Aplicarea coloanelor de cromatografie de schimb de anioni sepaflash în purificarea compușilor acide

Rezultate și discuții

În primul rând, amestecul de probă a fost separat printr-un cartuș cu fază normală pre-ambalat cu silice obișnuit. Așa cum se arată în figura 3, cele două componente din eșantion au fost eluate din cartuș unul după altul. În continuare, a fost utilizat un cartuș de sax Flash pentru purificarea eșantionului. Așa cum se arată în figura 4, componenta acidă B a fost complet păstrată pe cartușul sax. Componenta neutră A a fost eluată treptat din cartuș cu eluția fazei mobile.

Figura 3. Cromatograma flash a eșantionului pe un cartuș cu fază normală obișnuită.

Figura 4. Cromatograma flash a eșantionului pe un cartuș de sax.
Comparând figura 3 și figura 4, componenta A are o formă de vârf inconsistentă pe cele două cartușe flash diferite. Pentru a confirma dacă vârful de eluție corespunde componentei, putem utiliza caracteristica completă de scanare a lungimii de undă care este încorporată în software -ul de control al mașinii Sepabean ™. Deschideți datele experimentale ale celor două separații, trageți la linia indicatorului pe axa de timp (CV) din cromatogramă până la punctul cel mai înalt și al doilea punct cel mai înalt al vârfului de eluție corespunzător componentei A, iar spectrul complet de lungime de undă a acestor două puncte va fi prezentat automat sub cromatogramă (așa cum se arată în figura 5 și figura 6). Comparând datele spectrului de lungime de undă completă a acestor două separații, componenta A are un spectru constant de absorbție în două experimente. Din motivul componentei A are o formă de vârf inconsistentă pe două cartușe flash diferite, se speculează că există o impuritate specifică în componenta A care are o retenție diferită pe cartușul de fază normală și cartușul sax. Prin urmare, secvența de eluare este diferită pentru componenta A și impuritatea pe aceste două cartușe flash, rezultând o formă de vârf inconsistentă pe cromatograme.

Figura 5. Spectrul complet al lungimii de undă a componentei A și impuritatea separată prin cartușul de fază normală.

Figura 6. Spectrul complet al lungimii de undă a componentei A și impuritatea separată de cartușul sax.

Dacă produsul țintă care trebuie colectat este componenta neutră A, sarcina de purificare poate fi finalizată cu ușurință folosind direct cartușul sax pentru eluție după încărcarea eșantionului. Pe de altă parte, dacă produsul țintă care trebuie colectat este componenta acidă B, modul de eliberare de captare ar putea fi adoptat doar cu o ușoară ajustare în etapele experimentale: când proba a fost încărcată pe cartușul SAX și componenta neutră A a fost complet eluată cu solvenți organici în fază normală, comutați faza mobilă în soluția de metanol care conține 5% acid acetic acetic. Ionii de acetat în faza mobilă vor concura cu componenta B pentru legarea la grupurile ionice de amină cuaternară în faza staționară a cartușului sax, eluând astfel componenta B din cartuș pentru a obține produsul țintă. Cromatograma eșantionului separat în modul de schimb ionic a fost prezentată în figura 7.

Figura 7. Cromatograma flash a componentei B eluate în modul de schimb de ioni pe un cartuș de sax.

În concluzie, proba acidă sau neutră ar putea fi purificată rapid de cartușul sax combinat cu cartușul de fază normală, folosind diferite strategii de purificare. Mai mult, cu ajutorul caracteristicii complete de scanare a lungimii de undă încorporate în software -ul de control al mașinii Sepabean ™, spectrul caracteristic de absorbție a fracțiilor eluate ar putea fi ușor comparat și confirmat, ajutând cercetătorii să determine rapid compoziția și puritatea fracțiilor eluate și, astfel, să îmbunătățească eficiența muncii.