Пречишћавање екстракта Такус помоћу СепаБеан™ машине

Меијуан Ћиан, Јуефенг Тан, Бо Ксу
Центар за истраживање и развој апликација

Увод
Таксус (Такус цхиненсис или кинеска тиса) је дивља биљка заштићена од стране земље.То је ретка и угрожена биљка коју су за собом оставили квартарни глечери.То је уједно и једина природна лековита биљка на свету.Такус је распрострањен у умереном појасу северне хемисфере до средњег субтропског региона, са око 11 врста у свету.У Кини постоје 4 врсте и 1 сорта, а то су североисточни таксус, такс Јунан, таксус, тибетански таксус и јужни таксус.Ових пет врста су распрострањене у југозападној Кини, Јужној Кини, Централној Кини, Источној Кини, Северозападној Кини, Североисточној Кини и Тајвану.Такус биљке садрже широк спектар хемијских компоненти, укључујући таксане, флавоноиде, лигнане, стероиде, фенолне киселине, сесквитерпене и гликозиде.Чувени лек против тумора таксол (или паклитаксел) је врста таксана.Таксол има јединствене механизме против рака.Таксол може да „замрзне“ микротубуле чешљајући се са њима и спречи микротубуле да одвоје хромозоме у време деобе ћелије, што доводи до смрти ћелија које се деле, посебно ћелија рака које се брзо размножавају[1].Штавише, активирањем макрофага, таксол изазива смањење рецептора ТНФ-α (фактор некрозе тумора) и ослобађање ТНФ-α, чиме убија или инхибира ћелије тумора[2].Штавише, таксол може да изазове апоптозу деловањем на пут апоптотичког рецептора посредован Фас/ФасЛ или активирањем система цистеин протеазе[3].Због свог вишеструког циљаног антиканцерогеног ефекта, таксол се широко користи у лечењу рака јајника, рака дојке, карцинома не-малих ћелија плућа (НСЦЛЦ), рака желуца, рака једњака, рака бешике, рака простате, малигног меланома, главе и врата рак, итд[4].Посебно за узнапредовали рак дојке и узнапредовали рак јајника, Такол има изванредан лековити ефекат, стога је познат као „последња линија одбране за лечење рака“.

Таксол је најпопуларнији лек против рака на међународном тржишту последњих година и сматра се једним од најефикаснијих лекова против рака за људе у наредних 20 година.Последњих година, са експлозивним растом становништва и појавом рака, потражња за таксолом је такође значајно порасла.Тренутно се таксол потребан за клиничка или научна истраживања углавном екстрахује директно из Такуса.Нажалост, садржај таксола у биљкама је прилично низак.На пример, садржај таксола је само 0,069% у кори Такус бревифолиа, за коју се генерално сматра да има највећи садржај.За екстракцију 1 г таксола потребно је око 13,6 кг коре таксуса.На основу ове процене, потребно је 3 – 12 стабала Такуса која су стара више од 100 година да би се лечио пацијент са раком јајника.Као резултат тога, велики број стабала Такуса је посечен, што је довело до скорог изумирања ове драгоцене врсте.Поред тога, Такус је веома сиромашан ресурсима и спор у расту, што отежава даљи развој и коришћење Таксола.

Тренутно је потпуна синтеза таксола успешно завршена.Међутим, његов синтетички пут је веома сложен и скуп, због чега нема индустријски значај.Полусинтетички метод таксола је сада релативно зрео и сматра се ефикасним начином за проширење извора таксола поред вештачке садње.Укратко, у полусинтези таксола, прекурсорско једињење таксола које је релативно обилно у биљкама Такус екстрахује се и затим се хемијском синтезом претвара у таксол.Садржај 10-деацетилбакатина Ⅲ у иглицама Такус баццата може бити до 0,1%.А иглице се лако обнављају у поређењу са кором.Стога, полусинтеза таксола на бази 10-деацетилбакатина Ⅲ привлачи све већу пажњу истраживача[5] (као што је приказано на слици 1).

Слика 1. Полусинтетички пут таксола на бази 10-деацетилбакатина Ⅲ.

У овом посту, екстракт биљке Такус је пречишћен помоћу машине за флеш препаративну течну хроматографију СепаБеан™ у комбинацији са СепаФласх Ц18 флеш кертриџима са реверзном фазом (РП) које производи Сантаи Тецхнологиес.Добијен је циљни производ који испуњава захтеве чистоће и може се користити у наредним научним истраживањима, нудећи исплативо решење за брзо пречишћавање ове врсте природних производа.