Rui Huang, bo xu
Aplikimi R&D Center
Prezantim
Kromatografia e shkëmbimit të joneve (IEC) është një metodë kromatografike që përdoret zakonisht për të ndarë dhe pastruar komponimet të cilat paraqiten në formë jonike në zgjidhje. Sipas gjendjeve të ndryshme të ngarkimit të joneve të shkëmbyeshëm, IEC mund të ndahet në dy lloje, kromatografinë e shkëmbimit të kationit dhe kromatografinë e shkëmbimit të anioneve. Në kromatografinë e shkëmbimit të kationit, grupet acidike lidhen në sipërfaqen e mediave të ndarjes. Për shembull, acidi sulfonik (-SO3H) është një grup i përdorur zakonisht në shkëmbimin e fortë të kationit (SCX), i cili shkëputet H+ dhe grupi i ngarkuar negativisht -SO3- kështu mund të adsorbojë kationet e tjera në zgjidhje. Në kromatografinë e shkëmbimit të anioneve, grupet alkaline janë të lidhura në sipërfaqen e mediave të ndarjes. Për shembull, quaternary amine (-NR3OH, ku R është grup hidrokarbure) zakonisht përdoret në shkëmbimin e fortë të anioneve (SAX), i cili shkëputet OH- dhe grupi i ngarkuar pozitivisht -N+R3 mund të adsorbojë anione të tjera në zgjidhje, duke rezultuar në efektin e shkëmbimit të anionit.
Ndër produktet natyrore, flavonoidet kanë tërhequr vëmendjen e studiuesve për shkak të rolit të tyre në parandalimin dhe trajtimin e sëmundjeve kardiovaskulare. Meqenëse molekulat flavonoide janë acidike për shkak të pranisë së grupeve fenolike hidroksil, kromatografia e shkëmbimit të joneve është një mundësi alternative përveç fazës normale konvencionale ose kromatografisë së fazës së përmbysur për ndarjen dhe pastrimin e këtyre komponimeve acidike. Në kromatografinë flash, media e ndarjes e përdorur zakonisht për shkëmbimin e joneve është matrica e xhelit silicë ku grupet e shkëmbimit të joneve janë të lidhura në sipërfaqen e saj. Mënyrat më të përdorura të shkëmbimit të joneve në kromatografinë flash janë SCX (zakonisht grupi i acidit sulfonik) dhe SAX (zakonisht grupi amine kuaternar). Në shënimin e aplikimit të botuar më parë me titullin "Aplikimi i kolonave të kromatografisë së shkëmbimit të fortë të shkëmbimit të fortë në pastrimin e komponimeve alkaline" nga Santai Technologies, kolonat SCX u përdorën për pastrimin e komponimeve alkaline. Në këtë post, u përdor një përzierje e standardeve neutrale dhe acidike si mostra për të eksploruar aplikimin e kolonave SAX në pastrimin e komponimeve acidike.
Seksion eksperimental
Figura 1. Diagrami skematik i fazës së palëvizshme të lidhur me sipërfaqen e mediave të ndarjes SAX.
Në këtë post, u përdor një kolonë SAX e paracaktuar me silicë kuaternare të lidhur me amine (siç tregohet në figurën 1). Një përzierje e kromonit dhe acidit 2,4-dihidroksibenzoik u përdor si mostra që duhet të pastrohet (siç tregohet në figurën 2). Përzierja u tret në metanol dhe u ngarkua në fishekun e flashit nga një injeksion. Vendosja eksperimentale e pastrimit të flashit është renditur në Tabelën 1.
Figura 2. Struktura kimike e dy përbërësve në përzierjen e mostrës.
| Instrument | SEPABEAN ™ MAKINA T | |||||
| Fishekë | 4 g Sepaflash Series Standard Series Flash Flash (silicë e parregullt, 40-63 μm, 60 Å, Numri i Rendit: S-5101-0004) | 4 g Sepaflash Seria e lidhur SAX Flash Flash (silicë e parregullt, 40-63 μm, 60 Å, numri i porosisë ： SW-5001-004-IR) | ||||
| Gjatësi vale | 254 nm (zbulim), 280 nm (monitorim) | |||||
| Faza e lëvizshme | Tretës A: n-heksan | |||||
| Tretësi B: etil acetat | ||||||
| Normë e rrjedhës | 30 ml/min | 20 ml/min | ||||
| Mostra e ngarkimit | 20 mg (një përzierje e përbërësit a dhe përbërës b) | |||||
| Gradient | Koha (CV) | Tretës b (%) | Koha (CV) | Tretës b (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
Rezultatet dhe diskutimi
Së pari, përzierja e mostrës u nda nga një fishek flash në fazë normale të para-mbushur me silicë të rregullt. Siç tregon në Figurën 3, të dy përbërësit në mostër u zgjodhën nga fisheku njëra pas tjetrës. Tjetra, u përdor një fishek Sax Flash për pastrimin e mostrës. Siç tregon në Figurën 4, përbërësi acid B u mbajt plotësisht në fishekun Sax. Komponenti neutral A u zgjodh gradualisht nga fisheku me zgjatjen e fazës së lëvizshme.
