Руи Хуанг, Бо Ксу
Примена Р & Д центар
Увођење
Пептид је једињење састављено од аминокиселина, од којих свака има јединствена физичка и хемијска својства због различитих врста и редоследа остатака аминокиселинских аминокиселина који чине његову секвенцу. Са развојем хемијске синтезе чврсте фазе хемијске синтезе различитих активних пептида је постигао велики напредак. Међутим, због компликованог састава пептида добијеног синтезе чврсте фазе, коначни производ треба пречистити поузданим методама раздвајања. Обично коришћене методе прочишћавања за пептиде укључују ионску хроматографију (ИЕЦ) и обрнуто-фазну течну хроматографију (РП-ХПЛЦ), који имају недостатке капацитета малим узорка, високе трошкове медија за узимање медија, компликоване и скупе опреме за одвајање (МВ <1 КДА), на брзом пречишћавању малих молекула, итд САНТАИ је претходно објавио Технологије, у којима је сепафласх РП Ц18 кертриџ коришћен за брзо пречишћавање тимопентина (ТП-5) и циљни сусрет на циљ је добијен услови.
Слика 1. 20 Уобичајене аминокиселине (репродуциране од ввв.бацхем.цом).
Постоје 20 врста аминокиселина које су уобичајене у саставу пептида. Ове аминокиселине могу се поделити у следеће групе у складу са својом некретнинама у основи и киселине: непаркофобично (хидрофобично), поларни (непроменљиви), кисели или основни (као што је приказано на слици 1). У пептидном секвенци, ако су аминокиселине које чине секвенцу углавном поларне (као што су обележене у ружичастој боји на слици 1), као што су цистеин, глутамин, шпарогин, серин, тренин, тирозин итд. Тада овај пептид може имати снажну поларитет и бити високо растворљив у води Током поступка пречишћавања за ове јаке поларне пептидне узорке хроматографијом на фази, појавиће се феномен под називом ХИДРОФОБНА ФАЗНА ФАЗНА ПРИЈАВА ЗА ПРЕДМЕТУ ПРИЈАВЕ САНТАЈНЕ ТЕХНОЛОГИЈЕ: ХИДОНОФХОБНА ФАЗА ФАЗЕ ФАЗЕ ФАЗЕ ФАЗЕ ФАЗЕ ФАЗЕ ФАЗИ Ступци и њихове апликације. У поређењу са редовним ступовима Ц18, побољшани ц18ак колоне су најприкладнији за пречишћавање јаких поларних или хидрофилних узорака. У овом посту, снажан поларни пептид је искориштен као узорак и пречишћен Ц18АК колоном. Као резултат тога, циљни састанак производа је добијен и може се користити у следећем истраживању и развоју.
| Инструмент | Сепабеан™Машина 2 | |||
| Кертриџи | 12 г Сепафласх Ц18 РП Фласх Цартридге (сферна силика, 20 - 45 μм, 100 а, наручите Нунбер: СВ-5222-012-СП) | 12 г Сепафласх Ц18АК РП Фласх Цартридге (сферна силика, 20 - 45 μм, 100 а, број наруџбе: СВ-5222-012-СП (АК)) | ||
| Таласна дужина | 254 нм, 220 нм | 214 нм | ||
| Мобилна фаза | Растварач а: вода Растварач Б: ацетонитрил | |||
| Брзина протока | 15 мл / мин | 20 мл / мин | ||
| Учитавање узорака | 30 мг | |||
| Градијент | Време (ЦВ) | Растварач б (%) | Време (мин) | Растварач б (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
Резултати и дискусија
Да бисмо упоредили перформансе пречишћавања поларног пептидног узорка између редовне ступце Ц18 и Ц18АК колоне, користили смо редовну Ц18 колону за пречишћавање бљескалице узорка као почетак. Као што је приказано на слици 2, због колапса хидрофобне фазе Ц18 ланца узрокованих високим воденим омјером, узорак је једва задржан на регуларном Ц18 кертриџу и директно је елуирала мобилном фазом. Као резултат тога, узорак није био ефикасно одвојен и пречишћен.
Слика 2. Фласх хроматограм узорка на регуларном Ц18 кертриџу.
Затим смо користили ц18ак колону за пречишћавање бљескалице узорка. Као што је приказано на слици 3, пептид је био ефикасно задржан на колони, а затим је елуиран. Циљни производ је одвојен од нечистоћа у сировом узорку и прикупљен. Након лиофилизације, а затим је анализирао ХПЛЦ, пречишћени производ има чистоћу од 98,2% и може се даље користити за истраживање и развој Сљедећег корака.
Слика 3. Фласх хроматограм узорка на Ц18ак улошци.
Закључно, Сепафласх Ц18АК РП флеш кертриџ у комбинацији са Фласх хроматографијом систем сепабеан™Машина би могла да понуди брзо и ефикасно решење за пречишћавање јаких поларних или хидрофилних узорака.
Постоје серија сепафласх ц18ак рп флеш кертриџа са различитим спецификацијама из Сантаи технологије (као што је приказано у Табели 2).
| Број предмета | Величина колоне | Брзина протока (мл / мин) | Мак.тпрессуре (Пси / бар) |
| СВ-5222-004-СП (АК) | 5.4 г | 5-15 | 400 / 27.5 |
| СВ-5222-012-СП (АК) | 20 г | 10-25 | 400 / 27.5 |
| СВ-5222-025-СП (АК) | 33 г | 10-25 | 400 / 27.5 |
| СВ-5222-040-СП (АК) | 48 г | 15-30 | 400 / 27.5 |
| СВ-5222-080-СП (АК) | 105 г | 25-50 | 350/24.0 |
| СВ-5222-120-СП (АК) | 155 г | 30-60 | 300 / 20.7 |
| СВ-5222-220-СП (АК) | 300 г | 40-80 | 300 / 20.7 |
| СВ-5222-330-СП (АК) | 420 г | 40-80 | 250 / 17.2 |
Табела 2 Сепафласх Ц18АК РП Фласх кертриџи. Материјали за паковање: СПХЕРИЧКА ХИГХТФИОНЦИОНСЕ СПХЕРИЧКЕ Ц18 (АК) -БОНЕД СилиЦа, 20 - 45 ум, 100 а.
За даљње информације о детаљним спецификацијама Сепабеан ™ машине или информације о наручивању на Фласх кертриџама Сепафласх серије, посетите нашу веб страницу.
Вријеме поште: ОКТ-12-2018