Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Applikazzjoni R&D Ċentru
Introduzzjoni
Taxus (Taxus chinensis jew yew Ċiniż) hija pjanta selvaġġa protetta mill-pajjiż.Hija pjanta rari u fil-periklu li tħalliet warajha l-glaċieri tal-Kwaternarju.Hija wkoll l-unika pjanta mediċinali naturali fid-dinja.Taxus huwa mqassam fiż-żona moderata tal-emisferu tat-tramuntana għar-reġjun subtropikali tan-nofs, b'madwar 11-il speċi fid-dinja.Hemm 4 speċi u varjetà 1 fiċ-Ċina, jiġifieri Taxus tal-Grigal, Yunnan Taxus, Taxus, Taxus Tibetan u Taxus tan-Nofsinhar.Dawn il-ħames speċi huma mqassma fil-Lbiċ taċ-Ċina, iċ-Ċina tan-Nofsinhar, iċ-Ċina Ċentrali, iċ-Ċina tal-Lvant, iċ-Ċina tal-Majjistral, iċ-Ċina tal-Grigal u t-Tajwan.Il-pjanti Taxus fihom varjetà wiesgħa ta 'komponenti kimiċi, inklużi taxanes, flavonoids, lignans, sterojdi, aċidi fenoliċi, sesquiterpenes u glycosides.Il-famuża droga kontra t-tumur Taxol (jew Paclitaxel) hija tip ta 'tassanes.Taxol għandu mekkaniżmi uniċi kontra l-kanċer.Taxol jista 'jiffriża l-mikrotubuli billi jgħaqqad magħhom u jipprevjeni lill-mikrotubuli milli jisseparaw il-kromożomi fil-ħin tad-diviżjoni taċ-ċelluli, u b'hekk iwassal għall-mewt taċ-ċelloli li jinqasmu, speċjalment iċ-ċelloli tal-kanċer li qed jipproliferu malajr[1].Barra minn hekk, billi jattiva l-makrofaġi, Taxol jikkawża tnaqqis fir-riċetturi tat-TNF-α (fattur tan-nekrożi tat-tumur) u rilaxx ta 'TNF-α, u b'hekk joqtol jew jinibixxi ċ-ċelloli tat-tumur[2].Barra minn hekk, Taxol jista' jinduċi apoptożi billi jaġixxi fuq il-passaġġ tar-riċettur apoptotiku medjat minn Fas/FasL jew jattiva s-sistema ta' cysteine protease[3].Minħabba l-effett kontra l-kanċer fil-mira multipla tiegħu, Taxol jintuża ħafna fit-trattament tal-kanċer tal-ovarji, kanċer tas-sider, kanċer tal-pulmun mhux taċ-ċelluli żgħar (NSCLC), kanċer gastriku, kanċer esophageal, kanċer tal-bużżieqa tal-awrina, kanċer tal-prostata, melanoma malinna, ras u għonq kanċer, eċċ[4].Speċjalment għal kanċer tas-sider avvanzat u kanċer tal-ovarji avvanzat, Taxol għandu effett kurattiv eċċellenti, għalhekk huwa magħruf bħala "l-aħħar linja ta 'difiża għat-trattament tal-kanċer".
Taxol huwa l-iktar mediċina kontra l-kanċer popolari fis-suq internazzjonali f'dawn l-aħħar snin u hija meqjusa bħala waħda mill-aktar mediċini kontra l-kanċer effettivi għall-bnedmin fl-20 sena li ġejjin.F'dawn l-aħħar snin, bit-tkabbir splussiv tal-popolazzjoni u l-inċidenza tal-kanċer, id-domanda għal Taxol żdiedet ukoll b'mod sinifikanti.Bħalissa, Taxol meħtieġ għal riċerka klinika jew xjentifika huwa prinċipalment estratt direttament minn Taxus.Sfortunatament, il-kontenut ta 'Taxol fil-pjanti huwa pjuttost baxx.Pereżempju, il-kontenut ta 'Taxol huwa biss 0.069% fil-qoxra ta' Taxus brevifolia, li ġeneralment titqies li għandha l-ogħla kontenut.Għall-estrazzjoni ta '1 g ta' Taxol, jeħtieġ madwar 13.6 kg ta 'qoxra Taxus.Ibbażat fuq din l-istima, jeħtieġ 3 – 12-il siġra Taxus li għandhom aktar minn 100 sena biex jittrattaw pazjent tal-kanċer tal-ovarji.B’riżultat ta’ dan, inqatgħu numru kbir ta’ siġar tat-Taxus, li rriżulta fi kważi l-estinzjoni għal din l-ispeċi prezzjuża.Barra minn hekk, Taxus huwa fqir ħafna fir-riżorsi u bil-mod fit-tkabbir, li jagħmilha diffiċli għal aktar żvilupp u utilizzazzjoni ta 'Taxol.
Fil-preżent, is-sinteżi totali ta 'Taxol tlestiet b'suċċess.Madankollu, ir-rotta sintetika tagħha hija kumplessa ħafna u ta 'spiża għolja, li tagħmilha m'għandhiex importanza industrijali.Il-metodu semi-sintetiku ta 'Taxol issa huwa relattivament matur u huwa meqjus bħala mod effettiv biex jespandi s-sors ta' Taxol minbarra tħawwil artifiċjali.Fil-qosor, fis-semi-sintesi ta 'Taxol, il-kompost prekursur Taxol li huwa relattivament abbundanti fil-pjanti Taxus jiġi estratt u mbagħad ikkonvertit f'Taxol permezz ta' sinteżi kimika.Il-kontenut ta '10-deacetylbaccatin Ⅲ fil-labar ta' Taxus baccata jista 'jkun sa 0.1%.U l-labar huma faċli biex jiġu riġenerati meta mqabbla mal-qoxra.Għalhekk, is-semi-sinteżi ta 'Taxol ibbażata fuq 10-deacetylbaccatin Ⅲ qed tattira aktar u aktar attenzjoni mir-riċerkaturi[5] (kif muri fil-Figura 1).
