Aplikimi i kolonave të kromatografisë së shkëmbimit të anionit të fortë SepaFlash në pastrimin e përbërjeve acide

Rezultate dhe diskutime

Së pari, përzierja e kampionit u nda nga një fishek flash me fazë normale të parapaketuar me silicë të rregullt.Siç tregohet në figurën 3, dy komponentët në kampion u eluan nga fisheku njëri pas tjetrit.Më pas, një fishek flash SAX u përdor për pastrimin e kampionit.Siç tregohet në figurën 4, Komponenti B acid u mbajt plotësisht në fishekun SAX.Komponenti neutral A u elua gradualisht nga fisheku me elucionin e fazës së lëvizshme.

Figura 3. Kromatogrami flash i kampionit në një fishek të rregullt me ​​fazë normale.

Figura 4. Kromatogrami flash i kampionit në një fishek SAX.
Duke krahasuar Figurën 3 dhe Figurën 4, Komponenti A ka formë të paqëndrueshme të majës në dy fishekë të ndryshëm të blicit.Për të konfirmuar nëse kulmi i elucionit korrespondon me komponentin, ne mund të përdorim funksionin e skanimit me gjatësi të plotë vale, i cili është i integruar në softuerin e kontrollit të makinës SepaBean™.Hapni të dhënat eksperimentale të dy ndarjeve, tërhiqni në vijën treguese në boshtin e kohës (CV) në kromatogram deri në pikën më të lartë dhe pikën e dytë më të lartë të pikut të elucionit që korrespondon me Komponentin A dhe spektrin e plotë të gjatësisë valore të këtyre dyve pikat do të shfaqen automatikisht poshtë kromatogramit (siç tregohet në Figurën 5 dhe Figura 6).Duke krahasuar të dhënat e spektrit të plotë të gjatësisë valore të këtyre dy ndarjeve, Komponenti A ka spektër të qëndrueshëm të përthithjes në dy eksperimente.Për arsye se Komponenti A ka formë të paqëndrueshme të majës në dy fishekë të ndryshëm blici, supozohet se ka papastërti specifike në komponentin A i cili ka mbajtje të ndryshme në fishekun e fazës normale dhe fishekun SAX.Prandaj, sekuenca e elucionit është e ndryshme për Komponentin A dhe papastërtitë në këto dy fishekë flash, duke rezultuar në formë jokonsistente të majës në kromatogramë.

Figura 5. Spektri i gjatësisë valore të plotë të komponentit A dhe papastërtia e ndarë nga fisheku i fazës normale.

Figura 6. Spektri i plotë i gjatësisë valore të komponentit A dhe papastërtia e ndarë me fishekun SAX.

Nëse produkti i synuar që do të mblidhet është Komponenti A neutral, detyra e pastrimit mund të kryhet lehtësisht duke përdorur direkt fishekun SAX për elucionin pas ngarkimit të mostrës.Nga ana tjetër, nëse produkti i synuar që do të mblidhet është Komponenti B acidik, mënyra e kapjes-lirimit mund të miratohet vetëm me një rregullim të lehtë në hapat eksperimental: kur kampioni u ngarkua në fishekun SAX dhe në Komponentin A neutral. u eluat plotësisht me tretës organikë të fazës normale, kaloni fazën e lëvizshme në solucionin e metanolit që përmban 5% acid acetik.Jonet e acetatit në fazën e lëvizshme do të konkurrojnë me Komponentin B për lidhjen me grupet e joneve të aminave kuaternare në fazën stacionare të fishekut SAX, duke elueruar kështu komponentin B nga fisheku për të marrë produktin e synuar.Kromatogrami i kampionit të ndarë në mënyrën e shkëmbimit të joneve është paraqitur në Figurën 7.

Figura 7. Kromatogrami flash i Komponentit B i elutur në modalitetin e shkëmbimit të joneve në një fishek SAX.

Si përfundim, kampioni acid ose neutral mund të pastrohet me shpejtësi nga fisheku SAX i kombinuar me fishekun e fazës normale duke përdorur strategji të ndryshme pastrimi.Për më tepër, me ndihmën e funksionit të skanimit me gjatësi të plotë vale të integruar në softuerin e kontrollit të makinës SepaBean™, spektri karakteristik i absorbimit të fraksioneve të elutura mund të krahasohet dhe konfirmohet lehtësisht, duke i ndihmuar studiuesit të përcaktojnë shpejt përbërjen dhe pastërtinë e fraksioneve të elura dhe duke përmirësuar kështu. efikasiteti i punës.