သတင်းဟောင်း

သတင်း

အားကောင်းတဲ့ polar peptides ၏သန့်စင်အတွက် C18aq ကော်လံ၏လျှောက်လွှာ

အားကောင်းတဲ့ polar peptides ၏သန့်စင်အတွက် C18aq ကော်လံ၏လျှောက်လွှာ

Rui Huang, Bo Xu
လျှောက်လွှာ R & D စင်တာ

နိဒါန်း
Peptide သည်အမိုင်နိုအက်ဆစ်များဖြင့်ဖွဲ့စည်းထားသောခြံစည်းရိုးတစ်ခုစီတွင်အမိုင်နိုအက်ဆစ်အကြိုက်ဆုံးများအပေါ်ကွဲပြားခြားနားသောရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာနှင့်ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာဂုဏ်သတ္တိများရှိသည်။ အစိုင်အခဲအဆင့်ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာသွင်ပြင်လက္ခဏာများဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုနှင့်အတူတက်ကြွစွာ peptides ၏ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာသမာဓိသည်ကြီးမားသောတိုးတက်မှုရှိခဲ့သည်။ သို့သော် Solid Phase ပေါင်းစပ်ပေါင်းစပ် synthesis မှရရှိသော peptide ၏ရှုပ်ထွေးသောဖွဲ့စည်းမှုကြောင့်နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်ကိုစိတ်ချရသောသီးခြားခွဲခြာနည်းလမ်းများကစင်ကြယ်စေသင့်သည်။ Peptides အတွက်အသုံးပြုသောသန့်စင်ခြင်းနည်းလမ်းများမှာအိုင်းယွန်းဖလှယ်ရေး Chromatography (IECTography (IEC) နှင့်ပြောင်းပြန်မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည်မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည် (RP-HPLC) တို့ပါဝင်သည်။ Technologies များဖြစ်သော Sepaflash RP C18 အရာတစ်ခု၏အရာတစ်ခုသည် thymopentin (TP-5) ကိုလျင်မြန်စွာသန့်စင်ခြင်းနှင့်ကြိုတင်ပြင်ဆင်ထားသောထုတ်ကုန်အစည်းအဝေးကိုရယူရန်အတွက်အသုံးပြုသောနည်းပညာများကိုအသုံးပြုခဲ့သည်။

ပုံ 1 ။ 20 ဘုံအမိုင်နိုအက်ဆစ် (www.bachem.com မှထုတ်လွှင့်) ။

Peptides ၏ဖွဲ့စည်းမှုတွင်အမိုင်နိုအက်ဆစ် 20 မျိုးရှိသည်။ ဤအမိုင်နိုအက်ဆစ်များသည်သူတို့၏ polarity နှင့် acid-base ပိုင်ဆိုင်မှုများအရ, Peptide sequence ကိုအစဉ်မပြတ်အမိုင်နိုအက်ဆစ်များသည် cysteine, glutamine, asparagine, serine, polutamine, pyrosine စသဖြင့် polars (ပုံ 1 ပါရုပ်ပုံများ) တွင်ပါ 0 င်သည်။ အဆိုပါခိုင်မာတဲ့ polar peptide နမူနာများအတွက်သန့်ရှင်းရေးလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများကိုပြောင်းပြန် Phase Chromatography ဟုခေါ်သောဖြစ်စဉ်တစ်ခုတွင် Hydrophobic Phase Collapse ဟုခေါ်သောဖြစ်စဉ်တစ်ခုဖြစ်လိမ့်မည် (ယခင်ထုတ်ဝေခဲ့သော application မှတ်စုကို Santai Technology Collapse, AQ ပြောင်းပြန် Phase Chromathography ကော်လံများနှင့်သူတို့၏ applications များ) ။ ပုံမှန် C18 ကော်လံများနှင့်နှိုင်းယှဉ်လျှင် C18aq ကော်လံများသည်အားကောင်းသောဝင်ရိုးစွန်းသို့မဟုတ် hydrophilic နမူနာများ၏သန့်စင်ခြင်းအတွက်အသင့်တော်ဆုံးဖြစ်သည်။ ဤ post တွင်အားကြီးသောဝင်ရိုးစွန်း Peptide ကို C18aq ကော်လံဖြင့်နမူနာအဖြစ်အသုံးပြုခဲ့သည်။ ရလဒ်အနေဖြင့်လိုအပ်ချက်များကိုဖြည့်ဆည်းပေးသည့်ကုန်ပစ္စည်းများကိုရယူခြင်းသည်အောက်ပါသုတေသနနှင့်ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုများတွင်အသုံးပြုနိုင်သည်။

