Mingzu Yang, Bo Xu
Qendra e Kërkimit dhe Zhvillimit të Aplikimit
Prezantimi
Antibiotikët janë një klasë e metabolitëve dytësorë të prodhuar nga mikroorganizmat (përfshirë bakteret, kërpudhat, aktinomicetet) ose komponime të ngjashme që sintetizohen ose gjysëm sintetizohen kimikisht.Antibiotikët mund të pengojnë rritjen dhe mbijetesën e mikroorganizmave të tjerë.Antibiotiku i parë i zbuluar nga njeriu, penicilina, u zbulua nga mikrobiologu britanik Alexander Fleming në vitin 1928. Ai vuri re se bakteret në afërsi të mykut nuk mund të rriteshin në enën e kulturës së stafilokokut e cila ishte e kontaminuar me myk.Ai supozoi se myku duhet të sekretojë një substancë antibakteriale, të cilën ai e quajti penicilinë në vitin 1928. Megjithatë, përbërësit aktivë nuk u pastruan në atë kohë.Në vitin 1939, Ernst Chain dhe Howard Florey nga Universiteti i Oksfordit vendosën të zhvillonin një ilaç që mund të trajtonte infeksionet bakteriale.Pasi kontaktuan Flemingun për të marrë shtame, ata nxorrën dhe pastruan me sukses penicilinën nga shtamet.Për zhvillimin e tyre të suksesshëm të penicilinës si një ilaç terapeutik, Fleming, Chain dhe Florey ndanë çmimin Nobel në Mjekësi të vitit 1945.
Antibiotikët përdoren si agjentë antibakterialë për të trajtuar ose parandaluar infeksionet bakteriale.Ka disa kategori kryesore të antibiotikëve që përdoren si agjentë antibakterialë: antibiotikët β-laktam (përfshirë penicilinën, cefalosporinën, etj.), Antibiotikët aminoglikozidë, antibiotikët makrolidë, antibiotikët tetraciklin, kloramfenikoli (antibiotikë sintetik total) etj. Burimet e antibiotikëve përfshijnë fermentimi biologjik, gjysmë-sinteza dhe sinteza totale.Antibiotikët e prodhuar nga fermentimi biologjik duhet të modifikohen strukturisht me metoda kimike për shkak të stabilitetit kimik, efekteve anësore toksike, spektrit antibakterial dhe çështjeve të tjera.Pas modifikimit kimik, antibiotikët mund të arrijnë qëndrueshmëri të shtuar, reduktim të efekteve anësore toksike, zgjerim të spektrit antibakterial, reduktim të rezistencës ndaj ilaçeve, përmirësim të biodisponueshmërisë dhe në këtë mënyrë përmirësim të efektit të trajtimit me ilaçe.Prandaj, antibiotikët gjysmë sintetikë janë aktualisht drejtimi më i popullarizuar në zhvillimin e barnave antibiotike.
Në zhvillimin e antibiotikëve gjysmë sintetikë, antibiotikët kanë vetitë e pastërtisë së ulët, shumë nënprodukte dhe komponentë komplekse pasi ato rrjedhin nga produktet e fermentimit mikrobik.Në këtë rast, analiza dhe kontrolli i papastërtive në antibiotikët gjysmë sintetikë është veçanërisht i rëndësishëm.Për të identifikuar dhe karakterizuar në mënyrë efektive papastërtitë, është e nevojshme të merret një sasi e mjaftueshme e papastërtive nga produkti sintetik i antibiotikëve gjysmë sintetikë.Ndër teknikat e zakonshme të përgatitjes së papastërtive, kromatografia flash është një metodë me kosto efektive me avantazhe të tilla si sasia e madhe e ngarkimit të mostrës, kostoja e ulët, kursimi i kohës, etj. Kromatografia flash është përdorur gjithnjë e më shumë nga studiuesit sintetikë.