Figura 3. Kromatogrami flash të mostrës në një fishek të rregullt të fazës normale.
Figura 4. Kromatogrami flash të mostrës në një fishek sax.
Duke krahasuar Figurën 3 dhe Figurën 4, përbërësi A ka formë të paqëndrueshme të pikut në dy fishekë të ndryshëm flash. Për të konfirmuar nëse kulmi i elution është që korrespondon me përbërësin, ne mund të përdorim veçorinë e skanimit të gjatësisë së valës e cila është ndërtuar në softuerin e kontrollit të makinës Sepabean. Hapni të dhënat eksperimentale të dy ndarjeve, tërhiqni në vijën e treguesit në boshtin kohor (CV) në kromatogram në pikën më të lartë dhe pikën e dytë më të lartë të pikut të elution që korrespondon me përbërësin A, dhe spektrin e plotë të gjatësisë së valës së këtyre dy pikave do të tregohet automatikisht nën kromatogram (siç tregohet në figurën 5 dhe figura 6). Duke krahasuar të dhënat e spektrit të gjatësisë së valës së plotë të këtyre dy ndarjeve, përbërësi A ka një spektër të qëndrueshëm të absorbimit në dy eksperimente. Për arsyen e përbërësit A ka një formë të paqëndrueshme të pikut në dy fishekë të ndryshëm flash, spekulohet se ekziston papastërti specifike në përbërësin A i cili ka mbajtje të ndryshme në fishekun e fazës normale dhe fishekun sax. Prandaj, sekuenca e zgjatur është e ndryshme për përbërësin A dhe papastërtia në këto dy fishekë flash, duke rezultuar në formë të paqëndrueshme të pikut në kromatogramë.
Figura 5. Spektri i plotë i gjatësisë së valës së përbërësit A dhe papastërtia e ndarë me fishek fazor normal.
Figura 6. Spektri i plotë i gjatësisë së valës së përbërësit A dhe papastërtia e ndarë nga fisheku sax.
Nëse produkti i synuar që do të mblidhet është komponenti neutral A, detyra e pastrimit mund të plotësohet lehtësisht duke përdorur direkt fishekun SAX për elution pas ngarkimit të mostrës. Nga ana tjetër, nëse produkti i synuar që do të mblidhet është përbërësi acid B, mënyra e lëshimit të kapjes mund të miratohet me vetëm një rregullim të vogël në hapat eksperimentalë: kur mostra ishte e ngarkuar në fishekun Sax dhe përbërësi neutral A u zgjodh plotësisht me solucione organike fazore normale, kaloni fazën e lëvizshme në zgjidhjen metanol që përmbante 5% acid acetik. Jonet e acetateve në fazën e lëvizshme do të konkurrojnë me përbërësin B për lidhjen me grupet e joneve amine kuaternare në fazën e palëvizshme të fishekut SAX, duke elutuar kështu përbërësin B nga fishekë për të marrë produktin e synuar. Kromatogrami i mostrës i ndarë në modalitetin e shkëmbimit të joneve u tregua në figurën 7.
Figura 7. Kromatogrami flash i përbërësit B elutuar në modalitetin e shkëmbimit të joneve në një fishek sax.
Si përfundim, kampioni acid ose neutral mund të pastrohet me shpejtësi nga fishekë sax i kombinuar me fishekë faza normale duke përdorur strategji të ndryshme pastrimi. Për më tepër, me ndihmën e veçorisë së skanimit të gjatësisë së valës së plotë të ndërtuar në programin e kontrollit të makinës Sepabean, spektri karakteristik i thithjes së fraksioneve të zgjatura mund të krahasohet dhe konfirmohet lehtë, duke ndihmuar studiuesit të përcaktojnë shpejt përbërjen dhe pastërtinë e fraksioneve të zgjatura dhe duke përmirësuar kështu efikasitetin e punës.
| Numri i artikullit | Madhësia e kolonës | Normë e rrjedhës (ml/min) | Presion maksimal (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 g | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 g | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 g | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 g | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 g | 50-100 | 250/17.2
|
Tabela 2. SEEFAFLASHT SERIE SERIA SAX FLAK FLASH. Materialet e paketimit: Silica ultra e parregullt të lidhura me SAX, 40-63 μm, 60.
Për më shumë informacion mbi specifikimet e hollësishme të SepabeanMakinë, ose informacionin e porositjes mbi Sepaflash Series Flash Flash Flash, ju lutemi vizitoni faqen tonë të internetit.
Koha e Postimit: Nëntor-09-2018