Mingzu यांग, बो Xu
आवेदन आर एन्ड डी केन्द्र
परिचय
एन्टिबायोटिकहरू सूक्ष्मजीवहरू (ब्याक्टेरिया, फंगाई, एक्टिनोमाइसेट्स सहित) वा यस्तै यौगिकहरू द्वारा उत्पादित माध्यमिक चयापचयहरूको वर्ग हो जुन रासायनिक रूपमा संश्लेषित वा अर्ध-संश्लेषित हुन्छन्।एन्टिबायोटिक्सले अन्य सूक्ष्मजीवहरूको विकास र अस्तित्वलाई रोक्न सक्छ।मानिसले पत्ता लगाएको पहिलो एन्टिबायोटिक, पेनिसिलिन, सन् १९२८ मा ब्रिटिश माइक्रोबायोलोजिस्ट अलेक्ज्याण्डर फ्लेमिङले पत्ता लगाएका थिए। मोल्डबाट दूषित भएको स्ट्याफिलोकोकस कल्चर डिशमा मोल्डको वरपरका ब्याक्टेरिया बढ्न नसक्ने देखे।उनले ढाँचाले ब्याक्टेरियाको प्रतिरोधी पदार्थ निस्कनुपर्दछ भन्ने धारणा राखे जसलाई उनले सन् १९२८ मा पेनिसिलिन नाम दिएका थिए। तर त्यस समयमा सक्रिय तत्वहरू शुद्ध गरिएको थिएन।सन् १९३९ मा अक्सफोर्ड विश्वविद्यालयका अर्न्स्ट चेन र हावर्ड फ्लोरेले ब्याक्टेरिया संक्रमणको उपचार गर्न सक्ने औषधि विकास गर्ने निर्णय गरे।स्ट्रेनहरू प्राप्त गर्न फ्लेमिङलाई सम्पर्क गरेपछि, तिनीहरूले सफलतापूर्वक स्ट्रेनबाट पेनिसिलिन निकाले र शुद्ध गरे।उपचारात्मक औषधिको रूपमा पेनिसिलिनको सफल विकासको लागि, फ्लेमिङ, चेन र फ्लोरेले 1945 को चिकित्सामा नोबेल पुरस्कार साझा गरे।
ब्याक्टेरिया संक्रमणको उपचार वा रोकथाम गर्न एन्टिबायोटिकहरू एन्टिब्याक्टेरियल एजेन्टको रूपमा प्रयोग गरिन्छ।एन्टिब्याक्टेरियल एजेन्टको रूपमा प्रयोग हुने एन्टिबायोटिकका धेरै मुख्य वर्गहरू छन्: β-ल्याक्टम एन्टिबायोटिक्स (पेनिसिलिन, सेफालोस्पोरिन, आदि सहित), एमिनोग्लाइकोसाइड एन्टिबायोटिक्स, म्याक्रोलाइड एन्टिबायोटिक्स, टेट्रासाइक्लिन एन्टिबायोटिक, क्लोराम्फेनिकोल (कुल एन्टिबायोटिक र एन्टिबायोटिक स्रोतहरू। जैविक किण्वन, अर्ध-संश्लेषण र कुल संश्लेषण।जैविक किण्वनबाट उत्पादित एन्टिबायोटिकलाई रासायनिक स्थिरता, विषाक्त साइड इफेक्ट, ब्याक्टेरियल स्पेक्ट्रम र अन्य समस्याहरूको कारणले रासायनिक विधिहरूद्वारा संरचनात्मक रूपमा परिमार्जन गर्न आवश्यक छ।रासायनिक परिमार्जन पछि, एन्टिबायोटिक्सले बढि स्थिरता हासिल गर्न सक्छ, विषाक्त साइड इफेक्टहरू कम गर्न सक्छ, एन्टिब्याक्टेरियल स्पेक्ट्रम विस्तार गर्न सक्छ, औषधि प्रतिरोधी क्षमता घटाउँछ, जैव उपलब्धतामा सुधार हुन्छ, र यसरी औषधि उपचारको प्रभावमा सुधार हुन्छ।यसैले, अर्ध-सिंथेटिक एन्टिबायोटिकहरू हाल एन्टिबायोटिक औषधिहरूको विकासमा सबैभन्दा लोकप्रिय दिशा हो।
