ਰੁਈ ਹੁਆਂਗ, ਬੋ ਜ਼ੂ
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਆਰ ਐਂਡ ਡੀ ਸੈਂਟਰ
ਜਾਣ-ਪਛਾਣ
ਇੱਕ ਪੇਪਟਾਇਡ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡਾਂ ਦਾ ਬਣਿਆ ਇੱਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਹਰ ਇੱਕ ਵਿੱਚ ਵਿਲੱਖਣ ਭੌਤਿਕ ਅਤੇ ਰਸਾਇਣਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿਉਂਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਅਤੇ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਦੇ ਤਰਤੀਬ ਨੂੰ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਠੋਸ ਪੜਾਅ ਦੇ ਰਸਾਇਣਕ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਨਾਲ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਰਗਰਮ ਪੇਪਟਾਇਡਾਂ ਦੇ ਰਸਾਇਣਕ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਬਹੁਤ ਤਰੱਕੀ ਕੀਤੀ ਹੈ.ਹਾਲਾਂਕਿ, ਠੋਸ ਪੜਾਅ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਪੇਪਟਾਇਡ ਦੀ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਰਚਨਾ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਅੰਤਿਮ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਭਰੋਸੇਮੰਦ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਲਈ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਦੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚ ਆਇਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (ਆਈਈਸੀ) ਅਤੇ ਰਿਵਰਸਡ-ਫੇਜ਼ ਹਾਈ ਪਰਫਾਰਮੈਂਸ ਲਿਕਵਿਡ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ (ਆਰਪੀ-ਐਚਪੀਐਲਸੀ) ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਨਮੂਨਾ ਲੋਡ ਕਰਨ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ, ਵਿਭਾਜਨ ਮੀਡੀਆ ਦੀ ਉੱਚ ਕੀਮਤ, ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਅਤੇ ਮਹਿੰਗੇ ਵੱਖ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਉਪਕਰਣ, ਆਦਿ। ਛੋਟੇ ਅਣੂ ਪੈਪਟਾਇਡਸ (MW <1 kDa) ਦੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਲਈ, ਇੱਕ ਸਫਲ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਕੇਸ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਂਤਾਈ ਟੈਕਨੋਲੋਜੀਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ SepaFlash RP C18 ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ ਦੀ ਵਰਤੋਂ thymopentin (TP-5) ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਅਤੇ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ ਟੀਚਾ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ.
ਚਿੱਤਰ 1. 20 ਆਮ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ (www.bachem.com ਤੋਂ ਦੁਬਾਰਾ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ)।
ਇੱਥੇ 20 ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਪੇਪਟਾਇਡਸ ਦੀ ਰਚਨਾ ਵਿੱਚ ਆਮ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਇਹਨਾਂ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡਾਂ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਧਰੁਵੀਤਾ ਅਤੇ ਐਸਿਡ-ਬੇਸ ਸੰਪੱਤੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ: ਗੈਰ-ਧਰੁਵੀ (ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ), ਪੋਲਰ (ਅਨਚਾਰਜਡ), ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਜਾਂ ਬੁਨਿਆਦੀ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ)।ਇੱਕ ਪੇਪਟਾਇਡ ਕ੍ਰਮ ਵਿੱਚ, ਜੇਕਰ ਤਰਤੀਬ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲੇ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਜਿਆਦਾਤਰ ਧਰੁਵੀ ਹਨ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 1 ਵਿੱਚ ਗੁਲਾਬੀ ਰੰਗ ਵਿੱਚ ਚਿੰਨ੍ਹਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ), ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਿਸਟੀਨ, ਗਲੂਟਾਮਾਈਨ, ਐਸਪੈਰਾਜੀਨ, ਸੇਰੀਨ, ਥ੍ਰੋਨਾਇਨ, ਟਾਇਰੋਸਾਈਨ, ਆਦਿ, ਤਾਂ ਇਹ ਪੈਪਟਾਇਡ ਇੱਕ ਮਜ਼ਬੂਤ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਧਰੁਵੀਤਾ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਹੋਣਾ।ਰਿਵਰਸਡ-ਫੇਜ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਇਹਨਾਂ ਮਜ਼ਬੂਤ ਪੋਲਰ ਪੈਪਟਾਇਡ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਪੜਾਅ ਢਹਿਣ ਦੀ ਇੱਕ ਘਟਨਾ ਵਾਪਰੇਗੀ (ਸੈਂਟਾਈ ਟੈਕਨੋਲੋਜੀਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਪਹਿਲਾਂ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਨੋਟ ਵੇਖੋ: ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਫੇਜ਼ ਕਲੈਪਸ, ਏਕਿਊ ਰਿਵਰਸਡ ਫੇਜ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਦ)।ਨਿਯਮਤ C18 ਕਾਲਮਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, ਸੁਧਾਰੇ ਹੋਏ C18AQ ਕਾਲਮ ਮਜ਼ਬੂਤ ਪੋਲਰ ਜਾਂ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫਿਲਿਕ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਢੁਕਵੇਂ ਹਨ।ਇਸ ਪੋਸਟ ਵਿੱਚ, ਇੱਕ ਮਜ਼ਬੂਤ ਪੋਲਰ ਪੇਪਟਾਇਡ ਨੂੰ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇੱਕ C18AQ ਕਾਲਮ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਟੀਚਾ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਖੋਜ ਅਤੇ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
| ਸਾਧਨ | ਸੇਪਾਬੀਨ™ਮਸ਼ੀਨ 2 | |||
| ਕਾਰਤੂਸ | 12 g SepaFlash C18 RP ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ (ਗੋਲਾਕਾਰ ਸਿਲਿਕਾ, 20 - 45 μm, 100 Å, ਆਰਡਰ ਨੰਬਰ：SW-5222-012-SP) | 12 g SepaFlash C18AQ RP ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ (ਗੋਲਾਕਾਰ ਸਿਲਿਕਾ, 20 - 45 μm, 100 Å, ਆਰਡਰ ਨੰਬਰ：SW-5222-012-SP(AQ)) | ||
