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Perguntas frequentes

  • Como conectar colunas iLOK vazias no sistema Biotage?

  • A sílica funcionalizada se dissolve em água?

    Não, a sílica com tampa terminal é insolúvel em qualquer solvente orgânico comumente usado.

  • Quais são os pontos de atenção ao usar colunas flash C18?

    Para uma purificação ideal com colunas flash C18, siga estas etapas:
    ① Lave a coluna com 100% de solvente forte (orgânico) por 10 – 20 CVs (volume da coluna), normalmente metanol ou acetonitrila.
    ② Lave a coluna com 50% forte + 50% aquoso (se forem necessários aditivos, inclua-os) por mais 3 – 5 CVs.
    ③ Lave a coluna com as condições iniciais de gradiente para 3 – 5 CVs.

  • Qual é o conector para grandes colunas flash?

    Para tamanhos de coluna entre 4g e 330g, o conector Luer padrão é usado nessas colunas flash. Para tamanhos de coluna de 800g, 1600g e 3000g, adaptadores de conector adicionais devem ser usados ​​para montar essas grandes colunas flash no sistema de cromatografia flash. Consulte o documento Kit adaptador Santai para colunas Flash de 800g, 1600g, 3kg para obter mais detalhes.

  • Se o cartucho de sílica pode ser eluído com metanol ou não?

    Para coluna de fase normal, recomenda-se utilizar a fase móvel onde a proporção de metanol não ultrapasse 25%.

  • Qual é o limite para usar solventes polares como DMSO, DMF?

    Geralmente, recomenda-se utilizar a fase móvel onde a proporção dos solventes polares não exceda 5%. Os solventes polares incluem DMSO, DMF, THF, TEA etc.

  • Soluções para carregamento de amostras sólidas?

    O carregamento de amostras sólidas é uma técnica útil para carregar a amostra a ser purificada em uma coluna, especialmente para amostras de baixa solubilidade. Neste caso, o cartucho flash iLOK é uma escolha muito adequada.
    Geralmente, a amostra é dissolvida num solvente adequado e adsorvida num adsorvente sólido que pode ser o mesmo utilizado em colunas flash, incluindo terras diatomáceas ou sílica ou outros materiais. Após a remoção/evaporação do solvente residual, o adsorvente é colocado no topo de uma coluna parcialmente cheia ou em um cartucho vazio de carregamento de sólidos. Para obter informações mais detalhadas, consulte o documento Guia do usuário do cartucho iLOK-SL para obter mais detalhes.

  • Qual é o método de teste do volume da coluna para a coluna flash?

    O volume da coluna é aproximadamente igual ao volume morto (VM) ao ignorar o volume adicional nas tubulações que conectam a coluna ao injetor e ao detector.

    O tempo morto (tM) é o tempo necessário para a eluição de um componente não retido.

    O volume morto (VM) é o volume da fase móvel necessário para a eluição de um componente não retido. O volume morto pode ser calculado pela seguinte equação:VM =F0*tM.

    Dentre as equações acima, F0 é a vazão da fase móvel.

  • A sílica funcionalizada se dissolve em metanol ou em qualquer outro solvente orgânico padrão?

    Não, a sílica com tampa terminal é insolúvel em qualquer solvente orgânico comumente usado.

  • Se o cartucho flash de sílica pode ser usado repetidamente ou não?

    As colunas flash de sílica são descartáveis ​​e de uso único, mas com manuseio adequado, os cartuchos de sílica podem ser reutilizados sem sacrificar o desempenho.
    Para ser reutilizada, a coluna flash de sílica precisa simplesmente ser seca com ar comprimido ou lavada e armazenada em isopropanol.

  • Quais são as condições de preservação adequadas para o cartucho flash C18?

    O armazenamento adequado permitirá que as colunas flash C18 sejam reutilizadas:
    • Nunca deixe a coluna secar após o uso.
    • Remova todos os modificadores orgânicos lavando a coluna com metanol a 80% ou acetonitrila em água por 3 a 5 CVs.
    • Armazene a coluna no solvente de lavagem mencionado acima com as extremidades instaladas.

  • Dúvidas sobre o efeito térmico no processo de pré-equilíbrio para colunas flash?

    Para colunas de grande porte acima de 220g, o efeito térmico é óbvio no processo de pré-equilíbrio. Recomenda-se definir a vazão em 50-60% da vazão sugerida no processo de pré-equilíbrio para evitar efeitos térmicos óbvios.

    O efeito térmico do solvente misto é mais óbvio do que o solvente único. Tomemos como exemplo o sistema solvente ciclohexano/acetato de etila, sugere-se usar 100% de ciclohexano no processo de pré-equilíbrio. Quando o pré-equilíbrio estiver concluído, o experimento de separação poderá ser realizado de acordo com o sistema de solventes predefinido.

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