தப்பட்டு, C18AQ நெடுவரிசையால் சுத்திகரிக்கப்பட்டது.இதன் விளைவாக, தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்யும் இலக்கு தயாரிப்பு பெறப்பட்டது மற்றும் பின்வரும் ஆராய்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டில் பயன்படுத்தப்படலாம்.
| கருவி | செபாபீன்™இயந்திரம் 2 | |||
| தோட்டாக்கள் | 12 கிராம் SepaFlash C18 RP ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ் (கோள சிலிக்கா, 20 - 45 μm, 100 Å, ஆர்டர் எண்:SW-5222-012-SP) | 12 கிராம் SepaFlash C18AQ RP ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ் (கோள சிலிக்கா, 20 - 45 μm, 100 Å, ஆர்டர் எண்:SW-5222-012-SP(AQ)) | ||
| அலைநீளம் | 254 என்எம், 220 என்எம் | 214 என்எம் | ||
| மொபைல் கட்டம் | கரைப்பான் A: நீர் கரைப்பான் பி: அசிட்டோனிட்ரைல் | |||
| ஓட்ட விகிதம் | 15 மிலி/நிமிடம் | 20 மிலி/நிமிடம் | ||
| மாதிரி ஏற்றுதல் | 30 மி.கி | |||
| சாய்வு | நேரம் (CV) | கரைப்பான் பி (%) | நேரம் (நிமிடம்) | கரைப்பான் பி (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
முடிவுகள் மற்றும் விவாதம்
வழக்கமான C18 நெடுவரிசை மற்றும் C18AQ நெடுவரிசைக்கு இடையே துருவ பெப்டைட் மாதிரியின் சுத்திகரிப்பு செயல்திறனை ஒப்பிட்டுப் பார்க்க, மாதிரியின் ஃபிளாஷ் சுத்திகரிப்புக்காக வழக்கமான C18 நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்தினோம்.படம் 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, உயர் நீர்நிலை விகிதத்தால் ஏற்படும் C18 சங்கிலிகளின் ஹைட்ரோபோபிக் கட்ட சரிவு காரணமாக, மாதிரியானது வழக்கமான C18 கெட்டியில் அரிதாகவே தக்கவைக்கப்பட்டது மற்றும் மொபைல் கட்டத்தால் நேரடியாக வெளியேற்றப்பட்டது.இதன் விளைவாக, மாதிரி திறம்பட பிரிக்கப்பட்டு சுத்திகரிக்கப்படவில்லை.
படம் 2. வழக்கமான C18 கார்ட்ரிட்ஜின் மாதிரியின் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராம்.
அடுத்து, மாதிரியின் ஃபிளாஷ் சுத்திகரிப்புக்காக C18AQ நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்தினோம்.படம் 3 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, பெப்டைட் நெடுவரிசையில் திறம்பட தக்கவைக்கப்பட்டு பின்னர் வெளியேற்றப்பட்டது.இலக்கு தயாரிப்பு மூல மாதிரியில் உள்ள அசுத்தங்களிலிருந்து பிரிக்கப்பட்டு சேகரிக்கப்பட்டது.லியோபிலைசேஷன் மற்றும் HPLC ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்ட பிறகு, சுத்திகரிக்கப்பட்ட தயாரிப்பு 98.2% தூய்மையைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் அடுத்த கட்ட ஆராய்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டிற்கு மேலும் பயன்படுத்தப்படலாம்.
படம் 3. C18AQ கார்ட்ரிட்ஜில் உள்ள மாதிரியின் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராம்.
முடிவில், SepaFlash C18AQ RP ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராபி சிஸ்டம் SepaBean உடன் இணைந்தது™இயந்திரம் வலுவான துருவ அல்லது ஹைட்ரோஃபிலிக் மாதிரிகளை சுத்திகரிக்க விரைவான மற்றும் பயனுள்ள தீர்வை வழங்க முடியும்.
Santai டெக்னாலஜியில் இருந்து வெவ்வேறு விவரக்குறிப்புகளுடன் SepaFlash C18AQ RP ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ்களின் வரிசை உள்ளது (அட்டவணை 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளது).
| பொருள் எண் | நெடுவரிசை அளவு | ஓட்ட விகிதம் (mL/min) | அதிகபட்ச அழுத்தம் (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 கிராம் | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 கிராம் | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 கிராம் | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 கிராம் | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 கிராம் | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 கிராம் | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 கிராம் | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 கிராம் | 40-80 | 250/17.2 |
அட்டவணை 2. SepaFlash C18AQ RP ஃபிளாஷ் தோட்டாக்கள்.பேக்கிங் பொருட்கள்: உயர் திறன் கொண்ட கோள C18(AQ)-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா, 20 - 45 μm, 100 Å.
SepaBean™ இயந்திரத்தின் விரிவான விவரக்குறிப்புகள் அல்லது SepaFlash தொடர் ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ்கள் பற்றிய ஆர்டர் தகவல் பற்றிய கூடுதல் தகவலுக்கு, எங்கள் வலைத்தளத்தைப் பார்வையிடவும்.
இடுகை நேரம்: அக்டோபர்-12-2018