ରୁଇ ହୁଆଙ୍ଗ, ବୋ ଜୁ
ପ୍ରୟୋଗ R&D କେନ୍ଦ୍ର |
ପରିଚୟ
ଏକ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ହେଉଛି ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଗଠିତ ଏକ ଯ ound ଗିକ, ଯାହାର ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଏବଂ ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡ଼ିକର କ୍ରମ କାରଣରୁ ଏହାର ଅନନ୍ୟ ଶାରୀରିକ ଏବଂ ରାସାୟନିକ ଗୁଣ ରହିଛି |କଠିନ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ରାସାୟନିକ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ର ବିକାଶ ସହିତ ବିଭିନ୍ନ ସକ୍ରିୟ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ସର ରାସାୟନିକ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ବହୁତ ଅଗ୍ରଗତି କରିଛି |ଅବଶ୍ୟ, କଠିନ ଚରଣ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ର ଜଟିଳ ରଚନା ହେତୁ, ଅନ୍ତିମ ଉତ୍ପାଦକୁ ନିର୍ଭରଯୋଗ୍ୟ ପୃଥକ ପ୍ରଣାଳୀ ଦ୍ୱାରା ଶୁଦ୍ଧ କରାଯିବା ଉଚିତ |ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ପାଇଁ ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ଶୁଦ୍ଧକରଣ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକରେ ଆୟନ ବିନିମୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (IEC) ଏବଂ ରିଭର୍ସ-ଫେଜ୍ ଉଚ୍ଚ କ୍ଷମତା ସମ୍ପନ୍ନ ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (RP-HPLC) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ, ଯେଉଁଥିରେ କମ୍ ନମୁନା ଲୋଡିଂ କ୍ଷମତା, ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ମିଡିଆର ଅଧିକ ମୂଲ୍ୟ, ଜଟିଳ ଏବଂ ବ୍ୟୟବହୁଳ ପୃଥକ ଉପକରଣ, ଛୋଟ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକର ପେପ୍ଟାଇଡସ୍ (MW <1 kDa) ର ଶୀଘ୍ର ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ, ସାଣ୍ଟାଇ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଦ୍ୱାରା ଏକ ସଫଳ ପ୍ରୟୋଗ ମାମଲା ପ୍ରକାଶିତ ହୋଇଥିଲା, ଯେଉଁଥିରେ ଥାଇମୋପେଣ୍ଟିନ୍ (TP-5) ର ଶୀଘ୍ର ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ଏକ SepaFlash RP C18 କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | ଆବଶ୍ୟକତା ପୂରଣ କରୁଥିବା ଲକ୍ଷ୍ୟ ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରାପ୍ତ ହେଲା |
ଚିତ୍ର 1. 20 ସାଧାରଣ ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ (www.bachem.com ରୁ ପୁନ oduc ପ୍ରକାଶିତ) |
ସେଠାରେ 20 ପ୍ରକାରର ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଅଛି ଯାହା ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଗଠନରେ ସାଧାରଣ ଅଟେ |ଏହି ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର ପୋଲାରାଇଟି ଏବଂ ଏସିଡ୍-ବେସ୍ ସମ୍ପତ୍ତି ଅନୁଯାୟୀ ନିମ୍ନ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇପାରେ: ଅଣ-ପୋଲାର (ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍), ପୋଲାର (ଚାର୍ଜ ହୋଇନଥିବା), ଅମ୍ଳୀୟ କିମ୍ବା ମ basic ଳିକ (ଚିତ୍ର 1 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି) |ଏକ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ କ୍ରମରେ, ଯଦି ଏହି କ୍ରମ ଗଠନ କରୁଥିବା ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଗୁଡିକ ଅଧିକାଂଶ ପୋଲାର୍ (ଚିତ୍ର 1 ରେ ଗୋଲାପୀ ରଙ୍ଗରେ ଚିହ୍ନିତ), ଯେପରିକି ସିଷ୍ଟାଇନ୍, ଗ୍ଲୁଟାମାଇନ୍, ଆସପାରାଗାଇନ୍, ସେରିନ୍, ଥ୍ରୋନାଇନ୍, ଟାଇରୋସିନ୍ ଇତ୍ୟାଦି, ତେବେ ଏହି ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଏକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ହୋଇପାରେ | ପୋଲାରାଇଟି ଏବଂ ପାଣିରେ ଅତ୍ୟଧିକ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୁଅ |ଓଲଟା ଫେଜ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଦ୍ these ାରା ଏହି ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପୋଲାର ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ନମୁନାଗୁଡିକ ପାଇଁ ଶୁଦ୍ଧକରଣ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମୟରେ, ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଫେଜ୍ ପତନ ନାମକ ଏକ ଘଟଣା ଘଟିବ (ସାଣ୍ଟାଇ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଦ୍ by ାରା ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରକାଶିତ ଆବେଦନ ନୋଟକୁ ଦେଖନ୍ତୁ: ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଫେଜ୍ କ୍ଲାସ୍, AQ ରିଭର୍ସଡ୍ ଫେଜ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ସେଗୁଡିକର ପ୍ରୟୋଗ) |ନିୟମିତ C18 ସ୍ତମ୍ଭ ତୁଳନାରେ, ଉନ୍ନତ C18AQ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡ଼ିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପୋଲାର କିମ୍ବା ହାଇଡ୍ରୋଫିଲିକ୍ ନମୁନାଗୁଡିକର ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ସବୁଠାରୁ ଉପଯୁକ୍ତ |ଏହି ପୋଷ୍ଟରେ, ଏକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପୋଲାର ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ନମୁନା ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ C18AQ ସ୍ତମ୍ଭ ଦ୍ୱାରା ଶୁଦ୍ଧ କରାଯାଇଥିଲା |ଫଳସ୍ୱରୂପ, ଆବଶ୍ୟକତା ପୂରଣ କରୁଥିବା ଲକ୍ଷ୍ୟ ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରାପ୍ତ ହେଲା ଏବଂ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏବଂ ବିକାଶରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |
| ଯନ୍ତ୍ର | SepaBean™ମେସିନ୍ 2 | |||
| କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ | 12 g SepaFlash C18 RP ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ (ଗୋଲାକାର ସିଲିକା, 20 - 45 μm, 100 Å, ଅର୍ଡର ନନ୍ବର୍ ： SW-5222-012-SP) | 12 g SepaFlash C18AQ RP ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ (ଗୋଲାକାର ସିଲିକା, 20 - 45 μm, 100 Å, ଅର୍ଡର ସଂଖ୍ୟା ： SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ | | 254 nm, 220 nm | 214 nm | ||
| ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ | | ଦ୍ରବଣକାରୀ ଏ: ଜଳ | ଦ୍ରବଣକାରୀ ବି: ଆସେଟୋନିଟ୍ରିଲ୍ | | |||
| ପ୍ରବାହ ଗତି | 15 mL / ମିନିଟ୍ | 20 mL / ମିନିଟ୍ | ||
| ନମୁନା ଲୋଡିଂ | | 30 ମିଗ୍ରା | |||
| ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ | ସମୟ (CV) | ଦ୍ରବଣକାରୀ ବି (%) | ସମୟ (ମିନିଟ୍) | ଦ୍ରବଣକାରୀ ବି (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
ଫଳାଫଳ ଓ ଅଲୋଚନା
ନିୟମିତ C18 ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ C18AQ ସ୍ତମ୍ଭ ମଧ୍ୟରେ ପୋଲାର ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ନମୁନା ପାଇଁ ଶୁଦ୍ଧତା କାର୍ଯ୍ୟକୁ ତୁଳନା କରିବାକୁ, ଆମେ ନମୁନାର ଫ୍ଲାସ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ଏକ ନିୟମିତ C18 ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ |ଚିତ୍ର 2 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଉଚ୍ଚ ଜଳୀୟ ଅନୁପାତରେ ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା C18 ଶୃଙ୍ଖଳାର ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଫେଜ୍ ପତନ ହେତୁ, ନମୁନାଟି ନିୟମିତ C18 କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ଉପରେ ରଖାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଦ୍ୱାରା ସିଧାସଳଖ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା |ଫଳସ୍ୱରୂପ, ନମୁନାକୁ ଫଳପ୍ରଦ ଭାବରେ ପୃଥକ କରାଯାଇ ଶୁଦ୍ଧ କରାଯାଇ ନାହିଁ |
