रुई हुआंग, बो जू
आवेदन आर एन्ड डी केन्द्र
परिचय
आयन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफी (आईईसी) एक क्रोमेटोग्राफिक विधि हो जुन सामान्यतया समाधानमा आयनिक रूपमा प्रस्तुत गरिएका यौगिकहरूलाई छुट्याउन र शुद्ध गर्न प्रयोग गरिन्छ।विनिमय योग्य आयनहरूको विभिन्न चार्ज अवस्थाहरू अनुसार, आईईसीलाई दुई प्रकारमा विभाजन गर्न सकिन्छ, क्यासन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफी र एनियन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफी।केशन एक्सचेन्ज क्रोमैटोग्राफीमा, अम्लीय समूहहरू विभाजन मिडियाको सतहमा बाँधिएका हुन्छन्।उदाहरणका लागि, सल्फोनिक एसिड (-SO3H) बलियो क्याशन एक्सचेन्ज (SCX) मा सामान्यतया प्रयोग हुने समूह हो, जसले H+ र नकारात्मक रूपमा चार्ज गरिएको समूह -SO3- यसरी समाधानमा अन्य क्याशनहरू सोस्न सक्छ।आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफीमा, क्षारीय समूहहरू विभाजन मिडियाको सतहमा बाँधिएका हुन्छन्।उदाहरणका लागि, क्वाटरनरी एमाइन (-NR3OH, जहाँ R हाइड्रोकार्बन समूह हो) सामान्यतया बलियो आयन एक्सचेन्ज (SAX) मा प्रयोग गरिन्छ, जसले OH-लाई अलग गर्छ- र सकारात्मक रूपमा चार्ज गरिएको समूह -N+R3 ले समाधानमा अन्य आयनहरू सोस्न सक्छ, परिणामस्वरूप आयनहरू उत्पन्न हुन्छ। विनिमय प्रभाव।
प्राकृतिक उत्पादनहरू मध्ये, फ्लेभोनोइडहरूले हृदय रोगहरूको रोकथाम र उपचारमा उनीहरूको भूमिकाको कारण अनुसन्धानकर्ताहरूको ध्यान आकर्षित गरेको छ।फिनोलिक हाइड्रोक्सिल समूहहरूको उपस्थितिको कारणले फ्लाभोनोइड अणुहरू अम्लीय हुन्छन्, यी अम्लीय यौगिकहरूको विभाजन र शुद्धीकरणको लागि पारंपरिक सामान्य चरण वा उल्टो चरण क्रोमाटोग्राफीको अतिरिक्त आयन एक्सचेंज क्रोमेटोग्राफी एक वैकल्पिक विकल्प हो।फ्ल्यास क्रोमेटोग्राफीमा, आयन एक्सचेंजको लागि सामान्यतया प्रयोग हुने पृथकीकरण मिडिया सिलिका जेल म्याट्रिक्स हो जहाँ आयन एक्सचेंज समूहहरू यसको सतहमा बाँधिएका हुन्छन्।फ्ल्यास क्रोमेटोग्राफीमा सबैभन्दा बढी प्रयोग हुने आयन एक्सचेन्ज मोडहरू SCX (सामान्यतया सल्फोनिक एसिड समूह) र SAX (सामान्यतया क्वाटरनरी अमाइन समूह) हुन्।सन्ताई टेक्नोलोजीहरूद्वारा "द एप्लिकेसन अफ सेपाफ्लाश स्ट्रङ्ग क्यासन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफी स्तम्भहरू इन द प्युरिफिकेशन अफ अल्कालाइन कम्पाउन्ड्स" शीर्षकको साथमा प्रकाशित एप्लिकेसन नोटमा, SCX स्तम्भहरू क्षारीय यौगिकहरूको शुद्धिकरणको लागि प्रयोग गरिएको थियो।यस पोष्टमा, अम्लीय यौगिकहरूको शुद्धीकरणमा SAX स्तम्भहरूको प्रयोग अन्वेषण गर्न नमूनाको रूपमा तटस्थ र अम्लीय स्तरहरूको मिश्रण प्रयोग गरिएको थियो।
प्रयोगात्मक खण्ड
चित्र 1. स्थिर चरणको योजनाबद्ध रेखाचित्र SAX विभाजन मिडियाको सतहमा बाँडिएको छ।
यस पोष्टमा, क्वाटरनरी एमाइन बन्डेड सिलिकासँग पूर्व-प्याक गरिएको SAX स्तम्भ प्रयोग गरिएको थियो (चित्र 1 मा देखाइएको रूपमा)।Chromone र 2,4-dihydroxybenzoic एसिडको मिश्रण शुद्ध गर्न नमूनाको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो (चित्र 2 मा देखाइएको छ)।मिश्रणलाई मेथानोलमा घोलियो र इन्जेक्टरद्वारा फ्ल्यास कारट्रिजमा लोड गरियो।फ्ल्यास शुद्धीकरणको प्रयोगात्मक सेटअप तालिका 1 मा सूचीबद्ध छ।
