Rui Huang, Bo Xu
Setsi sa R&D sa Kopo
Selelekela
Ion exchange chromatography (IEC) ke mokhoa oa chromatographic o atisang ho sebelisoa ho arola le ho hloekisa metsoako e hlahisoang ka mokhoa oa ionic ka tharollo.Ho ea ka litefiso tse fapaneng tsa li-ion tsa phapanyetsano, IEC e ka aroloa ka mefuta e 'meli, cation exchange chromatography le anion exchange chromatography.Ka chromatography ea phapanyetsano ea cation, lihlopha tse nang le asiti li tlamahane ka holim'a mecha ea phatlalatso ea karohano.Ka mohlala, sulfonic acid (-SO3H) ke sehlopha se atisang ho sebelisoa ka phapanyetsano e matla ea cation (SCX), e khethollang H + le sehlopha se nang le bothata bo bobe -SO3- ka hona se ka adsorb cations tse ling ka tharollo.Ka anion exchange chromatography, lihlopha tsa alkaline li tlamahane holim'a mecha ea phatlalatso ea karohano.Ka mohlala, quaternary amine (-NR3OH, moo R e leng sehlopha sa hydrocarbon) hangata e sebelisoa ka phapanyetsano e matla ea anion (SAX), e khethollang OH- le sehlopha se nang le qoso e ntle -N + R3 e ka adsorb anion tse ling ka tharollo, e leng se hlahisang anion. phapanyetsano phello.
Har'a lihlahisoa tsa tlhaho, li-flavonoids li hohetse tlhokomelo ea bafuputsi ka lebaka la karolo ea bona ea ho thibela le ho phekola mafu a pelo.Kaha limolek'hule tsa flavonoid li na le asiti ka lebaka la ho ba teng ha lihlopha tsa phenolic hydroxyl, ion exchange chromatography ke khetho e 'ngoe ho ekelletsa ho mokhahlelo o tloaelehileng oa chromatography bakeng sa karohano le tlhoekiso ea metsoako ena ea asiti.Ho flash chromatography, mecha ea phatlalatso ea karohano e atisang ho sebelisoa bakeng sa phapanyetsano ea ion ke silica gel matrix moo lihlopha tsa phapanyetsano ea ion li hokeloang holim'a eona.Mekhoa e sebelisoang ka ho fetisisa ea phapanyetsano ea ion ho flash chromatography ke SCX (hangata sehlopha sa sulfonic acid) le SAX (hangata sehlopha sa quaternary amine).Tlalehong ea kopo e phatlalalitsoeng pele e nang le sehlooho se reng "Kopo ea SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns in the Purification of Alkaline Compounds" ke Santai Technologies, li-columns tsa SCX li ile tsa sebelisoa bakeng sa tlhoekiso ea metsoako ea alkaline.Ketsahalong ena, ho ile ha sebelisoa motsoako oa litekanyetso tse sa jeleng paate le tsa acidic e le mohlala oa ho hlahloba tšebeliso ea litšiea tsa SAX ho hloekisoeng ha metsoako ea acidic.
Karolo ea Teko
Setšoantšo sa 1. Setšoantšo sa schematic sa mohato o emeng o tlamahane holim'a mecha ea phatlalatso ea SAX karohano.
Ka poso ena, ho ile ha sebelisoa kholomo ea SAX e neng e tletse ka silika e kopantsoeng ea quaternary amine (joalokaha ho bontšitsoe setšoantšong sa 1).Motsoako oa Chromone le 2,4-dihydroxybenzoic acid e ile ea sebelisoa e le sampuli e lokelang ho hloekisoa (joalokaha ho bontšitsoe setšoantšong sa 2).Motsoako o ile oa qhibiliha ka methanol 'me oa kenngoa ka har'a cartridge ea flash ka ente.Setupo sa liteko tsa ho hloekisa flash se thathamisitsoe ho Lethathamo la 1.
Setšoantšo sa 2. Sebopeho sa lik'hemik'hale tsa likarolo tse peli tsa motsoako oa mohlala.
| Seletsa | SepaBean™ mochini oa T | |||||
| Likhatriji | 4 g SepaFlash Standard Series flash cartridge (silika e sa tloaelehang, 40 - 63 μm, 60 Å, Nomoro ea taelo: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX flash cartridge (silika e sa tloaelehang, 40 - 63 μm, 60 Å, Nomoro ea taelo: SW-5001-004-IR) | ||||
| Wavelength | 254 nm (ho lemoha), 280 nm (ho beha leihlo) | |||||
| Mokhahlelo oa selefouno | Tharollo A: N-hexane | |||||
| Solvent B: Ethyl acetate | ||||||
| Sekhahla sa phallo | 30 ml ka motsotso | 20 ml / min | ||||
| Ho kenya mohlala | 20 mg (motsoako oa Karolo A le Karolo ea B) | |||||
| Gradient | Nako (CV) | Solvent B (%) | Nako (CV) | Solvent B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Liphetho le puisano
Taba ea pele, motsoako oa sampole o ile oa aroloa ke cartridge ea flash flash e neng e tletse silika e tloaelehileng.Joalo ka ha ho bonts'itsoe ho Setšoantšo sa 3, likarolo tse peli tsa sampole li ile tsa ntšoa ka har'a cartridge ka mor'a e 'ngoe.Ka mor'a moo, ho ile ha sebelisoa cartridge ea SAX flash bakeng sa ho hloekisa sampuli.Joalo ka ha ho bonts'itsoe ho Setšoantšo sa 4, acidic Component B e ile ea bolokoa ka botlalo ho cartridge ea SAX.Karolo ea A e sa nke lehlakore e ile ea ntšoa butle-butle ho tloha kariking ka ho hlakisoa ha mohato oa mobile.