စမ်းသပ်အပိုင်း
စမ်းသပ်မှုတွင်အသုံးပြုသောနမူနာသည်ဖောက်သည်ဓာတ်ခွဲခန်းမှကြင်နာစွာထောက်ပံ့ပေးသောဒြပ် peptide ဖြစ်သည်။ Peptide သည် MW တွင် 1 KDA တွင် 1 KDA ခန့်ရှိပြီး Polar Amino အက်ဆစ်အက်ဆစ်အကြိုက်ဆုံးမျိုးဆက်များကြောင့် Polarity ရှိခဲ့သည်။ ကုန်ကြမ်းနမူနာ၏သန့်ရှင်းစင်ကြယ်သည် 80% ခန့်ရှိသည်။ နမူနာဖြေရှင်းနည်းကိုပြင်ဆင်ရန်အတွက် MG အဖြူအမှုန့်ရေနံစိမ်းနမူနာကို 5 မီလီမီတာသန့်ရှင်းသောရေတွင်ဖျက်သိမ်းလိုက်ပြီး၎င်းသည်ရှင်းလင်းသောဖြေရှင်းချက်ဖြစ်လာစေရန် ultrasonicated ခဲ့သည်။ နမူနာဖြေရှင်းချက်ထို့နောက် injector မှ flash ကော်လံသို့ထိုးသွင်းခဲ့သည်။ Flash purification ၏စမ်းသပ် setup ကိုဇယား 1 တွင်ဖော်ပြထားသည်။

ကရိယာတန်းဆာ

Sepabean™နှင့်စက် 2

Cartridges

12 ဂရမ် Sepaflash C18 RP RP Flash C18 RP RP Cartridge (solherical silica, 20 - 45 μm), အမိန့်,

12 ဂရမ် Sepaflash C18aq Rp Flash Cartridge (So Silica, 20 - 45), အမိန့်နံပါတ် - SW-5222-012-SP (AQ))

လှိုင်းအလျား

254 NM, 220 NM

214 NM

မိုဘိုင်းအဆင့်

solvent a: ရေ

solvent b: acontonitrile

စီးဆင်းမှုနှုန်း

15 ml / min

20 ml / min

နမူနာတင်ခြင်း

30 မီလီဂရမ်

grad

အချိန် (CV)

solvent b (%)

အချိန် (မိနစ်)

solvent b (%)

0

0

0

4

1.0

0

1.0

4

10.0

6

7.5

18

12.5

6

13.0

18

16.5

10

14.0

22

19.0

41

15.5

22

21.0

41

18.0

38

/

/

20.0

38

22.0

87

29.0

87

ဇယား 1 ။ flash purification အတွက်စမ်းသပ် setup ကို။

ရလဒ်နှင့်ဆွေးနွေးခြင်း
Polar Peptide နမူနာနှင့် C18aq ကော်လံတို့အကြား Polar Peptide နမူနာအတွက်သန့်စင်ခြင်းစွမ်းဆောင်ရည်ကိုနှိုင်းယှဉ်ရန်ကျွန်ုပ်တို့သည်နမူနာ၏ flash purnification အတွက်ပုံမှန် C18 ကော်လံကိုစတင်ခဲ့သည်။ ပုံ 2 တွင်ပြထားတဲ့အတိုင်း Hydrophobic အဆင့်ကိုမြင့်မားတဲ့ failous အချိုးအစားကြောင့်ဖြစ်ရတဲ့ C18 ကွင်းဆက်တွေပြိုကျမှုကြောင့်နမူနာကိုပုံမှန် C18 Cartrowe မှာမထိန်းနိုင်ခဲ့ဘူး။ ရလဒ်အနေဖြင့်နမူနာကိုထိရောက်စွာခွဲခြားခြင်းနှင့်သန့်စင်ခြင်းကိုမဖြစ်စေပါ။