चित्र 2. नमूना मिश्रणमा दुई घटकहरूको रासायनिक संरचना।
| साधन | SepaBean™ मेसिन T | |||||
| कारतूस | 4 g SepaFlash मानक श्रृंखला फ्ल्यास कार्ट्रिज (अनियमित सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å, अर्डर नम्बर: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash Bonded Series SAX फ्ल्यास कार्ट्रिज (अनियमित सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å, अर्डर नम्बर：SW-5001-004-IR) | ||||
| तरंगदैर्ध्य | 254 एनएम (पत्ता लगाउने), 280 एनएम (निगरानी) | |||||
| मोबाइल चरण | विलायक ए: एन-हेक्सेन | |||||
| विलायक बी: इथाइल एसीटेट | ||||||
| बग्ने गति | ३० एमएल/मिनेट | २० एमएल/मिनेट | ||||
| नमूना लोड गर्दै | २० मिलीग्राम (कम्पोनेन्ट ए र कम्पोनेन्ट बीको मिश्रण) | |||||
| ग्रेडियन्ट | समय (CV) | विलायक B (%) | समय (CV) | विलायक B (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| १.७ | 12 | 14 | १०० | |||
| ३.७ | 12 | / | / | |||
| 16 | १०० | / | / | |||
| 18 | १०० | / | / | |||
परिणाम र छलफल
सबैभन्दा पहिले, नमूना मिश्रण नियमित सिलिकाको साथ पूर्व-प्याक गरिएको सामान्य चरण फ्लैश कारतूस द्वारा अलग गरिएको थियो।चित्र 3 मा देखाइएको रूपमा, नमूनामा दुई घटकहरू कारतूसबाट एक पछि अर्को गरी हटाइयो।अर्को, नमूनाको शुद्धीकरणको लागि SAX फ्लैश कारतूस प्रयोग गरिएको थियो।चित्र 4 मा देखाइएको रूपमा, एसिडिक कम्पोनेन्ट B पूर्ण रूपमा SAX कारतूसमा राखिएको थियो।न्यूट्रल कम्पोनेन्ट ए बिस्तारै कारतूसबाट मोबाइल चरणको उत्सर्जनको साथ एल्युट गरिएको थियो।
चित्र 3. नियमित सामान्य चरण कार्ट्रिजमा नमूनाको फ्ल्यास क्रोमेटोग्राम।
चित्र ४. SAX कारट्रिजमा नमूनाको फ्ल्यास क्रोमेटोग्राम।
चित्र 3 र चित्र 4 को तुलना गर्दा, कम्पोनेन्ट A मा दुई फरक फ्ल्यास कारतूसहरूमा असंगत शिखर आकार छ।इल्युसन पीक कम्पोनेन्टसँग मिल्दोजुल्दो छ कि छैन भनी पुष्टि गर्न, हामी SepaBean™ मेसिनको नियन्त्रण सफ्टवेयरमा निर्मित पूर्ण तरंग लम्बाइ स्क्यानिङ सुविधा प्रयोग गर्न सक्छौं।दुई पृथकहरूको प्रयोगात्मक डेटा खोल्नुहोस्, क्रोमेटोग्राममा समय अक्ष (CV) मा सूचक रेखामा तान्नुहोस् उच्चतम बिन्दुमा र कम्पोनेन्ट A सँग सम्बन्धित इल्युसन शिखरको दोस्रो उच्च बिन्दुमा, र यी दुईको पूर्ण तरंगदैर्ध्य स्पेक्ट्रम। अंकहरू स्वचालित रूपमा क्रोमेटोग्राम तल देखाइनेछ (चित्र 5 र चित्र 6 मा देखाइएको रूपमा)।यी दुई विभाजनहरूको पूर्ण तरंगदैर्ध्य स्पेक्ट्रम डेटाको तुलना गर्दै, कम्पोनेन्ट A सँग दुई प्रयोगहरूमा लगातार अवशोषण स्पेक्ट्रम छ।कम्पोनेन्ट A को कारणले दुई फरक फ्ल्यास कारट्रिजहरूमा असंगत शिखर आकार छ, यो अनुमान गरिएको छ कि त्यहाँ कम्पोनेन्ट A मा विशिष्ट अशुद्धता छ जुन सामान्य चरण कार्ट्रिज र SAX कारट्रिजमा फरक अवधारण छ।तसर्थ, कम्पोनेन्ट A र यी दुई फ्ल्यास कारट्रिजहरूमा रहेको अशुद्धताको लागि एल्युटिंग अनुक्रम फरक छ, परिणामस्वरूप क्रोमेटोग्रामहरूमा असंगत शिखर आकार।
