बलियो ध्रुवीय पेप्टाइड्स को शुद्धीकरण मा C18AQ स्तम्भ को आवेदन

रुई हुआंग, बो जू
आवेदन आर एन्ड डी केन्द्र

परिचय
पेप्टाइड एमिनो एसिडहरू मिलेर बनेको यौगिक हो, जसमध्ये प्रत्येकमा विभिन्न प्रकारका र क्रमबद्ध एमिनो एसिड अवशेषहरूको क्रमको कारण अद्वितीय भौतिक र रासायनिक गुणहरू छन्।ठोस चरण रासायनिक संश्लेषण को विकास संग, विभिन्न सक्रिय पेप्टाइड्स को रासायनिक संश्लेषण महान प्रगति गरेको छ।यद्यपि, ठोस चरण संश्लेषण द्वारा प्राप्त पेप्टाइड को जटिल संरचना को कारण, अन्तिम उत्पादन भरपर्दो पृथक्करण विधिहरु द्वारा शुद्ध हुनुपर्छ।पेप्टाइड्सका लागि सामान्यतया प्रयोग गरिने शुद्धिकरण विधिहरूमा आयन एक्सचेन्ज क्रोमाटोग्राफी (आईईसी) र रिभर्स्ड-फेज हाई पर्फमेन्स लिक्विड क्रोमाटोग्राफी (आरपी-एचपीएलसी) समावेश छ, जसमा कम नमूना लोडिङ क्षमता, पृथकीकरण मिडियाको उच्च लागत, जटिल र महँगो पृथकीकरण उपकरण, इत्यादि। सानो अणु पेप्टाइड्स (MW <1 kDa) को द्रुत शुद्धिकरणको लागि, Santai Technologies द्वारा पहिले एक सफल अनुप्रयोग केस प्रकाशित गरिएको थियो, जसमा thymopentin (TP-5) को द्रुत शुद्धीकरणको लागि SepaFlash RP C18 कारतूस प्रयोग गरिएको थियो। आवश्यकताहरू पूरा गर्ने लक्ष्य उत्पादन प्राप्त भयो।

चित्र 1. 20 सामान्य एमिनो एसिड (www.bachem.com बाट पुन: उत्पादन)।

त्यहाँ 20 प्रकारका एमिनो एसिडहरू छन् जुन पेप्टाइड्सको संरचनामा सामान्य छन्।यी एमिनो एसिडहरूलाई तिनीहरूको ध्रुवीयता र एसिड-आधार गुणको आधारमा निम्न समूहहरूमा विभाजन गर्न सकिन्छ: गैर-ध्रुवीय (हाइड्रोफोबिक), ध्रुवीय (अनचार्ज गरिएको), अम्लीय वा आधारभूत (चित्र 1 मा देखाइएको रूपमा)।पेप्टाइड अनुक्रममा, यदि अनुक्रम गठन गर्ने एमिनो एसिडहरू प्रायः ध्रुवीय हुन्छन् (चित्र 1 मा गुलाबी रंगमा चिन्ह लगाइएको छ), जस्तै सिस्टिन, ग्लुटामाइन, एस्पारागाइन, सेरीन, थ्रोनिन, टाइरोसिन, आदि, तब यो पेप्टाइड बलियो हुन सक्छ। polarity र पानी मा अत्यधिक घुलनशील हुन।उल्टो-फेज क्रोमेटोग्राफीद्वारा यी बलियो ध्रुवीय पेप्टाइड नमूनाहरूको शुद्धिकरण प्रक्रियाको क्रममा, हाइड्रोफोबिक चरण पतन भनिने घटना देखा पर्नेछ (सान्ताई टेक्नोलोजीहरू द्वारा पहिले प्रकाशित गरिएको अनुप्रयोग नोटलाई सन्दर्भ गर्नुहोस्: हाइड्रोफोबिक फेज कोल्प्स, AQ रिभर्स्ड फेज क्रोमेटोग्राफी स्तम्भहरू र द द)।नियमित C18 स्तम्भहरूको तुलनामा, सुधारिएको C18AQ स्तम्भहरू बलियो ध्रुवीय वा हाइड्रोफिलिक नमूनाहरूको शुद्धीकरणको लागि सबैभन्दा उपयुक्त छन्।यस पोष्टमा, एक बलियो ध्रुवीय पेप्टाइड नमूनाको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो र C18AQ स्तम्भद्वारा शुद्ध गरिएको थियो।नतिजाको रूपमा, आवश्यकताहरू पूरा गर्ने लक्ष्य उत्पादन प्राप्त भयो र निम्न अनुसन्धान र विकासमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।