| ਤਰੰਗ ਲੰਬਾਈ | 254 nm, 220 nm | 214 ਐੱਨ.ਐੱਮ | ||
| ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ | ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਏ: ਪਾਣੀ ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਬੀ: ਐਸੀਟੋਨਿਟ੍ਰਾਇਲ | |||
| ਵਹਾਅ ਦੀ ਦਰ | 15 ਮਿ.ਲੀ./ਮਿੰਟ | 20 ਮਿ.ਲੀ./ਮਿੰਟ | ||
| ਨਮੂਨਾ ਲੋਡਿੰਗ | 30 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ | |||
| ਢਾਲ | ਸਮਾਂ (CV) | ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਬੀ (%) | ਸਮਾਂ (ਮਿੰਟ) | ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਬੀ (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
ਨਤੀਜੇ ਅਤੇ ਚਰਚਾ
ਨਿਯਮਤ C18 ਕਾਲਮ ਅਤੇ C18AQ ਕਾਲਮ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਪੋਲਰ ਪੇਪਟਾਇਡ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਕਰਨ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਫਲੈਸ਼ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਨਿਯਮਤ C18 ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਉੱਚ ਜਲਮਈ ਅਨੁਪਾਤ ਦੇ ਕਾਰਨ C18 ਚੇਨਾਂ ਦੇ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਪੜਾਅ ਦੇ ਢਹਿ ਜਾਣ ਕਾਰਨ, ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਨਿਯਮਤ C18 ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ 'ਤੇ ਮੁਸ਼ਕਿਲ ਨਾਲ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਦੁਆਰਾ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਾਹਰ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਵੱਖ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਚਿੱਤਰ 2. ਨਿਯਮਤ C18 ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ 'ਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦਾ ਫਲੈਸ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਮ।
ਅੱਗੇ, ਅਸੀਂ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਫਲੈਸ਼ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ C18AQ ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 3 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਪੈਪਟਾਇਡ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕਾਲਮ ਉੱਤੇ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਫਿਰ ਬਾਹਰ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਟੀਚਾ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਕੱਚੇ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਲਾਈਓਫਿਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਫਿਰ HPLC ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਸ਼ੁੱਧ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ 98.2% ਹੈ ਅਤੇ ਅਗਲੇ ਪੜਾਅ ਦੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਵਿਕਾਸ ਲਈ ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਚਿੱਤਰ 3. ਇੱਕ C18AQ ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ ਉੱਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦਾ ਫਲੈਸ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗਰਾਮ।
ਸਿੱਟੇ ਵਜੋਂ, SepaFlash C18AQ RP ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਟ੍ਰੀਜ ਫਲੈਸ਼ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਸਿਸਟਮ SepaBean ਨਾਲ ਮਿਲਾ ਕੇ™ਮਸ਼ੀਨ ਮਜ਼ਬੂਤ ਪੋਲਰ ਜਾਂ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫਿਲਿਕ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਲਈ ਇੱਕ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਹੱਲ ਪੇਸ਼ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ.
ਸੈਂਟਾਈ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਟੇਬਲ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ) ਤੋਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਵਾਲੇ SepaFlash C18AQ RP ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਤੂਸ ਦੀ ਇੱਕ ਲੜੀ ਹੈ।
| ਆਈਟਮ ਨੰਬਰ | ਕਾਲਮ ਦਾ ਆਕਾਰ | ਵਹਾਅ ਦੀ ਦਰ (ਮਿਲੀ./ਮਿੰਟ) | ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਦਬਾਅ (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 ਜੀ | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 ਗ੍ਰਾਮ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 ਜੀ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 ਜੀ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 ਜੀ | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 ਜੀ | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 ਗ੍ਰਾਮ | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 ਗ੍ਰਾਮ | 40-80 | 250/17.2 |
ਸਾਰਣੀ 2. SepaFlash C18AQ RP ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਤੂਸ।ਪੈਕਿੰਗ ਸਮੱਗਰੀ: ਉੱਚ-ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਗੋਲਾਕਾਰ C18(AQ)-ਬੈਂਡਡ ਸਿਲਿਕਾ, 20 - 45 μm, 100 Å.
SepaBean™ ਮਸ਼ੀਨ ਦੀਆਂ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਬਾਰੇ ਹੋਰ ਜਾਣਕਾਰੀ ਲਈ, ਜਾਂ SepaFlash ਸੀਰੀਜ਼ ਫਲੈਸ਼ ਕਾਰਤੂਸ 'ਤੇ ਆਰਡਰਿੰਗ ਜਾਣਕਾਰੀ ਲਈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਸਾਡੀ ਵੈੱਬਸਾਈਟ 'ਤੇ ਜਾਓ।
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਅਕਤੂਬਰ-12-2018