Rui Huang, Bo Xu
Maombi ya R&D
Utangulizi
Ion kubadilishana chromatografia (IEC) ni njia ya chromatographic inayotumika kutenganisha na kusafisha misombo ambayo inawasilishwa kwa fomu ya ionic katika suluhisho. Kulingana na majimbo tofauti ya ions zinazoweza kubadilishwa, IEC inaweza kugawanywa katika aina mbili, chromatografia ya kubadilishana ya cation na chromatografia ya anion. Katika chromatografia ya kubadilishana ya cation, vikundi vya asidi vimefungwa kwa uso wa media ya kujitenga. Kwa mfano, asidi ya sulfonic (-SO3H) ni kikundi kinachotumiwa sana katika kubadilishana kwa nguvu ya cation (SCX), ambayo hujitenga H+ na kikundi kilichoshtakiwa vibaya -SO3- kwa hivyo kinaweza kutangaza saruji zingine kwenye suluhisho. Katika chromatografia ya kubadilishana anion, vikundi vya alkali vimefungwa kwa uso wa media ya kujitenga. Kwa mfano, quaternary amine (-NR3OH, ambapo R ni kikundi cha hydrocarbon) kawaida hutumiwa katika kubadilishana kwa nguvu ya anion (SAX), ambayo hujitenga OH- na kikundi kinachoshtakiwa -n+R3 kinaweza adsorb anions zingine kwenye suluhisho, na kusababisha athari ya ubadilishaji wa anion.
Kati ya bidhaa asili, flavonoids zimevutia umakini wa watafiti kwa sababu ya jukumu lao katika kuzuia na matibabu ya magonjwa ya moyo na mishipa. Kwa kuwa molekuli za flavonoid ni asidi kwa sababu ya uwepo wa vikundi vya hydroxyl ya phenolic, ion chromatografia ni chaguo mbadala kwa kuongeza awamu ya kawaida au chromatografia ya awamu ya kutengana na utakaso wa misombo hii ya asidi. Katika chromatografia ya flash, vyombo vya habari vya kawaida vya kujitenga vya kubadilishana ion ni matrix ya silika ambapo vikundi vya kubadilishana vya ion vimefungwa kwa uso wake. Njia za kawaida zinazotumiwa kwa ion katika chromatografia ya flash ni SCX (kawaida kikundi cha asidi ya sulfoni) na SAX (kawaida kikundi cha amine cha Quaternary). Katika notisi ya maombi iliyochapishwa hapo awali na kichwa "Matumizi ya safu za sepaflash nguvu za kubadilishana chromatografia katika utakaso wa misombo ya alkali" na Santai Technologies, nguzo za SCX ziliajiriwa kwa utakaso wa misombo ya alkali. Katika chapisho hili, mchanganyiko wa viwango vya upande wowote na asidi vilitumika kama mfano wa kuchunguza utumiaji wa safu wima za SAX katika utakaso wa misombo ya asidi.
Sehemu ya majaribio
Kielelezo 1. Mchoro wa skirini wa awamu ya stationary iliyofungwa kwa uso wa media ya kujitenga ya SAX.
Katika chapisho hili, safu ya SAX iliyojaa kabla ya silika iliyofungwa ya Quaternary ilitumiwa (kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 1). Mchanganyiko wa chromone na asidi 2,4-dihydroxybenzoic ilitumika kama sampuli kusafishwa (kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 2). Mchanganyiko huo ulifutwa katika methanoli na kubeba kwenye cartridge ya flash na sindano. Usanidi wa majaribio ya utakaso wa flash umeorodheshwa kwenye Jedwali 1.
Kielelezo 2. Muundo wa kemikali wa sehemu mbili kwenye mchanganyiko wa sampuli.
| Chombo | Mashine ya Sepabean ™ t | |||||
| Cartridges | 4 G Sepaflash Standard Series Flash cartridge (silika isiyo ya kawaida, 40-63 μm, 60 Å, nambari ya agizo: S-5101-0004) | 4 G Sepaflash Bonded Series SAX Flash Cartridge (silika isiyo ya kawaida, 40-63 μm, 60 Å, nambari ya agizo: SW-5001-004-IR) | ||||
| Wavelength | 254 nm (kugundua), 280 nm (ufuatiliaji) | |||||
| Awamu ya rununu | Kutengenezea A: n-hexane | |||||
| Kutengenezea B: ethyl acetate | ||||||
| Kiwango cha mtiririko | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Upakiaji wa sampuli | 20 mg (mchanganyiko wa sehemu A na sehemu B) | |||||
| Gradient | Wakati (CV) | Kutengenezea B (%) | Wakati (CV) | Kutengenezea B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Matokeo na majadiliano
Kwanza, mchanganyiko wa sampuli ulitengwa na cartridge ya kawaida ya awamu ya kawaida iliyojaa na silika ya kawaida. Kama inavyoonyesha kwenye Mchoro 3, sehemu mbili kwenye sampuli zilitolewa kutoka kwa cartridge moja baada ya nyingine. Ifuatayo, cartridge ya SAX Flash ilitumiwa kwa utakaso wa sampuli. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 4, sehemu ya asidi B ilihifadhiwa kabisa kwenye cartridge ya SAX. Sehemu ya upande wowote A iliongezwa polepole kutoka kwa cartridge na utaftaji wa awamu ya rununu.
