ருய் ஹுவாங், போ சூ
பயன்பாட்டு ஆர் & டி மையம்
அறிமுகம்
ஒரு பெப்டைட் என்பது அமினோ அமிலங்களால் ஆன ஒரு கலவை ஆகும், ஒவ்வொன்றும் வெவ்வேறு வகைகள் மற்றும் அமினோ அமில எச்சங்களின் வரிசையின் காரணமாக தனித்துவமான உடல் மற்றும் வேதியியல் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன. திட கட்ட வேதியியல் தொகுப்பின் வளர்ச்சியுடன், பல்வேறு செயலில் உள்ள பெப்டைட்களின் வேதியியல் தொகுப்பு பெரும் முன்னேற்றம் அடைந்துள்ளது. இருப்பினும், திட கட்ட தொகுப்பால் பெறப்பட்ட பெப்டைட்டின் சிக்கலான கலவை காரணமாக, இறுதி தயாரிப்பு நம்பகமான பிரிப்பு முறைகள் மூலம் சுத்திகரிக்கப்பட வேண்டும். பெப்டைட்களுக்கான பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் சுத்திகரிப்பு முறைகள் அயன் எக்ஸ்சேஞ்ச் குரோமடோகிராபி (ஐ.இ.சி) மற்றும் தலைகீழ்-கட்ட உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ குரோமடோகிராபி (ஆர்.பி. தைமோபென்டின் (டிபி -5) விரைவான சுத்திகரிப்புக்கு செபாஃப்ளாஷ் ஆர்.பி. சி 18 கார்ட்ரிட்ஜ் பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் தேவைகள் பெறப்பட்ட இலக்கு தயாரிப்பு.
படம் 1. 20 பொதுவான அமினோ அமிலங்கள் (www.bachem.com இலிருந்து இனப்பெருக்கம் செய்யப்படுகிறது).
பெப்டைட்களின் கலவையில் 20 வகையான அமினோ அமிலங்கள் பொதுவானவை. இந்த அமினோ அமிலங்கள் அவற்றின் துருவமுனைப்பு மற்றும் அமில-அடிப்படை சொத்துக்கு ஏற்ப பின்வரும் குழுக்களாக பிரிக்கப்படலாம்: துருவமற்ற (ஹைட்ரோபோபிக்), துருவ (சார்ஜ் செய்யப்படாத), அமில அல்லது அடிப்படை (படம் 1 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி). ஒரு பெப்டைட் வரிசையில், வரிசையை உருவாக்கும் அமினோ அமிலங்கள் பெரும்பாலும் துருவமுனைப்புகளாக இருந்தால் (படம் 1 இல் இளஞ்சிவப்பு நிறத்தில் குறிக்கப்பட்டுள்ளபடி), சிஸ்டைன், குளுட்டமைன், அஸ்பாராகின், செரின், த்ரியோனைன், டைரோசின் போன்றவை. தலைகீழ்-கட்ட குரோமடோகிராஃபி மூலம் இந்த வலுவான துருவ பெப்டைட் மாதிரிகளுக்கான சுத்திகரிப்பு நடைமுறையின் போது, ஹைட்ரோபோபிக் கட்ட சரிவு எனப்படும் ஒரு நிகழ்வு நிகழும் (சாண்டாய் டெக்னாலஜிஸின் முன்னர் வெளியிடப்பட்ட பயன்பாட்டுக் குறிப்பைப் பார்க்கவும்: ஹைட்ரோபோபிக் கட்ட சரிவு, AQ தலைகீழ் கட்ட குரோமடோகிராபி நெடுவரிசைகள் மற்றும் அவற்றின் பயன்பாடுகள்). வழக்கமான C18 நெடுவரிசைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, மேம்பட்ட C18AQ நெடுவரிசைகள் வலுவான துருவ அல்லது ஹைட்ரோஃபிலிக் மாதிரிகளை சுத்திகரிப்பதற்கு மிகவும் பொருத்தமானவை. இந்த இடுகையில், ஒரு வலுவான துருவ பெப்டைட் மாதிரியாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் C18AQ நெடுவரிசை மூலம் சுத்திகரிக்கப்பட்டது. இதன் விளைவாக, இலக்கு தயாரிப்பு சந்திப்பு தேவைகள் பெறப்பட்டன, மேலும் பின்வரும் ஆராய்ச்சி மற்றும் வளர்ச்சியில் பயன்படுத்தப்படலாம்.
