Rui Huang, Bo Xu
Kituo cha R&D cha Maombi
Utangulizi
Kromatografia ya kubadilishana ioni (IEC) ni mbinu ya kromatografia inayotumika kwa kawaida kutenganisha na kusafisha misombo ambayo huwasilishwa katika umbo la ioni katika myeyusho.Kulingana na hali tofauti za malipo ya ioni zinazoweza kubadilishwa, IEC inaweza kugawanywa katika aina mbili, kromatografia ya kubadilishana mawasiliano na kromatografia ya kubadilishana anion.Katika kromatografia ya kubadilishana kwa mawasiliano, vikundi vya tindikali vinaunganishwa kwenye uso wa vyombo vya habari vya kujitenga.Kwa mfano, asidi ya sulfoniki (-SO3H) ni kikundi kinachotumiwa sana katika ubadilishanaji wa mawasiliano yenye nguvu (SCX), ambayo hutenganisha H+ na kundi lenye chaji hasi -SO3- kwa hivyo linaweza kutangaza cations zingine kwenye suluhisho.Katika kromatografia ya kubadilishana anion, vikundi vya alkali vinaunganishwa kwenye uso wa vyombo vya habari vya kutenganisha.Kwa mfano, amini ya quaternary (-NR3OH, ambapo R ni kikundi cha hydrocarbon) kawaida hutumiwa katika kubadilishana kwa nguvu ya anion (SAX), ambayo hutenganisha OH- na kundi lililojaa chaji chanya -N+R3 linaweza kunyonya anion zingine kwenye suluhisho, na kusababisha anion. athari ya kubadilishana.
Miongoni mwa bidhaa asilia, flavonoids zimevutia umakini wa watafiti kwa sababu ya jukumu lao katika kuzuia na matibabu ya magonjwa ya moyo na mishipa.Kwa kuwa molekuli za flavonoidi ni tindikali kutokana na kuwepo kwa vikundi vya phenolic hidroksili, kromatografia ya kubadilishana ioni ni chaguo mbadala pamoja na awamu ya kawaida ya kawaida au kromatografia ya awamu iliyogeuzwa kwa kutenganisha na utakaso wa misombo hii ya asidi.Katika kromatografia inayomweka, nyenzo inayotumika sana ya kutenganisha kwa kubadilishana ioni ni matriki ya jeli ya silika ambapo vikundi vya kubadilishana ioni huunganishwa kwenye uso wake.Njia zinazotumiwa sana za kubadilishana ioni katika kromatografia ya flash ni SCX (kawaida kikundi cha asidi ya sulfoniki) na SAX (kawaida kikundi cha amini cha quaternary).Katika dokezo la maombi lililochapishwa hapo awali lenye kichwa "Utumiaji wa Safu za Kromatografia za SepaFlash Nguvu za Kubadilishana kwa Cation katika Usafishaji wa Misombo ya Alkali" na Santai Technologies, safu wima za SCX zilitumika kwa utakaso wa misombo ya alkali.Katika chapisho hili, mchanganyiko wa viwango vya upande wowote na tindikali ulitumiwa kama sampuli kuchunguza utumizi wa safuwima za SAX katika utakaso wa misombo ya tindikali.
Sehemu ya Majaribio
Kielelezo 1. Mchoro wa mpangilio wa awamu ya stationary iliyounganishwa kwenye uso wa vyombo vya habari vya kujitenga vya SAX.
Katika chapisho hili, safu ya SAX iliyojazwa awali na silika iliyounganishwa ya amine ilitumiwa (kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 1).Mchanganyiko wa Chromone na asidi 2,4-dihydroxybenzoic ilitumika kama sampuli ya kutakaswa (kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 2).Mchanganyiko huo uliyeyushwa katika methanoli na kupakiwa kwenye cartridge ya flash na injector.Usanidi wa majaribio wa utakaso wa flash umeorodheshwa kwenye Jedwali la 1.
Kielelezo 2. Muundo wa kemikali wa vipengele viwili katika mchanganyiko wa sampuli.
| Chombo | Mashine ya SepaBean™ T | |||||
| Cartridges | 4 g SepaFlash Standard Series flash cartridge (silika isiyo ya kawaida, 40 - 63 μm, 60 Å, Nambari ya agizo: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX flash cartridge (silika isiyo ya kawaida, 40 - 63 μm, 60 Å, Nambari ya agizo:SW-5001-004-IR) | ||||
| Urefu wa mawimbi | 254 nm (utambuzi), 280 nm (ufuatiliaji) | |||||
| Awamu ya rununu | Tengeneza A: N-hexane | |||||
| Kimumunyisho B: Acetate ya Ethyl | ||||||
| Kiwango cha mtiririko | 30 ml / min | 20 ml / min | ||||
| Upakiaji wa sampuli | 20 mg (mchanganyiko wa Sehemu A na Sehemu B) | |||||
| Gradient | Muda (CV) | Kiyeyushi B (%) | Muda (CV) | Kiyeyushi B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Matokeo na majadiliano
Kwanza, mchanganyiko wa sampuli ulitenganishwa na cartridge ya awamu ya kawaida iliyopakiwa awali na silika ya kawaida.Kama inavyoonyeshwa kwenye Kielelezo 3, vipengele viwili kwenye sampuli vilitolewa kwenye katriji moja baada ya nyingine.Kisha, cartridge ya SAX ilitumiwa kusafisha sampuli.Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 4, Kipengele B chenye tindikali kilihifadhiwa kabisa kwenye cartridge ya SAX.Sehemu A isiyoegemea upande wowote ilitolewa hatua kwa hatua kutoka kwa cartridge na uboreshaji wa awamu ya simu.
