Uporaba stolpcev s kromatografijo močne anionske izmenjave sepaflash pri čiščenju kislih spojin

Rezultati in razprava

Prvič, vzorčno zmes smo ločili z običajnim faznim bliskovnim kartušo, predhodno pakirano z običajnim silicijevim dioksidom. Kot je prikazano na sliki 3, sta bili dve komponenti v vzorcu eluirani iz kartuše drug za drugim. Nato smo za čiščenje vzorca uporabili saksovo flash kartušo. Kot je prikazano na sliki 4, je bila kisla komponenta B v celoti zadržana na kartuši SAX. Nevtralna komponenta A je bila postopoma eluirana iz kartuše z elucijo mobilne faze.

Slika 3. Flash kromatogram vzorca na običajnem običajnem faznem kartuši.

Slika 4. Flash kromatogram vzorca na kartuši SAX.
Če primerjamo sliko 3 in slike 4, ima komponenta A neskladno vrhovno obliko na dveh različnih kartušah bliskavice. Da bi potrdili, ali vrhunec elucije ustreza komponenti, lahko uporabimo celotno funkcijo skeniranja valovne dolžine, ki je vgrajena v nadzorno programsko opremo Sepabean ™ Machine. Odprite eksperimentalne podatke obeh ločitve, povlecite do indikatorne črte na časovni osi (CV) v kromatogramu do najvišje točke in drugo najvišjo točko elucijskega vrha, ki ustreza komponenti A, in celotni spekter valovnih dolžin teh dveh točk bo samodejno prikazan pod kromatogramom (kot je prikazano na sliki 5 in sliki 6). Če primerjamo podatke o popolni valovni dolžini teh dveh ločitve, ima komponenta A konsistenten absorpcijski spekter v dveh poskusih. Zaradi razloga komponente A ima neskladno vrhovno obliko na dveh različnih kartušah bliskavice, ugiba se, da je v komponenti A specifična nečistoča, ki ima različno zadrževanje na običajni fazni kartuši in kartuši SAX. Zato je eluivno zaporedje različno za komponento A in nečistoč na teh dveh bliskovnih kartušah, kar ima za posledico nedosledno vrhovno obliko na kromatogramih.

Slika 5. Spekter celotne valovne dolžine komponente A in nečistoče, ločene z normalno fazno kartušo.

Slika 6. Celoten spekter valovne dolžine komponente A in nečistoče, ločeno s saksovo kartušo.

Če je ciljni izdelek, ki ga je treba zbrati, nevtralna komponenta A, lahko opravilo čiščenja enostavno dokončamo z neposredno uporabo kartuše SAX za elucijo po nalaganju vzorca. Po drugi strani pa je, če je ciljni izdelek, ki ga je treba zbrati, kisla komponenta B, način zajemanja releaze sprejeti le z rahlo prilagoditvijo v eksperimentalnih korakih: ko smo vzorec naložili na kartušo SAX in nevtralno komponento A popolnoma eluirali z normalno fazno organsko topilo, mobilno fazo preklopijo v metanol, ki vsebuje 5%, ki vsebuje 5% ocena. Acetatni ioni v mobilni fazi bodo tekmovali s komponento B za vezavo na kvartarne aminske ionske skupine na stacionarni fazi kartuše SAX in s tem izplačali komponento B iz kartuše, da bi dobili ciljni izdelek. Kromatogram vzorca, ločenega v načinu izmenjave ionov, je prikazan na sliki 7.

Slika 7. Flash kromatogram komponente B, ki je eluiran v načinu izmenjave ionov na kartuši SAX.

Za zaključek bi lahko kisli ali nevtralni vzorec hitro očistili s saksovo kartušo v kombinaciji z normalno fazno kartušo z uporabo različnih strategij čiščenja. Poleg tega bi bilo mogoče s pomočjo funkcije skeniranja s polno valovno dolžino, vgrajeno v nadzorno programsko opremo Sepabean ™, značilni spekter absorpcije eluiranih frakcij enostavno primerjati in potrditi, kar bi raziskovalcem pomagalo hitro določiti sestavo in čistost eluiranih frakcij in s tem izboljšalo učinkovitost dela.