ଚିତ୍ର 2. ନିୟମିତ C18 କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ଉପରେ ନମୁନାର ଫ୍ଲାସ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ୍ |
ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ଆମେ ନମୁନାର ଫ୍ଲାସ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ଏକ C18AQ ସ୍ତମ୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ |ଚିତ୍ର 3 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଫଳପ୍ରଦ ଭାବରେ ସ୍ତମ୍ଭରେ ରଖାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପରେ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା |ଲକ୍ଷ୍ୟ ଉତ୍ପାଦକୁ କଞ୍ଚା ନମୁନାରେ ଥିବା ଅଶୁଦ୍ଧତାଠାରୁ ଅଲଗା କରି ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା |ଲିଓଫିଲାଇଜେସନ୍ ପରେ ଏବଂ HPLC ଦ୍ analy ାରା ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯିବା ପରେ, ଶୁଦ୍ଧ ଦ୍ରବ୍ୟର ଶୁଦ୍ଧତା 98.2% ଅଟେ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପଦକ୍ଷେପ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏବଂ ବିକାଶ ପାଇଁ ଏହାକୁ ଅଧିକ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |
ଚିତ୍ର 3. C18AQ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ଉପରେ ନମୁନାର ଫ୍ଲାସ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ୍ |
ପରିଶେଷରେ, SepaFlash C18AQ RP ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ଫ୍ଲାସ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସିଷ୍ଟମ୍ SepaBan ସହିତ ମିଳିତ |™ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପୋଲାର କିମ୍ବା ହାଇଡ୍ରୋଫିଲିକ୍ ନମୁନାଗୁଡିକର ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ମେସିନ୍ ଏକ ଦ୍ରୁତ ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ସମାଧାନ ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ |
ସାଣ୍ଟାଇ ଟେକ୍ନୋଲୋଜିର ବିଭିନ୍ନ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ସହିତ ସେପାଫ୍ଲାଶ୍ C18AQ RP ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ର ଏକ ସିରିଜ୍ ଅଛି (ସାରଣୀ 2 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି) |
| ଆଇଟମ୍ ନମ୍ବର | | ସ୍ତମ୍ଭ ଆକାର | ପ୍ରବାହ ଗତି (mL / ମିନିଟ୍) | ସର୍ବାଧିକ (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 ଗ୍ରାମ | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 ଗ୍ରାମ | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 ଗ୍ରାମ | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 ଗ୍ରାମ | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 ଗ୍ରାମ | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 ଗ୍ରାମ | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 ଗ୍ରାମ | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 ଗ୍ରାମ | 40-80 | 250 / 17.2 |
ସାରଣୀ 2. SepaFlash C18AQ RP ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ |ପ୍ୟାକିଂ ସାମଗ୍ରୀ: ଉଚ୍ଚ-ଦକ୍ଷତା ଗୋଲାକାର C18 (AQ) - ବନ୍ଧା ସିଲିକା, 20 - 45 μm, 100 Å |
SepaBean ™ ମେସିନର ବିସ୍ତୃତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା, କିମ୍ବା SepaFlash ସିରିଜ୍ ଫ୍ଲାସ୍ କାର୍ଟ୍ରିଜ୍ ଉପରେ ଅର୍ଡର ସୂଚନା ବିଷୟରେ ଅଧିକ ସୂଚନା ପାଇଁ ଦୟାକରି ଆମର ୱେବସାଇଟ୍ ପରିଦର୍ଶନ କରନ୍ତୁ |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଅକ୍ଟୋବର -12-2018 |