-
Ako pripojiť prázdne stĺpce iLOK v systéme Biotage?
-
Rozpúšťa sa funkcionalizovaný oxid kremičitý vo vode?
Nie, oxid kremičitý s uzatvoreným koncom je nerozpustný v akomkoľvek bežne používanom organickom rozpúšťadle.
-
Aké sú body pozornosti pri používaní bleskových stĺpikov C18?
Pre optimálne čistenie s C18 flash kolónami postupujte podľa týchto krokov:
① Prepláchnite kolónu 100 % silného (organického) rozpúšťadla na 10 – 20 CV (objem kolóny), zvyčajne metanolom alebo acetonitrilom.
② Prepláchnite kolónu 50 % silným + 50 % vodným roztokom (ak sú potrebné prísady, pridajte ich) na ďalších 3 – 5 CV.
③ Prepláchnite kolónu počiatočnými podmienkami gradientu na 3 – 5 CV. -
Aký je konektor pre veľké bleskové stĺpy?
Pre veľkosť stĺpca medzi 4g a 330g sa v týchto bleskových stĺpcoch používa štandardný konektor Luer. Pre veľkosť kolóny 800 g, 1 600 g a 3 000 g by sa mali použiť ďalšie konektorové adaptéry na pripevnenie týchto veľkých flash kolón na systém bleskovej chromatografie. Ďalšie podrobnosti nájdete v dokumente Sada adaptéra Santai pre bleskové stĺpce 800 g, 1 600 g, 3 kg.
-
Či sa môže patróna oxidu kremičitého eluovať metanolom alebo nie?
Pre kolónu s normálnou fázou sa odporúča použiť mobilnú fázu, kde pomer metanolu nepresahuje 25 %.
-
Aký je limit pre použitie polárnych rozpúšťadiel ako DMSO, DMF?
Vo všeobecnosti sa odporúča použiť mobilnú fázu, kde pomer polárnych rozpúšťadiel nepresahuje 5 %. Polárne rozpúšťadlá zahŕňajú DMSO, DMF, THF, TEA atď.
-
Riešenia na nakladanie pevných vzoriek?
Nanášanie pevnej vzorky je užitočná technika na nanesenie vzorky, ktorá sa má purifikovať, na kolónu, najmä pre vzorky s nízkou rozpustnosťou. V tomto prípade je flash cartridge iLOK veľmi vhodnou voľbou.
Vo všeobecnosti sa vzorka rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle a adsorbuje sa na pevnom adsorbente, ktorý by mohol byť rovnaký, ako sa používa vo flash kolónach, vrátane kremeliny alebo oxidu kremičitého alebo iných materiálov. Po odstránení/odparení zvyškového rozpúšťadla sa adsorbent umiestni na vrch čiastočne naplnenej kolóny alebo do prázdnej náplňovej patróny. Podrobnejšie informácie nájdete v dokumente Používateľská príručka kazety iLOK-SL, kde nájdete ďalšie podrobnosti. -
Aká je testovacia metóda objemu kolóny pre flash kolónu?
Objem kolóny sa približne rovná mŕtvemu objemu (VM), keď sa ignoruje dodatočný objem v hadičkách spájajúcich kolónu s injektorom a detektorom.
Mŕtvy čas (tM) je čas potrebný na elúciu nezachytenej zložky.
Mŕtvy objem (VM) je objem mobilnej fázy potrebný na elúciu nezachytenej zložky. Mŕtvy objem možno vypočítať podľa nasledujúcej rovnice: VM = F0*tM.
Vo vyššie uvedenej rovnici je F0 prietok mobilnej fázy.
-
Rozpúšťa sa funkcionalizovaný oxid kremičitý v metanole alebo v inom štandardnom organickom rozpúšťadle?
Nie, oxid kremičitý s uzatvoreným koncom je nerozpustný v akomkoľvek bežne používanom organickom rozpúšťadle.
-
Je možné použiť siliku flash kazetu opakovane alebo nie?
Silikónové flash kolóny sú jednorazové a na jedno použitie, ale pri správnej manipulácii je možné náplne oxidu kremičitého znovu použiť bez straty výkonu.
Aby sa kolóna s oxidom kremičitým mohla znovu použiť, musí sa jednoducho vysušiť stlačeným vzduchom alebo prepláchnuť a uskladniť v izopropanole. -
Aké sú vhodné podmienky uchovávania pre flash kazetu C18?
Správne skladovanie umožní opätovné použitie flash kolón C18:
• Nikdy nenechajte kolónu po použití vyschnúť.
• Odstráňte všetky organické modifikátory preplachovaním kolóny 80 % metanolom alebo acetonitrilom vo vode počas 3 – 5 CV.
• Kolónu skladujte vo vyššie uvedenom preplachovacom rozpúšťadle s nasadenými koncovkami. -
Máte otázky týkajúce sa tepelného účinku v predrovnovážnom procese pre bleskové kolóny?
Pri veľkých stĺpcoch nad 220 g je tepelný efekt zrejmý v procese predbežnej rovnováhy. Odporúča sa nastaviť prietok na 50 – 60 % navrhovaného prietoku v predrovnovážnom procese, aby sa predišlo zjavnému tepelnému efektu.
Tepelný účinok zmiešaného rozpúšťadla je zreteľnejší ako jediného rozpúšťadla. Vezmime si ako príklad rozpúšťadlový systém cyklohexán/etylacetát, navrhuje sa použiť 100 % cyklohexán v predrovnovážnom procese. Keď je predbežná rovnováha dokončená, separačný experiment sa môže uskutočniť podľa vopred nastaveného systému rozpúšťadiel.