Kielelezo 3. Chromatogram ya sampuli kwenye cartridge ya kawaida ya awamu ya kawaida.
Kielelezo 4. Chromatogram ya flash ya sampuli kwenye cartridge ya SAX.
Ikilinganisha Kielelezo 3 na Kielelezo 4, Kipengele A kina umbo la kilele lisilolingana kwenye katriji mbili tofauti za flash.Ili kuthibitisha kama kilele cha elution kinalingana na kijenzi, tunaweza kutumia kipengele kamili cha kuchanganua urefu wa wimbi ambacho kimejumuishwa katika programu ya udhibiti wa mashine ya SepaBean™.Fungua data ya majaribio ya vitenganisho viwili, buruta hadi kwenye mstari wa kiashirio kwenye mhimili wa wakati (CV) kwenye kromatogramu hadi sehemu ya juu zaidi na sehemu ya pili ya juu zaidi ya kilele cha elution kinacholingana na Kipengele A, na wigo kamili wa wimbi la hizi mbili. pointi zitaonyeshwa kiotomatiki chini ya kromatogramu (kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 5 na Mchoro 6).Ikilinganisha data kamili ya masafa ya urefu wa mawimbi ya vitenganisho hivi viwili, Kipengele A kina wigo thabiti wa unyonyaji katika majaribio mawili.Kwa sababu ya Kipengele A kina umbo la kilele lisilolingana kwenye cartridge mbili tofauti za flash, inakisiwa kuwa kuna uchafu maalum katika Sehemu A ambayo ina uhifadhi tofauti kwenye cartridge ya awamu ya kawaida na cartridge ya SAX.Kwa hivyo, mfuatano wa kufafanua ni tofauti kwa Kipengele A na uchafu kwenye katriji hizi mbili za flash, na kusababisha umbo la kilele lisilolingana kwenye kromatogramu.
Mchoro 5. Wigo kamili wa urefu wa Kipengele A na uchafu unaotenganishwa na cartridge ya awamu ya kawaida.
Mchoro 6. Wigo kamili wa urefu wa Kipengele A na uchafu unaotenganishwa na cartridge ya SAX.
Ikiwa bidhaa inayolengwa kukusanywa ni Kipengele A kisichoegemea upande wowote, kazi ya utakaso inaweza kukamilishwa kwa urahisi kwa kutumia katriji ya SAX kwa upakiaji baada ya upakiaji wa sampuli.Kwa upande mwingine, ikiwa bidhaa inayolengwa kukusanywa ni Kipengele B chenye tindikali, njia ya kukamata-kutolewa inaweza kupitishwa kwa marekebisho kidogo tu katika hatua za majaribio: sampuli ilipopakiwa kwenye cartridge ya SAX na Kipengele A cha upande wowote. ilitolewa kabisa na vimumunyisho vya kikaboni vya awamu ya kawaida, badilisha awamu ya rununu hadi suluhisho la methanoli lenye asidi asetiki 5%.Ioni za acetate katika awamu ya simu zitashindana na Kipengele B cha kushurutisha kwa vikundi vya ioni za amini kwenye awamu ya kusimama ya katriji ya SAX, na hivyo kukiondoa Kipengele B kutoka kwenye katriji ili kupata bidhaa inayolengwa.Chromatogram ya sampuli iliyotenganishwa katika hali ya kubadilishana ioni ilionyeshwa kwenye Mchoro 7.
Mchoro wa 7. Chromatogram ya flash ya Sehemu B imetolewa katika hali ya kubadilishana ioni kwenye cartridge ya SAX.
Kwa kumalizia, sampuli ya tindikali au upande wowote inaweza kusafishwa kwa haraka na cartridge ya SAX pamoja na cartridge ya awamu ya kawaida kwa kutumia mikakati tofauti ya utakaso.Zaidi ya hayo, kwa usaidizi wa kipengele kamili cha kuchanganua urefu wa mawimbi kilichojengwa ndani ya programu ya udhibiti wa mashine ya SepaBean™, wigo wa unyonyaji wa sehemu zilizotoweka unaweza kulinganishwa kwa urahisi na kuthibitishwa, na kusaidia watafiti kubaini haraka muundo na usafi wa sehemu zilizofichwa na hivyo kuboresha. ufanisi wa kazi.
| Nambari ya Kipengee | Ukubwa wa Safu | Kiwango cha Mtiririko (mL/dakika) | Upeo.Shinikizo (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Jedwali 2. SepaFlash Bonded Series SAX flash cartridges.Vifaa vya kufunga: Silika isiyo ya kawaida ya SAX, 40 - 63 μm, 60 Å.
Kwa habari zaidi juu ya maelezo ya kina ya SepaBean™mashine, au maelezo ya kuagiza kwenye cartridges za mfululizo wa SepaFlash, tafadhali tembelea tovuti yetu.
Muda wa kutuma: Nov-09-2018