SepaFlash™ kolonne

Santai Solvent Lines-sett og tilbehør

Nei, endekapslet silika er uløselig i alle vanlig brukte organiske løsemidler.

For optimal rensing med C18 flash-kolonner, følg disse trinnene:
① Skyll kolonnen med 100 % av det sterke (organiske) løsningsmidlet i 10 – 20 CVer (kolonnevolum), typisk metanol eller acetonitril.
② Skyll kolonnen med 50 % sterk + 50 % vandig (hvis tilsetningsstoffer er nødvendig, ta med dem) i ytterligere 3 – 5 CVer.
③ Skyll kolonnen med de innledende gradientbetingelsene for 3 – 5 CVer.

For kolonnestørrelser mellom 4g og 330g, brukes standard Luer-kobling i disse flash-søylene. For kolonnestørrelser på 800g, 1600g og 3000g bør ekstra koblingsadaptere brukes for å montere disse store flash-søylene på flashkromatografisystemet. Se dokumentet Santai Adapter Kit for 800g, 1600g, 3kg Flash Columns for flere detaljer.

For normalfasekolonne anbefales det å bruke mobilfasen der metanolforholdet ikke overstiger 25 %.

Generelt anbefales det å bruke den mobile fasen der forholdet mellom de polare løsningsmidlene ikke overstiger 5 %. De polare løsningsmidlene inkluderer DMSO, DMF, THF, TEA etc.

Fast prøvebelastning er en nyttig teknikk for å laste prøven som skal renses på en kolonne, spesielt for prøver med lav løselighet. I dette tilfellet er iLOK flash-kassett et veldig passende valg.
Vanligvis oppløses prøven i et egnet løsningsmiddel og adsorberes på et fast adsorberingsmiddel som kan være det samme som brukes i flashkolonner, inkludert diatoméjord eller silika eller andre materialer. Etter fjerning / fordampning av gjenværende løsningsmiddel, legges adsorbenten på toppen av en delvis fylt kolonne eller inn i en tom fastfyllingspatron. For mer detaljert informasjon, se dokumentet iLOK-SL Cartridge User Guide for flere detaljer.

Kolonnevolum er omtrent lik dødvolum (VM) når man ignorerer det ekstra volumet i slangene som forbinder kolonnen med injektoren og detektoren.

Dødtid (tM) er tiden som kreves for eluering av en ikke-tilbakeholdt komponent.

Dødvolum (VM) er volumet av den mobile fasen som kreves for eluering av en ikke-tilbakeholdt komponent. Dødvolum kan beregnes ved følgende ligning: VM =F0*tM.

Blant ligningen ovenfor er FO strømningshastigheten til den mobile fasen.

Nei, endekapslet silika er uløselig i alle vanlig brukte organiske løsemidler.

Silica flash-søylene er til engangsbruk, men med riktig håndtering kan silikapatronene gjenbrukes uten å ofre ytelsen.
For å kunne gjenbrukes, må silikaflashkolonnen ganske enkelt tørkes med trykkluft eller spyles med og lagres i isopropanol.

Riktig lagring gjør at C18 flash-kolonner kan gjenbrukes:
• La aldri kolonnen tørke ut etter bruk.
• Fjern alle organiske modifiseringsmidler ved å skylle kolonnen med 80 % metanol eller acetonitril i vann i 3 – 5 CVer.
• Oppbevar kolonnen i det ovennevnte spylemiddelet med endebeslag på plass.

For de store kolonnene over 220g er den termiske effekten åpenbar i prosessen med pre-likevekt. Det anbefales å sette strømningshastigheten til 50-60 % av den foreslåtte strømningshastigheten i pre-likevektsprosessen for å unngå åpenbar termisk effekt.

Den termiske effekten av blandet løsningsmiddel er mer åpenbart enn enkelt løsningsmiddel. Ta løsningsmiddelsystemet cykloheksan/etylacetat som eksempel, det er foreslått å bruke 100 % cykloheksan i pre-likevektsprosessen. Når pre-ekvilibreringen er fullført, kan separasjonseksperimentet utføres i henhold til det forhåndsinnstilte løsningsmiddelsystemet.