Påføringen av sepaflash sterke anionbytte kromatografikolonner i rensing av sure forbindelser

Resultater og diskusjon

For det første ble prøveblandingen separert med en normal fase blitz-kassett ferdigpakket med vanlig silika. Som show i figur 3 ble de to komponentene i prøven eluert fra kassetten etter hverandre. Deretter ble en Sax Flash -kassett brukt for rensing av prøven. Som show i figur 4 ble den sure komponenten B fullstendig beholdt på Sax -kassetten. Den nøytrale komponenten A ble gradvis eluert fra kassetten med eluering av mobilfasen.

Figur 3. Flash -kromatogrammet av prøven på en vanlig normalfasekassett.

Figur 4. Flash -kromatogrammet av prøven på en saxpatron.
Sammenlignet figur 3 og figur 4, har komponenten A inkonsekvent toppform på de to forskjellige flash -kassettene. For å bekrefte om elueringstoppen tilsvarer komponenten, kan vi bruke den fulle bølgelengdeskannefunksjonen som er innebygd i kontrollprogramvaren til Sepabean ™ -maskinen. Åpne eksperimentelle data for de to separasjonene, dra til indikatorlinjen på tidsaksen (CV) i kromatogrammet til det høyeste punktet og det nest høyeste punktet i elueringstoppen som tilsvarer komponenten A, og hele bølgelengdespektret til disse to punktene vil bli automatisk vist under kromen (som vist i figur 5 og figur 6). Sammenlignet hele bølgelengdespektrumdataene for disse to separasjonene, har komponenten A konsistent absorpsjonsspekter i to eksperimenter. Av grunnen til komponenten A har inkonsekvent toppform på to forskjellige flash -kassetter, spekuleres det i at det er spesifikk urenhet i komponenten A som har forskjellig retensjon på normalfasekassetten og Sax -kassetten. Derfor er elueringssekvensen forskjellig for komponenten A og urenheten på disse to flash -kassettene, noe som resulterer i inkonsekvent toppform på kromatogrammer.

Figur 5. Det fulle bølgelengdespekteret til komponenten A og urenhetene atskilt med normalfasekassett.

Figur 6. Det fulle bølgelengdespekteret til komponenten A og urenheten atskilt med sax -kassett.

Hvis målproduktet som skal samles inn er den nøytrale komponenten A, kan rensingsoppgaven enkelt fullføres ved direkte ved bruk av SAX -kassetten for eluering etter prøvelasting. På den annen side, hvis målproduktet som skal samles er den sure komponenten B, kan fangstfrigjørings måten bare blir tatt i bruk med en liten justering i eksperimentelle trinn: når prøven ble lastet på saxpatronen og den nøytrale komponenten A ble fullstendig eluert med normal faseorganisk løsningsmidler, bytt mobilfasen til metanoloppløsningen som inneholder 5% yrk. Acetationionene i mobilfasen vil konkurrere med komponenten B for binding til de kvartære aminiongruppene på den stasjonære fasen av Sax -kassetten, og dermed eluere komponenten B fra kassetten for å oppnå målproduktet. Kromatogrammet til prøven separert i ionebytte -modus ble vist i figur 7.

Figur 7. Flash -kromatogrammet av komponenten B eluert i ionebytte -modus på en sax -kassett.

Avslutningsvis kan sur eller nøytral prøve raskt renses med Sax -kassett kombinert med normalfasekassett ved bruk av forskjellige rensingsstrategier. Ved hjelp av full bølgelengdeskanningsfunksjon som er innebygd i kontrollprogramvaren til Sepabean ™ -maskin, kan det karakteristiske absorpsjonsspekteret til de eluerte brøkene lett sammenlignes og bekreftes, og hjelper forskere raskt med å bestemme sammensetningen og renheten til de eluerte fraksjonene og dermed forbedre arbeidseffektiviteten.