अर्ध-सिंथेटिक एन्टिबायोटिकको विकासमा, एन्टिबायोटिकहरूमा कम शुद्धता, धेरै उप-उत्पादनहरू र जटिल घटकहरू हुन्छन् किनभने तिनीहरू माइक्रोबियल किण्वन उत्पादनहरूबाट व्युत्पन्न हुन्छन्।यस अवस्थामा, अर्ध-सिंथेटिक एन्टिबायोटिकहरूमा अशुद्धताहरूको विश्लेषण र नियन्त्रण विशेष रूपमा महत्त्वपूर्ण छ।अशुद्धताहरू प्रभावकारी रूपमा पहिचान गर्न र विशेषताहरू गर्न, अर्ध-सिंथेटिक एन्टिबायोटिकको सिंथेटिक उत्पादनबाट पर्याप्त मात्रामा अशुद्धताहरू प्राप्त गर्न आवश्यक छ।सामान्यतया प्रयोग हुने अशुद्धता तयारी प्रविधिहरू मध्ये, फ्ल्यास क्रोमाटोग्राफी एक लागत-प्रभावकारी विधि हो जसमा ठूलो नमूना लोडिङ रकम, कम लागत, समय बचत, आदि जस्ता फाइदाहरू छन्। फ्ल्यास क्रोमाटोग्राफी सिंथेटिक अनुसन्धानकर्ताहरूद्वारा अधिक र अधिक प्रयोग गरिएको छ।
यस पोस्टमा, अर्ध-सिंथेटिक एमिनोग्लाइकोसाइड एन्टिबायोटिकको मुख्य अशुद्धता नमूनाको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो र फ्ल्याश क्रोमेटोग्राफी प्रणाली SepaBean™ मेसिनसँग मिलाएर SepaFlash C18AQ कारट्रिजद्वारा शुद्ध गरिएको थियो।आवश्यकताहरू पूरा गर्ने लक्ष्य उत्पादन सफलतापूर्वक प्राप्त भयो, यी यौगिकहरूको शुद्धिकरणको लागि एक उच्च कुशल समाधान सुझाव।
प्रयोगात्मक खण्ड
नमूना स्थानीय औषधि कम्पनी द्वारा प्रदान गरिएको थियो।नमूना एक प्रकारको एमिनो पॉलीसाइक्लिक कार्बोहाइड्रेट थियो र यसको आणविक संरचना एमिनोग्लाइकोसाइड एन्टिबायोटिकसँग मिल्दोजुल्दो थियो।नमूनाको ध्रुवता धेरै उच्च थियो, यसलाई पानीमा धेरै घुलनशील बनाउँदै।नमूनाको आणविक संरचनाको योजनाबद्ध रेखाचित्र चित्र १ मा देखाइएको थियो। HPLC द्वारा विश्लेषण गरिएको अनुसार कच्चा नमूनाको शुद्धता लगभग 88% थियो।उच्च ध्रुवताका यी यौगिकहरूको शुद्धिकरणको लागि, हाम्रो अघिल्लो अनुभवहरू अनुसार नमूना नियमित C18 स्तम्भहरूमा मात्रै राखिनेछ।त्यसकारण, नमूना शुद्धीकरणको लागि C18AQ स्तम्भ प्रयोग गरिएको थियो।
चित्र १. नमूनाको आणविक संरचनाको योजनाबद्ध रेखाचित्र।
नमूना समाधान तयार गर्न, 50 मिलीग्राम कच्चा नमूना 5 एमएल शुद्ध पानीमा घोलियो र त्यसपछि यसलाई पूर्ण रूपमा स्पष्ट समाधान बनाउनको लागि अल्ट्रासोनिक गरिएको थियो।नमूना समाधान त्यसपछि इन्जेक्टरद्वारा फ्लैश स्तम्भमा इन्जेक्ट गरिएको थियो।फ्ल्यास शुद्धीकरणको प्रयोगात्मक सेटअप तालिका 1 मा सूचीबद्ध गरिएको थियो।