Në këtë postim, papastërtia kryesore e një antibiotiku aminoglikozid gjysmë sintetik u përdor si mostër dhe u pastrua nga një fishek SepaFlash C18AQ i kombinuar me sistemin e kromatografisë flash SepaBean™.Produkti i synuar që plotëson kërkesat u përftua me sukses, duke sugjeruar një zgjidhje shumë efikase për pastrimin e këtyre përbërjeve.
Seksioni Eksperimental
Mostra u dha me dashamirësi nga një kompani farmaceutike lokale.Mostra ishte një lloj amino karbohidratesh policiklike dhe struktura e tij molekulare ishte e ngjashme me antibiotikët aminoglikozidë.Polariteti i kampionit ishte mjaft i lartë, duke e bërë atë shumë të tretshëm në ujë.Diagrami skematik i strukturës molekulare të kampionit është paraqitur në Figurën 1. Pastërtia e kampionit të papërpunuar ishte rreth 88% e analizuar me HPLC.Për pastrimin e këtyre përbërjeve me polaritet të lartë, kampioni mezi do të mbahej në kolonat e rregullta C18 sipas përvojave tona të mëparshme.Prandaj, një kolonë C18AQ u përdor për pastrimin e mostrës.
Figura 1. Diagrami skematik i strukturës molekulare të kampionit.
Për të përgatitur tretësirën e mostrës, mostra e papërpunuar prej 50 mg u shpërnda në 5 ml ujë të pastër dhe më pas u bë me ultratinguj në mënyrë që të bëhej një zgjidhje plotësisht e pastër.Zgjidhja e mostrës më pas u injektua në kolonën flash me një injektor.Konfigurimi eksperimental i pastrimit flash u rendit në Tabelën 1.
| Instrumenti | Makina SepaBean™ 2 | |
| fishekë | 12 g fishek flash SepaFlash C18AQ RP (silicë sferike, 20 - 45μm, 100 Å, numri i porosisë:SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Gjatësia e valës | 204 nm, 220 nm | |
| Faza e lëvizshme | Tretësi A: Uji Tretësi B: Acetonitril | |
| Shkalla e rrjedhjes | 15 ml/min | |
| Ngarkimi i mostrës | 50 mg | |
| Gradient | Koha (min) | Tretësi B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Rezultate dhe diskutime
Kromatogrami flash i kampionit në fishekun C18AQ u tregua në figurën 2. Siç tregohet në figurën 2, kampioni shumë polar u mbajt në mënyrë efektive në fishekun C18AQ.Pas liofolizimit për fraksionet e mbledhura, produkti i synuar kishte një pastërti prej 96.2% (siç tregohet në figurën 3) nga analiza HPLC.Rezultatet treguan se produkti i pastruar mund të përdoret më tej në hapin tjetër të kërkimit dhe zhvillimit.
Figura 2. Kromatogrami flash i kampionit në një fishek C18AQ.
Figura 3. Kromatogrami HPLC i produktit të synuar.
Si përfundim, fishek flash SepaFlash C18AQ RP i kombinuar me sistemin e kromatografisë flash, makinën SepaBean™ mund të ofrojë një zgjidhje të shpejtë dhe efektive për pastrimin e mostrave shumë polare.
Rreth fishekëve flash SepaFlash C18AQ RP
Ekzistojnë një seri fishekësh flash SepaFlash C18AQ RP me specifika të ndryshme nga teknologjia Santai (siç tregohet në Tabelën 2).
| Numri i artikullit | Madhësia e kolonës | Shkalla e rrjedhjes (mL/min) | Maksimumi.Presioni (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabela 2. Fishekët flash SepaFlash C18AQ RP.Materialet e paketimit: silicë sferike C18(AQ)-lidhur me efikasitet të lartë, 20 - 45 μm, 100 Å.
Për informacion të mëtejshëm mbi specifikimet e detajuara të makinës SepaBean™ ose informacionin e porositjes për fishekët e flashit të serisë SepaFlash, ju lutemi vizitoni faqen tonë të internetit.
Koha e postimit: Tetor-26-2018