روئي هوانگ، بو سو
ايپليڪيشن آر اينڊ ڊي سينٽر
تعارف
آئن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي (IEC) هڪ ڪروميٽوگرافڪ طريقو آهي جيڪو عام طور تي مرکبات کي الڳ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي جيڪي حل ۾ آئنڪ فارم ۾ پيش ڪيا ويندا آهن.مٽاسٽا آئنز جي مختلف چارج رياستن جي مطابق، IEC کي ٻن قسمن ۾ ورهائي سگھجي ٿو، ڪيشن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي ۽ آئن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي.ڪيشن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي ۾، تيزابي گروپ الڳ ٿيڻ واري ميڊيا جي مٿاڇري سان ڳنڍيل آهن.مثال طور، سلفونڪ ايسڊ (-SO3H) مضبوط ڪيشن ايڪسچينج (SCX) ۾ عام طور تي استعمال ٿيل گروپ آهي، جيڪو H+ کي الڳ ڪري ٿو ۽ منفي چارج ٿيل گروپ -SO3- اهڙيءَ طرح حل ۾ ٻين ڪيشنن کي جذب ڪري سگهي ٿو.anion جي بدلي ڪروميٽوگرافي ۾، الڪائن گروپن کي الڳ ڪرڻ واري ميڊيا جي مٿاڇري سان ڳنڍيل آهن.مثال طور، quaternary amine (-NR3OH، جتي R هائيڊرو ڪاربن گروپ آهي) عام طور تي مضبوط اينين ايڪسچينج (SAX) ۾ استعمال ٿيندو آهي، جيڪو OH- کي الڳ ڪري ٿو- ۽ مثبت طور تي چارج ٿيل گروپ -N+R3 حل ۾ ٻين اينئنز کي جذب ڪري سگهي ٿو، جنهن جي نتيجي ۾ اينئن پيدا ٿئي ٿي. بدلي جو اثر.
قدرتي شين جي وچ ۾، flavonoids تحقيق ڪندڙن جي ڌيان کي وڌايو آهي ڇاڪاڻ ته انهن جي ڪردار جي روڪٿام ۽ دل جي بيمارين جي علاج ۾.فينولڪ هائيڊروڪسيل گروپن جي موجودگيءَ جي ڪري flavonoid ماليڪيول تيزابي هوندا آهن، تنهن ڪري آئن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي هڪ متبادل آپشن آهي، ان کان علاوه روايتي نارمل فيز يا ريورسڊ فيز ڪروميٽوگرافي انهن تيزابي مرکبن جي الڳ ٿيڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ.فليش ڪروميٽوگرافي ۾، آئن ايڪسچينج لاءِ عام طور تي استعمال ٿيندڙ علحدگيءَ واري ميڊيا سليڪا جيل ميٽرڪس آهي جتي آئن ايڪسچينج گروپس ان جي مٿاڇري سان ڳنڍيل آهن.فليش ڪروميٽوگرافي ۾ سڀ کان عام استعمال ٿيل آئن ايڪسچينج موڊس آهن SCX (عام طور تي سلفونڪ ايسڊ گروپ) ۽ SAX (عام طور تي quaternary amine گروپ).اڳ ۾ شايع ٿيل ايپليڪيشن نوٽ ۾ عنوان سان “The Application of SepaFlash Strong Cation Exchange Chromatography Columns in the Purification of Alkaline Compounds” by Santai Technologies، SCX ڪالمن کي الڪلين مرکبات جي صفائي لاءِ استعمال ڪيو ويو.هن پوسٽ ۾، غير جانبدار ۽ تيزابي معيار جو هڪ مرکب نموني طور استعمال ڪيو ويو ته جيئن تيزابي مرکبات جي صفائي ۾ SAX ڪالمن جي ايپليڪيشن کي ڳولڻ لاء.
تجرباتي سيڪشن
شڪل 1. اسٽيشنري مرحلي جو اسڪيمي ڊراگرام SAX علحدگيء واري ميڊيا جي مٿاڇري سان ڳنڍيل آهي.
هن پوسٽ ۾، هڪ SAX ڪالمن اڳ ۾ ڀريل quaternary amine bonded silica سان استعمال ڪيو ويو (جيئن تصوير 1 ۾ ڏيکاريل آهي).Chromone ۽ 2,4-dihydroxybenzoic acid جو هڪ مرکب نموني طور استعمال ڪيو ويو جنهن کي صاف ڪيو وڃي (جيئن تصوير 2 ۾ ڏيکاريل آهي).مرکب کي ميٿانول ۾ ڦهلايو ويو ۽ فليش ڪارٽريج تي انجيڪٽر ذريعي لوڊ ڪيو ويو.فليش صاف ڪرڻ جو تجرباتي سيٽ اپ ٽيبل 1 ۾ ڏنل آهي.