ပုံ 2 ။ ပုံမှန် C18 အရာတစ်ခုပေါ်ရှိနမူနာ၏ Flash ChromatoGram ။

ထို့နောက်ကျွန်ုပ်တို့သည်နမူနာ၏ flash သန့်ရှင်းရေးအတွက် C18aq ကော်လံကိုအသုံးပြုခဲ့သည်။ ပုံ 3 မှာပြထားတဲ့အတိုင်း Peptide ကိုကော်လံမှာထိထိရောက်ရောက်ထိန်းသိမ်းထားပြီးထွက်ပေါက်ထွက်ခဲ့တယ်။ ပစ်မှတ်နမူနာတွင်အညစ်အကြေးများနှင့်ခွဲထုတ်ပြီးစုဆောင်းသည်။ Lyophilization ပြီးနောက်နှင့် HPLC မှခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြီးနောက်စင်ကြယ်သောထုတ်ကုန်သည် 98.2% သောသန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှုရှိပြီးနောက်အဆင့်သုတေသနနှင့်ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအတွက်နောက်ထပ်အသုံးချနိုင်သည်။

ပုံ 3 ။ C18aq အရာတစ်ခုမှနမူနာ၏ Flash ChromatoGram ။

နိဂုံးချုပ်အနေဖြင့် Sepaflash C18AQ RP Cartrige သည် Flash Chromathography Sepertography နှင့်ပေါင်းစပ်ထားသည်™နှင့်စက်ကအားကောင်းသောဝင်ရိုးစွန်းသို့မဟုတ် hydrophilic နမူနာများကိုသန့်စင်ခြင်းအတွက်စက်သည်အမြန်နှင့်ထိရောက်သောဖြေရှင်းချက်ကိုကမ်းလှမ်းနိုင်သည်။

Sepaflash C18aq RP Cartridges အကြောင်း

Sepaflash C18AQ RP Cartridges သည် Santai Technology မှကွဲပြားခြားနားသောအသေးစိတ်အချက်အလက်များနှင့်ကွဲပြားသောအသေးစိတ်အချက်အလက်များနှင့်အတူ (ဇယား 2 တွင်ပြထားတဲ့အတိုင်း) ။

ပစ္စည်းနံပါတ်

ကော်လံအရွယ်အစား

စီးဆင်းမှုနှုန်း

(ml / min)

Max.Pressure

(PSI / BAR)

SW-5222-004-SP (AQ)

5.4 ဆ

5-15

400 / 27.5

SW-52222-012-SP (AQ)

20 ဂရမ်

10-25

400 / 27.5

SW-5222-025-SP (AQ)

33 ဂရမ်

10-25

400 / 27.5

SW-52222-040-SP (AQ)

48 ဂရမ်

15-30

400 / 27.5

SW-52222-080-SP (AQ)

105 ဂရမ်

25-50

350 / 24.0

SW-5222-120-SP (AQ)

155 ဂရမ်

30-60

300 / 20.7

SW-52222-220-SP (AQ)

300 ဂရမ်

40-80

300 / 20.7

SW-52222-330-SP (AQ)

420 ဂရမ်

40-80

250 / 17.2

ဇယား 2 ။ Sepaflash C18aq RP Cartridges ။ ထုပ်ပိုးပစ္စည်းများ - စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် c18 (AQ) -bonded silica, 20 - 45 μm, 100 - 4 μm, 100 ။

Sepabean ™စက်၏အသေးစိတ်အချက်အလက်များနှင့်ပတ်သက်သည့်နောက်ထပ်အချက်အလက်များအတွက် Sepaflash စီးရီး flash cartridges များအပေါ်ထားရှိသည့်သတင်းအချက်အလက်များကိုထပ်မံသိရှိလိုပါကကျွန်ုပ်တို့၏ဝက်ဘ်ဆိုက်ကိုကြည့်ပါ။


အချိန် Post အချိန် - အောက်တိုဘာ 12-2018