Kielelezo 3. Chromatogram ya sampuli kwenye cartridge ya kawaida ya awamu ya kawaida.
Kielelezo 4. Chromatogram ya sampuli kwenye cartridge ya SAX.
Kulinganisha Kielelezo 3 na Kielelezo 4, sehemu A ina sura isiyo sawa ya kilele kwenye cartridge mbili tofauti za flash. Ili kudhibitisha ikiwa kilele cha elution ni sawa na sehemu, tunaweza kutumia kipengee kamili cha skanning ya wimbi ambayo imejengwa ndani ya programu ya kudhibiti ya mashine ya Sepabean ™. Fungua data ya majaribio ya mgawanyiko huo mbili, pindua kwa kiashiria kwenye mhimili wa wakati (CV) kwenye chromatogram hadi kiwango cha juu na kiwango cha pili cha juu cha kilele cha kueneza kinacholingana na sehemu A, na wigo kamili wa wimbi la alama hizi mbili zitaonyeshwa kiotomatiki chini ya chromatogram (kama inavyoonyeshwa kwenye Kielelezo 5 na Kielelezo 6). Kwa kulinganisha data kamili ya wigo wa wimbi la utenganisho huu mbili, sehemu A ina wigo wa kunyonya thabiti katika majaribio mawili. Kwa sababu ya sehemu A ina sura isiyo sawa ya kilele kwenye cartridge mbili tofauti, inakadiriwa kuwa kuna uchafu maalum katika sehemu A ambayo ina uhifadhi tofauti kwenye cartridge ya kawaida ya awamu na cartridge ya SAX. Kwa hivyo, mlolongo wa kueneza ni tofauti kwa sehemu A na uchafu juu ya cartridge hizi mbili za flash, husababisha sura isiyo sawa ya kilele kwenye chromatograms.
Kielelezo 5. Wigo kamili wa wimbi la sehemu A na uchafu uliotengwa na cartridge ya kawaida ya awamu.
Kielelezo 6. Wigo kamili wa wimbi la sehemu A na uchafu uliotengwa na cartridge ya SAX.
Ikiwa bidhaa inayokusudiwa kukusanywa ni sehemu ya upande wowote A, kazi ya utakaso inaweza kukamilika kwa urahisi kwa kutumia moja kwa moja cartridge ya SAX kwa kufutwa baada ya upakiaji wa sampuli. Kwa upande mwingine, ikiwa bidhaa inayolenga kukusanywa ni sehemu ya asidi B, njia ya kutolewa inaweza kupitishwa na marekebisho kidogo tu katika hatua za majaribio: wakati sampuli ilipakiwa kwenye cartridge ya SAX na sehemu ya upande wowote ilikuwa na asidi ya kawaida ya asidi. Ions za acetate katika awamu ya rununu zitashindana na sehemu B ya kumfunga kwa vikundi vya amine ion kwenye sehemu ya stationary ya cartridge ya SAX, na hivyo kuzidisha sehemu B kutoka kwa cartridge kupata bidhaa inayolenga. Chromatogram ya sampuli iliyotengwa katika hali ya kubadilishana ya ion ilionyeshwa kwenye Mchoro 7.
Kielelezo 7. Kiwango cha chromatogram ya sehemu B iliyowekwa katika hali ya kubadilishana ya ion kwenye cartridge ya SAX.
Kwa kumalizia, sampuli ya asidi au ya upande wowote inaweza kusafishwa haraka na cartridge ya SAX pamoja na cartridge ya kawaida ya kutumia mikakati tofauti ya utakaso. Kwa kuongezea, kwa msaada wa skanning kamili ya skanning iliyojengwa ndani ya programu ya kudhibiti ya Mashine ya Sepabean ™, wigo wa tabia ya kunyonya ya sehemu zilizowekwa inaweza kulinganishwa kwa urahisi na kuthibitishwa, kusaidia watafiti kuamua haraka muundo na usafi wa vipande vilivyowekwa na hivyo kuboresha ufanisi wa kazi.
| Nambari ya bidhaa | Saizi ya safu | Kiwango cha mtiririko (ml/min) | Max.pressure (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Jedwali 2. Sepaflash Bonded Series Sax Cartridges. Vifaa vya Ufungashaji: Ultra-pure isiyo ya kawaida ya sax-bonded, 40-63 μm, 60 Å.
Kwa habari zaidi juu ya maelezo ya kina ya Sepabean ™Mashine, au habari ya kuagiza juu ya sekunde za Sepaflash Flash Cartridges, tafadhali tembelea tovuti yetu.
Wakati wa chapisho: Novemba-09-2018