Figura 1. Ir-rotta semi-sintetika ta 'Taxol ibbażata fuq 10-deacetylbaccatin Ⅲ.
F'din il-kariga, l-estratt tal-pjanti Taxus ġie ppurifikat permezz ta 'sistema ta' kromatografija likwida preparattiva flash SepaBean™ magna flimkien ma 'skrataċ flash SepaFlash C18 b'fażi inversa (RP) prodotti minn Santai Technologies.Il-prodott immirat li jissodisfa r-rekwiżiti tal-purità nkiseb u jista 'jintuża f'riċerka xjentifika sussegwenti, li joffri soluzzjoni kosteffettiva għall-purifikazzjoni rapida ta' dan it-tip ta 'prodotti naturali.
| Strument | Magna SepaBean™ | |
| Skartoċċ | Skartoċċ flash SepaFlash C18 RP 12 g (silika sferika, 20 - 45μm, 100 Å, Numru tal-ordni: SW-5222-012-SP) | |
| Tul tal-mewġ | 254 nm (skoperta), 280 nm (monitoraġġ) | |
| Fażi mobbli | Solvent A: Ilma | |
| Solvent B: Metanol | ||
| Rata tal-fluss | 15 mL/min | |
| Tagħbija tal-kampjun | 20 mg kampjun mhux maħdum maħlul f'1 mL DMSO | |
| Gradjent | Ħin (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Riżultati u diskussjoni
Il-kromatogramma flash għall-estratt mhux raffinat minn Taxus intweriet fil-Figura 2. Billi analizzat il-kromatogramma, il-prodott fil-mira u l-impuritajiet kisbu separazzjoni tal-linja bażi.Barra minn hekk, riproduċibbiltà tajba ġiet ukoll realizzata minn injezzjonijiet ta 'kampjuni multipli (dejta mhux murija).Se tieħu madwar 4 sigħat biex tlesti s-separazzjoni fil-metodu tal-kromatografija manwali b'kolonni tal-ħġieġ.Meta tqabbel mal-metodu ta 'kromatografija manwali tradizzjonali, il-metodu ta' purifikazzjoni awtomatiku f'din il-kariga jeħtieġ biss 44 minuta biex jitlesta l-kompitu kollu ta 'purifikazzjoni (kif muri fil-Figura 3).Aktar minn 80% tal-ħin u ammont kbir ta 'solvent jistgħu jiġu ffrankati billi jittieħed metodu awtomatiku, li jista' effettivament inaqqas l-ispiża kif ukoll itejjeb ħafna l-effiċjenza tax-xogħol.
Figura 2. Il-flash chromatogram ta 'estratt mhux raffinat minn Taxus.
Figura 3. It-tqabbil tal-metodu tal-kromatografija manwali mal-metodu ta 'purifikazzjoni awtomatiku.
Bħala konklużjoni, il-combing tal-iskrataċ tal-flash SepaFlash C18 RP bil-magna SepaBean™ tista 'toffri soluzzjoni veloċi u effiċjenti għall-purifikazzjoni rapida ta' prodotti naturali bħall-estratt Taxus.
Referenzi
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D u Nogales E. Strutturi ta 'mikrotubuli b'riżoluzzjoni għolja jiżvelaw it-tranżizzjonijiet strutturali f'αβ-tubulin fuq idroliżi GTP.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS u Horwitz SB.Relazzjoni bejn l-Istruttura ta 'Taxol u Taxanes Oħra dwar l-Induzzjoni tal-Fattur ta' Necrosis Tumur-α Espressjoni tal-Ġene u Ċitotossiċità.Riċerka dwar il-Kanċer, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A u Safa AR.Taxol Induċi Apoptożi dipendenti fuq Caspase-10, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.Is-Soċjetà Amerikana tal-Ispiżjara tas-Sistema tas-Saħħa.[2 ta’ Jannar 2015]
5. Bruce Ganem u Roland R. Franke.Paclitaxel minn Taxanes Primarji: Perspettiva dwar Invenzjoni Kreattiva fil-Kimika tal-Organozirkonju.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Hemm serje ta 'skrataċ flash SepaFlash C18 RP bi speċifikazzjonijiet differenti minn Santai Technology (kif muri fit-Tabella 2).
| Numru tal-Oġġett | Daqs tal-Kolonna | Rata tal-Fluss (mL/min) | Max.Pressjoni (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabella 2. Skrataċ flash SepaFlash C18 RP.
Materjali tal-ippakkjar: Silika sferika ta' effiċjenza għolja C18-bonded, 20 - 45 μm, 100 Å
Għal aktar informazzjoni dwar speċifikazzjonijiet dettaljati tal-magna SepaBean™, jew l-informazzjoni dwar l-ordnijiet dwar l-iskrataċ flash tas-serje SepaFlash, jekk jogħġbok żur il-websajt tagħna
Ħin tal-post: Settembru-20-2018