Rui Huang, bo xu
Puseur R & D
Bubuka
Séptida mangrupikeun sanyawa diwangun ku asam amino, masing-masing anu gaduh sipat fisik sareng kimia anu unik kalayan jinis sareng pormat asam amino ngarobih sareng saringan asam amino. Dangkitan sintésis kimia fase, sintésis kimia tina sagala rupa péptida anu aktip parantos ngajantenkeun kamajuan anu saé. Nanging, kusabab komposisi rumit tina kertori anu diikat ku sintésis fase padet, produk akhir bakal tiasa sapertos cara manual anu tiasa dipercaya. Obat Purifikasi anu biasana dianggo pikeun peptida kaasup kroctinografi ion (irup) sareng papisah karacunan karacunan (sareng masalah pisal sareng anu langkung saé dipasarkeun ku hiji téknologi santai sajaba sareng hiji masalah pectriida, dimana Sepfllash RP C18 kartrij anu dimanfaatkeun kanggo purtifer gancang, TP-5) sareng produk target nyumponan sarat anu diala ku sarat anu diémutan sarat anu diala ku sarat anu diémutan sarat.
Gambar 1. 20 asam amino umum (diproduksi tina www.bachem.com).
Aya 20 jinis asam amino anu umum dina komposisi péptida. These amino acids can be divided into the following groups according to their polarity and acid-base property: non-polar (hydrophobic), polar (uncharged), acidic or basic (as shown in Figure 1). Dina seueur petunjuk séréd, upami asam amino nyababkeun panyawat anu béda (sakumaha anu ditandaan dina warna pink dina Gambar 1) Salila prosedur disababkeun pikeun conto pinttida anu kuat ku krokografi-fase, hiji denomena fase salajengna, Afin rumus anu diterbitkeun, Act Dibandingkeun sareng kolom C18 biasa, kolom c18Aq ningkat paling cocog pikeun purifikasi kutub atanapi conto hydrofilik anu kuat. Dina tulisan ieu, Poltida Pana berkejoseun salaku conto sareng dimurnikeun kolom C18Aq. Hasilna, minuhan produk ditargetkeun sarat anu diala sareng tiasa dianggo dina panalungtikan sareng pamekaran di handap ieu.
| Instrumén | Sepabean™mesin x | |||
| Cartridges | 12 g Sepflash C18 RP Flash Cartridge (Silica Spherical, 20 - 45 μM, 100 Å, mesen | 12 g Sepflll C18AQ Rplide Rltridge (Silika Spherical, 20 - 45 μm, 100222- | ||
| Panjang gelombang | 254 nm, 220 nm | 214 nm | ||
| Fase mobile | Swasur A: Cai Pelanggaran b: acetonitrile | |||
| Cai aliran | 15 ml / mnt | 20 ml / mnt | ||
| Conto beban | 30 mg | |||
| Grament | Waktu (CV) | Trumpur b (%) | Waktos (mnt) | Trumpur b (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12,5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16,5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15,5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Hasil sareng diskusi
Pikeun ngabandingkeun prestasi purifikasi pikeun conto Polar Peptida antara kolom C18 sareng kolom C18Aq, urang ngagunakeun kolom C18 biasa pikeun Defift. Sakumaha anu dipidangkeun dina Gambar 2, kusabab runtuh fase hidrofobik tina ranté C18 anu disababkeun ku rasio hawa anu saé, sampel éta langsung dikacinta ku fase mobile. Hasilna, sampel ieu henteu kapisah sareng dimurnikeun.
Gambar 2. Selflar friefam sampel dina kartrij ar8 biasa.
Salajengna, urang nganggo kolom C18Aq ka panyebarkeun lampu sitingan sampel. Sakumaha anu dipidangkeun dina Gambar 3, péptida nyaéta épéktip dipikabutuh dina kolom teras dikaluarkeun. Produk target anu dipisahkeun ti najis dina sampel atah sareng dikumpulkeun. Saatos lyofilization teras dianalisis ku HPCC, produk anu dimurnikeun janten panyebian 98.2% sareng tiasa dianggo pikeun Panaliti sareng pamekaran lengkah.
Gambar 3. Lampu kromatfer sampel dina kartrij C18AQ.
Dina kacindekan, sepaflash c18Aq rp flashed Rps digabungkeun sareng sistem kromatografi lampu™Mesin tiasa nawiskeun solusi anu gancang sareng efektif pikeun purifikasi polar anu kuat.
Aya seh sofflll c18AQ rp flash flashges kalayan spésifikasi tina téknologi santai (sapertos anu dipidangkeun dina tabel 2).
| Nomer barang | Ukuran kolom | Cai aliran (ml / mnt) | Max.Pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | Cai 20 | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-000-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222222-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-sp (AQ) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
Méja 2. Sipaflash C18AQ RP Flashes Cartridges. Bahan kemasan: efisiis luhur c18
Pikeun inpormasi langkung lengkep ngeunaan spésifikasi dinasikasi Mesicice Sepabean ™, atanapi inpormasi pesenan dina séri S cépfoless, mangga kunjungan situs wéb.
Waktu Pasang: Oktober188