A aplicação de colunas de cromatografia de troca de ânion sepaflash na purificação de compostos ácidos

Resultados e discussão

Em primeiro lugar, a mistura de amostra foi separada por um cartucho flash de fase normal pré-embalado com sílica comum. Como mostra a Figura 3, os dois componentes da amostra foram eluídos do cartucho um após o outro. Em seguida, um cartucho flash sax foi utilizado para a purificação da amostra. Como mostra a Figura 4, o componente ácido B foi completamente retido no cartucho sax. O componente neutro A foi gradualmente eluído do cartucho com a eluição da fase móvel.

Figura 3. O cromatograma flash da amostra em um cartucho de fase normal regular.

Figura 4. O cromatograma flash da amostra em um cartucho sax.
Comparando a Figura 3 e a Figura 4, o componente A possui forma de pico inconsistente nos dois cartuchos flash diferentes. Para confirmar se o pico de eluição é correspondente ao componente, podemos utilizar o recurso de varredura de comprimento de onda completo, que está incorporado ao software de controle da máquina Sepabean ™. Abra os dados experimentais das duas separações, arraste para a linha indicadora no eixo do tempo (CV) no cromatograma para o ponto mais alto e o segundo ponto mais alto do pico de eluição correspondente ao componente A, e o espectro de comprimento de onda completo desses dois pontos será mostrado automaticamente abaixo do cromatograma (como mostrado na Figura 5 e Figura 6). Comparando os dados completos do espectro do comprimento de onda dessas duas separações, o componente A possui espectro de absorção consistente em duas experiências. Pelo motivo do componente A possui uma forma de pico inconsistente em dois cartuchos flash diferentes, especula -se que exista uma impureza específica no componente A, que possui retenção diferente no cartucho de fase normal e no cartucho sax. Portanto, a sequência de eluição é diferente para o componente A e a impureza nesses dois cartuchos flash, resultando em forma de pico inconsistente nos cromatogramas.

Figura 5. O espectro de comprimento de onda completo do componente A e a impureza separada pelo cartucho de fase normal.

Figura 6. O espectro de comprimento de onda completo do componente A e a impureza separada pelo cartucho sax.

Se o produto de destino a ser coletado for o componente neutro A, a tarefa de purificação poderá ser facilmente concluída usando diretamente o cartucho sax para eluição após o carregamento da amostra. Por outro lado, se o produto alvo a ser coletado for o componente ácido B, a maneira de liberação de captura poderá ser adotada com apenas um ligeiro ajuste nas etapas experimentais: quando a amostra foi carregada no cartucho sax e o componente neutro A foi completamente eluído com solventes orgânicos de fase normal, trocam a fase móvel para a solução de metanol contendo 5% de acidros acidentes. Os íons acetato na fase móvel competirão com o componente B pela ligação aos grupos de íons amina quaternário na fase estacionária do cartucho sax, eluindo assim o componente B do cartucho para obter o produto alvo. O cromatograma da amostra separado no modo de troca iônica foi mostrado na Figura 7.

Figura 7. O cromatograma flash do componente B eluído no modo de troca iônica em um cartucho sax.

Em conclusão, a amostra ácida ou neutra pode ser rapidamente purificada pelo cartucho sax, combinado com o cartucho de fase normal, utilizando diferentes estratégias de purificação. Além disso, com a ajuda do recurso de varredura de comprimento de onda completo incorporado ao software de controle da máquina Sepabean ™, o espectro característico de absorção das frações eluídas pode ser facilmente comparado e confirmado, ajudando os pesquisadores a determinar rapidamente a composição e a pureza das frações eluídas e, assim, melhorar a eficiência do trabalho.