Mingzu Yang, Bo Xu
Application FoU Center
Introduktion
Antibiotika är en klass av sekundära metaboliter som produceras av mikroorganismer (inklusive bakterier, svampar, aktinomyceter) eller liknande föreningar som är kemiskt syntetiserade eller halvsyntetiserade. Antibiotika kan hämma tillväxten och överlevnaden för andra mikroorganismer. Det första antibiotikum som upptäcktes av människan, penicillin, upptäcktes av den brittiska mikrobiologen Alexander Fleming 1928. Han observerade att bakterierna i närheten av formen inte kunde växa i Staphylococcus -kulturrätten som förorenades med mögel. Han antydde att formen måste utsöndra en antibakteriell substans, som han kallade penicillin 1928. Men de aktiva ingredienserna renades inte vid den tiden. 1939 beslutade Ernst Chain och Howard Florey från Oxford University att utveckla ett läkemedel som kunde behandla bakterieinfektioner. Efter att ha kontaktat Fleming för att få stammar extraherade och renade de framgångsrikt penicillin från stammarna. För deras framgångsrika utveckling av penicillin som ett terapeutiskt läkemedel delade Fleming, Chain och Florey Nobelpriset 1945 i medicin.
Antibiotika används som antibakteriella medel för att behandla eller förhindra bakterieinfektioner. Det finns flera huvudkategorier av antibiotika som används som antibakteriella medel: ß-laktamantibiotika (inklusive penicillin, cephalosporin, etc.), aminoglykosidantibiotika, makrolidantibiotika, tetracyklin antibiotika, kloramphenicol (total syntik Semsyntes och total syntes. Antibiotika som produceras genom biologisk jäsning måste strukturellt modifieras med kemiska metoder på grund av kemisk stabilitet, toxiska biverkningar, antibakteriellt spektrum och andra problem. Efter kemiskt modifierad kan antibiotika uppnå ökad stabilitet, minska toxiska biverkningar, expanderade antibakteriellt spektrum, minskat läkemedelsresistens, förbättrad biotillgänglighet och därmed förbättrade effekten av läkemedelsbehandling. Därför är semi-syntetiska antibiotika för närvarande den mest populära riktningen i utvecklingen av antibiotika.
Vid utvecklingen av semi-syntetiska antibiotika har antibiotika egenskaperna för låg renhet, massor av biprodukter och komplexa komponenter eftersom de härrör från mikrobiella jäsningsprodukter. I detta fall är analysen och kontrollen av föroreningar i semi-syntetiska antibiotika särskilt viktigt. För att effektivt identifiera och karakterisera föroreningar är det nödvändigt att erhålla en tillräcklig mängd föroreningar från den syntetiska produkten av semi-syntetiska antibiotika. Bland de vanligt använda föroreningsberedningsteknikerna är blixtkromatografi en kostnadseffektiv metod med fördelar som stor provbelastningsmängd, låg kostnad, tidsbesparing, etc. Flash-kromatografi har varit mer och mer anställd av syntetiska forskare.
I detta inlägg användes den huvudsakliga föroreningen av ett semi-syntetiskt aminoglykosidantibiotikum som provet och renades av en sepaflash C18AQ-patron i kombination med flashkromatografisystemet sepabiska ™ -maskin. Målprodukten som uppfyller kraven erhölls framgångsrikt, vilket tyder på en mycket effektiv lösning för rening av dessa föreningar.
Experimentavdelning
Urvalet tillhandahölls vänligen av ett lokalt läkemedelsföretag. Provet var ett slags amino -polycykliska kolhydrater och dess molekylstruktur var liknande med aminoglykosidantibiotika. Provets polaritet var ganska hög, vilket gjorde det mycket lösligt i vatten. Det schematiska diagrammet över provets molekylstruktur visades i figur 1. Renheten för det råa provet var cirka 88% som analyserades med HPLC. För rening av dessa föreningar med hög polaritet skulle provet knappt behållas på de vanliga C18 -kolumnerna enligt våra tidigare erfarenheter. Därför användes en C18AQ -kolonn för provrening.
Figur 1. Det schematiska diagrammet över provets molekylstruktur.
För att framställa provlösningen löstes 50 mg råprov i 5 ml rent vatten och sedan ultraljuds för att få det att bli en helt tydlig lösning. Provlösningen injicerades sedan i blixtkolonnen av en injektor. Den experimentella installationen av blixtrening listades i tabell 1.
| Instrument | SEPABEAN ™ MASKIN 2 | |
| Patroner | 12 G SEPAFLASH C18AQ RP Flash Cartridge (sfärisk kiseldioxid, 20-45μm, 100 Å, ordernummer ： SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Våglängd | 204 nm, 220 nm | |
| Mobilfas | Lösningsmedel A: vatten Lösningsmedel B: acetonitril | |
| Flödeshastighet | 15 ml/min | |
| Provbelastning | 50 mg | |
| Lutning | Tid (min) | Lösningsmedel B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47,0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Resultat och diskussion
Flash -kromatogrammet för provet på C18AQ -patronen visades i figur 2. Såsom visas i figur 2 bibehölls det mycket polära provet effektivt på C18AQ -patronen. Efter lyofolisering för de uppsamlade fraktionerna hade målprodukten en renhet av 96,2% (såsom visas i figur 3) genom HPLC -analys. Resultaten indikerade att den renade produkten kunde användas ytterligare i nästa steg forskning och utveckling.
Figur 2. Provets blixtkromatogram på en C18AQ -patron.
Figur 3. HPLC -kromatogrammet för målprodukten.
Sammanfattningsvis kan SEPAFLASH C18AQ RP Flash -patron i kombination med Flash Chromatography SEPABEAN ™ -maskinen erbjuda en snabb och effektiv lösning för rening av mycket polära prover.
Om sepaflash C18AQ RP Flash -patroner
Det finns en serie av SEPAFLASH C18AQ RP Flash -patroner med olika specifikationer från Santai -teknik (som visas i tabell 2).
| Objektnummer | Kolumnstorlek | Flödeshastighet (ml/min) | Max.tryck (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabell 2. SEPAFLASH C18AQ RP Flash -patroner. Förpackningsmaterial: Högeffektiv sfärisk C18 (AQ) -bundna kiseldioxid, 20-45 μm, 100 Å.
För ytterligare information om detaljerade specifikationer för SEPABEAN ™ -maskinen eller beställningsinformationen på SEPAFLASH -serien Flash -patroner, besök vår webbplats.
Posttid: oktober-26-2018