Setšoantšo sa 3. Flash chromatogram ea sampuli ka cartridge e tloaelehileng ea mohato o tloaelehileng.
Setšoantšo sa 4. Chromatogram e khanyang ea sampuli ho cartridge ea SAX.
Ha ho bapisoa Setšoantšo sa 3 le sa 4, Karolo ea A e na le sebopeho se sa lumellaneng sa tlhōrō ho li-cartridges tse peli tse fapaneng tsa flash.Ho netefatsa hore na tlhoro ea elution e tsamaellana le karolo, re ka sebelisa tšobotsi e felletseng ea wavelength scanning e hahelletsoeng ka har'a software ea taolo ea mochini oa SepaBean™.Bula lintlha tsa liteko tsa likarohano tse peli, hula ho mola oa sesupo ho axis ea nako (CV) ho chromatogram ho ea sebakeng se phahameng ka ho fetesisa le ntlha ea bobeli e phahameng ka ho fetisisa ea tlhoro ea elution e tsamaellanang le Karolo ea A, le maqhubu a felletseng a maqhubu ana a mabeli. lintlha li tla bontšoa ka ho iketsa ka tlase ho chromatogram (joalokaha ho bontšitsoe setšoantšong sa 5 le setšoantšo sa 6).Ha ho bapisoa le data e felletseng ea maqhubu a maqhubu a likarohano tsena tse peli, Karolo ea A e na le sekhahla sa ho monya ka mokhoa o tsitsitseng litekong tse peli.Ka lebaka la Karolo ea A e na le sebopeho se sa tsitsang sa tlhōrō ho li-cartridges tse peli tse fapaneng tsa flash, ho nahanoa hore ho na le litšila tse khethehileng Karolong ea A e nang le ho boloka ho fapaneng ka har'a cartridge ea mohato o tloaelehileng le cartridge ea SAX.Ka hona, tatelano ea eluting e fapane bakeng sa Karolo ea A le ho se hloeke ho li-cartridges tsena tse peli tsa flash, ho baka sebopeho se sa lumellaneng sa tlhoro ea chromatogram.
Setšoantšo sa 5. Leqhubu le feletseng la wavelength ea Karolo ea A le ho se hloeke ho arohanngoa ke cartridge ea mohato o tloaelehileng.
Setšoantšo sa 6. Leqhubu le feletseng la wavelength ea Karolo ea A le ho se hloeke ho arohanngoa ke cartridge ea SAX.
Haeba sehlahisoa se reretsoeng ho bokelloa ke Karolo ea A e sa nke lehlakore, mosebetsi oa tlhoekiso o ka phethoa habonolo ka ho sebelisa cartridge ea SAX ka ho toba bakeng sa elution ka mor'a ho kenya sampole.Ka lehlakoreng le leng, haeba sehlahisoa se reretsoeng ho bokelloa ke Karolo ea Asiti ea B, mokhoa oa ho ntšoa o ka amoheloa ka phetoho e fokolang feela mehatong ea liteko: ha sampuli e ne e laetsoe ka cartridge ea SAX le karolo e sa nke lehlakore ea A. e ile ea hlakoloa ka ho feletseng ka li-solvents tse tloaelehileng tsa organic phase, fetola mohato oa selefouno ho tharollo ea methanol e nang le 5% ea acetic acid.Li-ion tsa acetate mokhahlelong o tsamaeang li tla qothisana lehlokoa le Karolo ea B bakeng sa ho tlamella lihlopha tsa quaternary amine ion mokhahlelong o emeng oa khatriji ea SAX, ka ho etsa joalo e tlose Karolo ea B ho tsoa khatriji ho fumana sehlahisoa se lebisitsoeng.Chromatogram ea sampole e arohaneng ka mokhoa oa phapanyetsano ea ion e bontšitsoe ho Setšoantšo sa 7.
Setšoantšo sa 7. Flash chromatogram ea Karolo ea B e hlahisitsoe ka mokhoa oa phapanyetsano ea ion ka cartridge ea SAX.
Qetellong, sampole e nang le asiti kapa e sa nke lehlakore e ka hloekisoa ka potlako ke khatriji ea SAX e kopantsoeng le khatriji e tloaelehileng e sebelisang maano a fapaneng a tlhoekiso.Ho feta moo, ka thuso ea sebopeho se felletseng sa "wavelength scanning" se hahelletsoeng ka har'a software ea taolo ea mochini oa SepaBean™, mokhoa oa ho monya oa likaroloana tse tlositsoeng o ka bapisoa le ho netefatsoa habonolo, ho thusa bafuputsi ho tseba kapele sebopeho le bohloeki ba likaroloana tse hlahisitsoeng, kahoo ba ntlafatsa. katleho ea mosebetsi.
| Nomoro ea Ntho | Boholo ba Kholomo | Sekhahla sa Phallo (mL/mots) | Khatello (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Letlapa la 2. SepaFlash Bonded Series SAX flash cartridges.Lisebelisoa tsa ho paka: Silika e sa tloaelehang e sa tloaelehang ea SAX, 40 - 63 μm, 60 Å.
Ho fumana lintlha tse ling mabapi le lintlha tse qaqileng tsa SepaBean™mochini, kapa tlhaiso-leseling e mabapi le li-cartridge tsa SepaFlash, ka kopo etela sebaka sa rona sa marang-rang.
Nako ea poso: Nov-09-2018