شڪل 2. نموني جي مرکب ۾ ٻن حصن جي ڪيميائي جوڙجڪ.
| اوزار | SepaBean™ مشين T | |||||
| ڪارٽون | 4 g SepaFlash معياري سيريز فليش ڪارٽريج (غير منظم سليڪا، 40 - 63 μm، 60 Å، آرڊر نمبر: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash بند ٿيل سيريز SAX فليش ڪارٽريج (غير منظم سليڪا، 40 - 63 μm، 60 Å، آرڊر نمبر: SW-5001-004-IR) | ||||
| موج | 254 nm (ساتڻ)، 280 nm (مانيٽرنگ) | |||||
| موبائل مرحلو | محلول A: N-hexane | |||||
| محلول ب: ايٿيل ايڪٽيٽ | ||||||
| وهندڙ اگھ | 30 ايم ايل / منٽ | 20 ايم ايل / منٽ | ||||
| نموني لوڊ ڪرڻ | 20 ملي گرام (جزو A ۽ جزو B جو مرکب) | |||||
| گريجوئيٽ | وقت (CV) | محلول ب (٪) | وقت (CV) | محلول ب (٪) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
نتيجا ۽ بحث
پهرين، نموني جو مرکب هڪ عام مرحلو فليش ڪارٽريج طرفان الڳ ڪيو ويو جيڪو باقاعده سليڪا سان پري ڀريل هو.جيئن ته شڪل 3 ۾ ڏيکاريو ويو آهي، نموني ۾ ٻه حصا هڪ ٻئي کان پوء ڪارٽريج مان نڪتل هئا.اڳيون، نموني جي صفائي لاء SAX فليش ڪارٽريز استعمال ڪيو ويو.جيئن ته شڪل 4 ۾ ڏيکاريو ويو آهي، تيزابي جزو بي مڪمل طور تي SAX ڪارٽريج تي برقرار رکيو ويو.غير جانبدار جزو A کي سست رفتاري سان ڪارٽريج مان خارج ڪيو ويو موبائل مرحلي جي خاتمي سان.
شڪل 3. نموني جو فليش ڪروميٽگرام باقاعده عام مرحلو ڪارٽريج تي.
شڪل 4. SAX ڪارٽريج تي نموني جو فليش ڪروميٽوگرام.
شڪل 3 ۽ شڪل 4 جي مقابلي ۾، اجزاء A ۾ ٻن مختلف فليش ڪارٽريز تي غير مطابقت واري چوٽي جي شڪل آھي.تصديق ڪرڻ لاءِ ته ڇا ايليوشن جي چوٽي جزو سان مطابقت رکي ٿي، اسان استعمال ڪري سگهون ٿا مڪمل واه جي ڊيگهه اسڪيننگ خاصيت جيڪا SepaBean™ مشين جي ڪنٽرول سافٽ ويئر ۾ ٺهيل آهي.ٻن علحدگيءَ جي تجرباتي ڊيٽا کي کوليو، ڪروميٽوگرام ۾ وقت جي محور (CV) تي اشاري واري لڪير ڏانھن ڇڪيو سڀ کان مٿاھين نقطي تائين ۽ ٻيو بلند ترين نقطو ايليوشن چوٽي جو جزو A سان ملندڙ جلندڙ آھي، ۽ انھن ٻنھي جو پورو ويج لينٿ اسپيڪٽرم. پوائنٽس خود بخود ڪروميٽگرام هيٺ ڏيکاريا ويندا (جيئن تصوير 5 ۽ شڪل 6 ۾ ڏيکاريل آهي).انهن ٻن علحدگيءَ جي مڪمل موج جي ڊيگهه واري اسپيڪٽرم ڊيٽا جي مقابلي ۾، جزو A کي ٻن تجربن ۾ مسلسل جذب اسپيڪٽرم آهي.جزو A جي ٻن مختلف فليش ڪارٽريز تي غير مطابقت واري چوٽي جي شڪل جي سبب، اهو اندازو لڳايو ويو آهي ته اجزاء A ۾ مخصوص نجاست آهي جيڪا عام فيز ڪارٽريج ۽ SAX ڪارٽريج تي مختلف برقرار رکي ٿي.تنهن ڪري، ايليوٽنگ تسلسل جزو A لاءِ مختلف آهي ۽ انهن ٻن فليش ڪارٽريز تي نجاست، جنهن جي نتيجي ۾ ڪروميٽوگرامس تي غير مطابقت واري چوٽي جي شڪل آهي.
