Применение сильных анионовых хроматографических колонн Sepaflash в очистке кислых соединений

Результаты и обсуждение

Во-первых, образца смесь отделяли нормальным фазовым картриджем флэш-картриджа с обычным кремнеземом. Как показано на рисунке 3, два компонента в образце были элюированы с картриджа один за другим. Затем был использован картридж Sax Flash для очистки образца. Как показано на рисунке 4, кислый компонент B был полностью сохранен на картридже сакс. Нейтральный компонент А постепенно элюировали с картриджа с элюированием мобильной фазы.

Рисунок 3. Флэш -хроматограмма образца на обычном нормальном фазовом картридже.

Рисунок 4. Флэш -хроматограмма образца на саксофонаре.
Сравнивая рисунок 3 и рисунок 4, компонент A имеет непоследовательную пиковую форму на двух разных картриджах Flash. Чтобы подтвердить, соответствует ли пик элюирования компоненту, мы можем использовать полную функцию сканирования длины волны, которая встроена в программное обеспечение управления машиной Sepabean ™. Откройте экспериментальные данные двух разделения, перетащите линию индикатора по оси времени (CV) в хроматограмме до самой высокой точки, а вторая по величине точка пика элюирования, соответствующая компоненту A, и спектр полной длины волны будет автоматически показан ниже хроматограммы (как показано на рисунке 5 и на рисунке 6). Сравнивая данные спектра полной длины волны этих двух разделений, компонент A имеет последовательный спектр поглощения в двух экспериментах. По причине компонента A есть непоследовательная пиковая форма на двух разных картриджах вспышки, предполагается, что в компоненте A существует особая примеси, которая имеет различное удержание на нормальном фазовом картридже и саксом. Следовательно, элюирующая последовательность отличается для компонента А и примеси на этих двух флэш -картриджах, что приводит к непоследовательной пиковой форме на хроматограммах.

Рисунок 5. Спектр полной длины волны компонента А и примеси, разделенной нормальным фазовым картриджем.

Рисунок 6. Спектр полной длины волны компонента А и примеси, разделенной саксофонарным картриджем.

Если целевой продукт, который должен быть собран, является нейтральным компонентом A, задача очистки может быть легко завершена, непосредственно используя картридж Sax для элюирования после нагрузки на образцы. С другой стороны, если целевой продукт, который должен быть собран, является кислым компонентом B, можно было бы применять лишь небольшую корректировку на экспериментальных этапах: когда образец загружали на картридж SAX, а нейтральный компонент A полностью выдвинут с нормальной фазой органической растворители, переключайте подвижной фазу на раствор метанола, содержащий 5% актуальную кислоту. Ионы ацетата в подвижной фазе будут конкурировать с компонентом B за связывание с ионными группами четвертичного амина на стационарной фазе картриджа Sax, тем самым элюируя компонент B из картриджа для получения целевого продукта. Хроматограмма образца, разделенная в режиме ионного обмена, была показана на рисунке 7.

Рисунок 7. Флэш -хроматограмма компонента, элюированной в режиме ионного обмена на саксофонаре.

В заключение, кислый или нейтральный образец может быть быстро очищен с помощью саксофона для картриджа в сочетании с нормальным фазовым картриджем с использованием различных стратегий очистки. Кроме того, с помощью полной функции сканирования длины волны, встроенной в управляющее программное обеспечение машины Sepabean ™, характерный спектр поглощения элюированных фракций можно легко сравнить и подтвердить, помогая исследователям быстро определить состав и чистоту элюированных фракций и, таким образом, повысить эффективность работы.