साधन | SepaBean™ मेसिन २ | |
कारतूस | 12 g SepaFlash C18AQ RP फ्ल्यास कार्ट्रिज (गोलाकार सिलिका, 20 - 45μm, 100 Å, अर्डर नम्बर:SW-5222-012-SP(AQ)) | |
तरंगदैर्ध्य | 204 एनएम, 220 एनएम | |
मोबाइल चरण | विलायक A: पानी विलायक बी: एसीटोनिट्रिल | |
बग्ने गति | १५ एमएल/मिनेट | |
नमूना लोड गर्दै | ५० मिलीग्राम | |
ग्रेडियन्ट | समय (मिनेट) | विलायक B (%) |
0 | 0 | |
१९.० | 8 | |
४७.० | 80 | |
५२.० | 80 |
परिणाम र छलफल
C18AQ कारट्रिजमा नमूनाको फ्ल्यास क्रोमेटोग्राम चित्र 2 मा देखाइएको थियो। चित्र 2 मा देखाइएको रूपमा, उच्च ध्रुवीय नमूना प्रभावकारी रूपमा C18AQ कारतूसमा राखिएको थियो।संकलित अंशहरूको लागि लाइफोलाइजेशन पछि, HPLC विश्लेषणद्वारा लक्षित उत्पादनको शुद्धता 96.2% (चित्र 3 मा देखाइएको छ) थियो।परिणामले शुद्ध उत्पादनलाई अर्को चरणको अनुसन्धान र विकासमा थप प्रयोग गर्न सकिने संकेत गरेको छ।
चित्र २. C18AQ कारट्रिजमा नमूनाको फ्ल्यास क्रोमेटोग्राम।
चित्र 3. लक्षित उत्पादनको HPLC क्रोमेटोग्राम।
निष्कर्षमा, SepaFlash C18AQ RP फ्ल्यास कार्ट्रिज फ्ल्यास क्रोमेटोग्राफी प्रणाली SepaBean™ मेसिनसँग जोडिएकोले अत्यधिक ध्रुवीय नमूनाहरूको शुद्धीकरणको लागि द्रुत र प्रभावकारी समाधान प्रस्ताव गर्न सक्छ।
SepaFlash C18AQ RP फ्ल्यास कारतूसहरूको बारेमा
त्यहाँ Santai टेक्नोलोजी (तालिका 2 मा देखाइएको रूपमा) बाट विभिन्न विशिष्टताहरु संग SepaFlash C18AQ RP फ्ल्यास कारतूस को एक श्रृंखला छ।
वस्तु नम्बर | स्तम्भ आकार | बग्ने गति (mL/मिनेट) | अधिकतम दबाव (psi/bar) |
SW-5222-004-SP(AQ) | ५.४ ग्राम | ५-१५ | ४००/२७.५ |
SW-5222-012-SP(AQ) | २० ग्राम | १०-२५ | ४००/२७.५ |
SW-5222-025-SP(AQ) | ३३ ग्राम | १०-२५ | ४००/२७.५ |
SW-5222-040-SP(AQ) | ४८ ग्राम | १५-३० | ४००/२७.५ |
SW-5222-080-SP(AQ) | 105 ग्राम | २५-५० | ३५०/२४.० |
SW-5222-120-SP(AQ) | १५५ ग्राम | ३०-६० | ३००/२०.७ |
SW-5222-220-SP(AQ) | 300 ग्राम | 40-80 | ३००/२०.७ |
SW-5222-330-SP(AQ) | ४२० ग्राम | 40-80 | 250/17.2 |
तालिका 2. SepaFlash C18AQ RP फ्ल्यास कार्ट्रिजहरू।प्याकिङ सामग्री: उच्च दक्षता गोलाकार C18 (AQ)-बन्डेड सिलिका, 20 - 45 μm, 100 Å।
SepaBean™ मेसिनको विस्तृत विवरणहरू, वा SepaFlash श्रृंखला फ्ल्यास कारतूसहरूमा अर्डर जानकारीको लागि, कृपया हाम्रो वेबसाइटमा जानुहोस्।
पोस्ट समय: अक्टोबर-26-2018