شڪل 5. جزو A جو پورو ويج ڊگھائي اسپيڪٽرم ۽ ناپاڪيءَ کي نارمل فيز ڪارٽريج کان ڌار ڪيو ويو آهي.
شڪل 6. جزو A جو پورو طول موج اسپيڪٽرم ۽ SAX ڪارٽريج کان ڌار ڪيل نجاست.
جيڪڏهن ٽارگيٽ پراڊڪٽ گڏ ڪيو وڃي ته غير جانبدار جزو A آهي، صاف ڪرڻ جو ڪم آساني سان مڪمل ڪري سگهجي ٿو سڌو سنئون SAX ڪارٽريج کي استعمال ڪندي ايليوشن لاءِ نموني لوڊ ڪرڻ کان پوءِ.ٻئي طرف، جيڪڏهن گڏ ڪرڻ جو ٽارگيٽ پراڊڪٽ تيزابي جزو B آهي، ته قبضي ڇڏڻ جو طريقو تجرباتي مرحلن ۾ صرف ٿوري ترتيب سان اختيار ڪري سگهجي ٿو: جڏهن نموني کي SAX ڪارٽريج تي لوڊ ڪيو ويو ۽ غير جانبدار جزو A. مڪمل طور تي عام فيز آرگنڪ سولوينٽس سان ختم ڪيو ويو، موبائيل فيز کي ميٿانول حل ۾ تبديل ڪريو جنهن ۾ 5٪ ايڪٽڪ ايسڊ شامل آهن.موبائيل مرحلي ۾ ايڪٽيٽ آئنز SAX ڪارٽريج جي اسٽيشنري مرحلي تي quaternary amine آئن گروپن کي پابند ڪرڻ لاءِ Component B سان مقابلو ڪندا، ان ڪري ڪارٽريج مان جزو B کي خارج ڪري ٽارگيٽ پراڊڪٽ حاصل ڪرڻ لاءِ.آئن ايڪسچينج موڊ ۾ الڳ ٿيل نموني جو ڪروميٽگرام شڪل 7 ۾ ڏيکاريو ويو.
شڪل 7. حصو B جو فليش ڪروميٽگرام SAX ڪارٽريج تي آئن ايڪسچينج موڊ ۾ ختم ٿي ويو آهي.
نتيجي ۾، تيزابي يا غير جانبدار نموني تيزيءَ سان SAX ڪارٽريج ذريعي صاف ڪري سگھجن ٿا، عام فيز ڪارٽريج سان گڏ مختلف صاف ڪرڻ واري حڪمت عملين کي استعمال ڪندي.ان کان علاوه، SepaBean™ مشين جي ڪنٽرول سافٽ ويئر ۾ ٺاهيل مڪمل ويج لينگٿ اسڪيننگ فيچر جي مدد سان، خارج ٿيل جزن جي خاصيت جذب ڪرڻ واري اسپيڪٽرم کي آساني سان مقابلو ۽ تصديق ڪري سگهجي ٿو، تحقيق ڪندڙن کي مدد ڪري ٿي ته جلدي جزن جي ٺهڻ ۽ پاڪائي کي طئي ڪرڻ ۾ ۽ اهڙيءَ طرح بهتر. ڪم ڪارڪردگي.
| شيون نمبر | ڪالمن جي ماپ | وهندڙ اگھ (ايم ايل/منٽ) | وڌ ۾ وڌ دٻاءُ (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | 5.9 جي | 10-20 | 400/27.5 |
| SW-5001-012-IR | 23 جي | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-025-IR | 38 جي | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5001-040-IR | 55 جي | 20-40 | 400/27.5 |
| SW-5001-080-IR | 122 جي | 30-60 | 350/24.0 |
| SW-5001-120-IR | 180 جي | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5001-220-IR | 340 جي | 50-100 | 300/20.7 |
| SW-5001-330-IR | 475 جي | 50-100 | 250/17.2
|
ٽيبل 2. SepaFlash بند ٿيل سيريز SAX فليش ڪارٽريز.پيڪنگ مواد: الٽرا خالص غير منظم SAX-bonded سليڪا، 40 - 63 μm، 60 Å.
SepaBean™ جي تفصيلي وضاحتن تي وڌيڪ معلومات لاءمشين، يا SepaFlash سيريز فليش ڪارٽريز تي آرڊر جي معلومات، مهرباني ڪري اسان جي ويب سائيٽ تي وڃو.
پوسٽ جو وقت: نومبر-09-2018