चित्र 5. कम्पोनेन्ट A को पूर्ण तरंगदैर्ध्य स्पेक्ट्रम र सामान्य चरण कार्ट्रिज द्वारा अलग गरिएको अशुद्धता।
चित्र 6. कम्पोनेन्ट A को पूर्ण तरंगदैर्ध्य स्पेक्ट्रम र SAX कार्ट्रिज द्वारा अलग गरिएको अशुद्धता।
यदि सङ्कलन गरिने लक्ष्य उत्पादन तटस्थ कम्पोनेन्ट ए हो भने, शुद्धीकरण कार्य सजिलैसँग नमूना लोडिङ पछि इल्युसनको लागि SAX कार्ट्रिज प्रयोग गरेर पूरा गर्न सकिन्छ।अर्कोतर्फ, यदि सङ्कलन गरिने लक्ष्य उत्पादन एसिडिक कम्पोनेन्ट B हो भने, क्याप्चर-रिलीज तरिका प्रयोगात्मक चरणहरूमा थोरै समायोजनको साथ अपनाउन सकिन्छ: जब नमूना SAX कारतूस र तटस्थ कम्पोनेन्ट A मा लोड गरिएको थियो। सामान्य चरणको अर्गानिक सॉल्भेन्ट्सको साथ पूर्णतया एल्युट गरिएको थियो, मोबाइल चरणलाई 5% एसिटिक एसिड भएको मिथानोल समाधानमा स्विच गर्नुहोस्।मोबाइल चरणमा एसीटेट आयनहरूले SAX कार्ट्रिजको स्थिर चरणमा क्वाटरनरी अमाइन आयन समूहहरूलाई बाँध्न कम्पोनेन्ट B सँग प्रतिस्पर्धा गर्नेछ, जसले गर्दा लक्ष्य उत्पादन प्राप्त गर्न कारट्रिजबाट कम्पोनेन्ट B लाई बाहिर निकाल्छ।आयन एक्सचेंज मोडमा अलग गरिएको नमूनाको क्रोमेटोग्राम चित्र 7 मा देखाइएको थियो।
चित्र 7. कम्पोनेन्ट B को फ्ल्यास क्रोमेटोग्राम SAX कारट्रिजमा आयन एक्सचेन्ज मोडमा एल्युट गरिएको छ।
निष्कर्षमा, अम्लीय वा तटस्थ नमूना SAX कारतूस द्वारा द्रुत रूपमा शुद्ध गर्न सकिन्छ सामान्य चरण कार्ट्रिजसँग विभिन्न शुद्धिकरण रणनीतिहरू प्रयोग गरेर।यसबाहेक, SepaBean™ मेसिनको नियन्त्रण सफ्टवेयरमा निर्मित पूर्ण तरंगदैर्ध्य स्क्यानिङ सुविधाको मद्दतले, एल्युटेड अंशहरूको विशेषता अवशोषण स्पेक्ट्रम सजिलैसँग तुलना गर्न सकिन्छ र पुष्टि गर्न सकिन्छ, अनुसन्धानकर्ताहरूलाई द्रुत रूपमा इल्युटेड अंशहरूको संरचना र शुद्धता निर्धारण गर्न मद्दत गर्दछ र यसरी सुधार गर्न सकिन्छ। कार्य दक्षता।
| वस्तु नम्बर | स्तम्भ आकार | बग्ने गति (mL/मिनेट) | अधिकतम दबाव (psi/bar) |
| SW-5001-004-IR | ५.९ ग्राम | १०-२० | ४००/२७.५ |
| SW-5001-012-IR | २३ ग्राम | १५-३० | ४००/२७.५ |
| SW-5001-025-IR | ३८ ग्राम | १५-३० | ४००/२७.५ |
| SW-5001-040-IR | ५५ ग्राम | २०-४० | ४००/२७.५ |
| SW-5001-080-IR | 122 ग्राम | ३०-६० | ३५०/२४.० |
| SW-5001-120-IR | 180 ग्राम | 40-80 | ३००/२०.७ |
| SW-5001-220-IR | ३४० ग्राम | ५०-१०० | ३००/२०.७ |
| SW-5001-330-IR | ४७५ ग्राम | ५०-१०० | 250/17.2
|
तालिका 2. SepaFlash बन्डेड श्रृंखला SAX फ्ल्यास कारतूसहरू।प्याकिङ सामग्री: अल्ट्रा-शुद्ध अनियमित SAX-बन्डेड सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å।
SepaBean™ को विस्तृत विवरणहरूमा थप जानकारीको लागिमेसिन, वा SepaFlash श्रृंखला फ्लैश कारतूस मा अर्डर जानकारी, कृपया हाम्रो वेबसाइट मा जानुहोस्।
पोस्ट समय: नोभेम्बर-09-2018