| கருவி | செபாபியன்.இயந்திரம் 2 | |||
| தோட்டாக்கள் | 12 ஜி செபாஃப்ளாஷ் சி 18 ஆர்.பி. | 12 ஜி செபாஃப்ளாஷ் சி 18 ஏக்யூ ஆர்.பி ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ் (கோள சிலிக்கா, 20-45 μm, 100 Å, ஆர்டர் எண் ： SW-5222-012-SP (aq)) | ||
| அலைநீளம் | 254 என்.எம், 220 என்.எம் | 214 என்.எம் | ||
| மொபைல் கட்டம் | கரைப்பான் A: நீர் கரைப்பான் பி: அசிட்டோனிட்ரைல் | |||
| ஓட்ட விகிதம் | 15 எம்.எல்/நிமிடம் | 20 மில்லி/நிமிடம் | ||
| மாதிரி ஏற்றுதல் | 30 மி.கி. | |||
| சாய்வு | நேரம் (சி.வி) | கரைப்பான் பி (%) | நேரம் (நிமிடம்) | கரைப்பான் பி (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
முடிவுகள் மற்றும் கலந்துரையாடல்
வழக்கமான C18 நெடுவரிசை மற்றும் C18AQ நெடுவரிசைக்கு இடையில் துருவ பெப்டைட் மாதிரிக்கான சுத்திகரிப்பு செயல்திறனை ஒப்பிட்டுப் பார்க்க, மாதிரியின் ஃபிளாஷ் சுத்திகரிப்புக்கு ஒரு வழக்கமான C18 நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்தினோம். படம் 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, உயர் நீர் விகிதத்தால் ஏற்படும் சி 18 சங்கிலிகளின் ஹைட்ரோபோபிக் கட்ட சரிவு காரணமாக, மாதிரி வழக்கமான சி 18 கெட்டி மீது தக்கவைக்கப்படவில்லை மற்றும் மொபைல் கட்டத்தால் நேரடியாக வெளியேற்றப்பட்டது. இதன் விளைவாக, மாதிரி திறம்பட பிரிக்கப்பட்டு சுத்திகரிக்கப்படவில்லை.
படம் 2. வழக்கமான சி 18 கெட்டி மீது மாதிரியின் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராம்.
அடுத்து, மாதிரியின் ஃபிளாஷ் சுத்திகரிப்புக்கு C18AQ நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்தினோம். படம் 3 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி, பெப்டைட் நெடுவரிசையில் திறம்பட தக்கவைக்கப்பட்டு பின்னர் வெளியேற்றப்பட்டது. இலக்கு தயாரிப்பு மூல மாதிரியில் உள்ள அசுத்தங்களிலிருந்து பிரிக்கப்பட்டு சேகரிக்கப்பட்டது. லியோபிலிசேஷனுக்குப் பிறகு, பின்னர் ஹெச்பிஎல்சி பகுப்பாய்வு செய்த பிறகு, சுத்திகரிக்கப்பட்ட தயாரிப்பு 98.2% தூய்மையைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் அடுத்த படி ஆராய்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டுக்கு மேலும் பயன்படுத்தப்படலாம்.
படம் 3. C18AQ கார்ட்ரிட்ஜில் மாதிரியின் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராம்.
முடிவில், செபாஃப்லாஷ் சி 18 ஏக்யூ ஆர்.பி ஃபிளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ் ஃபிளாஷ் குரோமடோகிராபி சிஸ்டம் செபாபியன் உடன் இணைந்தது.வலுவான துருவ அல்லது ஹைட்ரோஃபிலிக் மாதிரிகளை சுத்திகரிப்பதற்கு இயந்திரம் வேகமான மற்றும் பயனுள்ள தீர்வை வழங்க முடியும்.
சாண்டாய் தொழில்நுட்பத்திலிருந்து வெவ்வேறு விவரக்குறிப்புகளுடன் (அட்டவணை 2 இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி) செபாஃப்ளாஷ் C18AQ RP ஃபிளாஷ் தோட்டாக்களின் தொடர் உள்ளது.
| உருப்படி எண் | நெடுவரிசை அளவு | ஓட்ட விகிதம் (எம்.எல்/நிமிடம்) | அதிகபட்சம் (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (aq) | 5.4 கிராம் | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 கிராம் | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (aq) | 33 கிராம் | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 கிராம் | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 கிராம் | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (aq) | 155 கிராம் | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (aq) | 300 கிராம் | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 கிராம் | 40-80 | 250/17.2 |
அட்டவணை 2. செபாஃப்ளாஷ் சி 18 ஏக் ஆர்.பி ஃபிளாஷ் தோட்டாக்கள். பேக்கிங் பொருட்கள்: உயர் திறன் கொண்ட கோள சி 18 (அக்)-பிணைக்கப்பட்ட சிலிக்கா, 20-45 μm, 100 Å.
செபாபீன் ™ இயந்திரத்தின் விரிவான விவரக்குறிப்புகள் அல்லது செபாஃப்ளாஷ் சீரிஸ் ஃப்ளாஷ் கார்ட்ரிட்ஜ்களில் வரிசைப்படுத்தும் தகவல்களைப் பற்றிய கூடுதல் தகவலுக்கு, தயவுசெய்து எங்கள் வலைத்தளத்தைப் பார்வையிடவும்.
இடுகை நேரம்: அக் -12-2018