Mingzu Yang, Bo Xu
Applikazzjoni R&D Ċentru
Introduzzjoni
L-antibijotiċi huma klassi ta' metaboliti sekondarji prodotti minn mikro-organiżmi (inklużi batterji, fungi, actinomycetes) jew komposti simili li huma sintetizzati kimikament jew semi-sintetizzati.L-antibijotiċi jistgħu jinibixxu t-tkabbir u s-sopravivenza ta 'mikro-organiżmi oħra.L-ewwel antibijotiku skopert mill-bniedem, il-peniċillina, ġie skopert mill-mikrobiologu Brittaniku Alexander Fleming fl-1928. Huwa osserva li l-batterji fil-viċinanza tal-moffa ma setgħux jikbru fid-dixx tal-kultura staphylococcus li kien ikkontaminat bil-moffa.Huwa postula li l-moffa trid tnixxi sustanza antibatterika, li sejjaħ peniċillina fl-1928. Madankollu, l-ingredjenti attivi ma kinux ippurifikati f'dak iż-żmien.Fl-1939, Ernst Chain u Howard Florey ta 'l-Università ta' Oxford iddeċidew li jiżviluppaw mediċina li tista 'tikkura infezzjonijiet batteriċi.Wara li kkuntattjaw lil Fleming biex jiksbu razez, estratt u purifikat b'suċċess il-peniċillina mir-razez.Għall-iżvilupp b'suċċess tagħhom tal-peniċillina bħala mediċina terapewtika, Fleming, Chain u Florey qasmu l-Premju Nobel għall-Mediċina tal-1945.
L-antibijotiċi jintużaw bħala aġenti antibatteriċi biex jittrattaw jew jipprevjenu infezzjonijiet batteriċi.Hemm diversi kategoriji ewlenin ta 'antibijotiċi użati bħala aġenti antibatteriċi: antibijotiċi β-lactam (inklużi peniċillina, cephalosporin, eċċ.), antibijotiċi aminoglycoside, antibijotiċi makrolidi, antibijotiċi tetracycline, chloramphenicol (antibijotiku sintetiku totali), eċċ. Is-sorsi ta' antibijotiċi jinkludu fermentazzjoni bijoloġika, semi-sinteżi u sinteżi totali.L-antibijotiċi prodotti mill-fermentazzjoni bijoloġika jeħtieġ li jiġu modifikati strutturalment b'metodi kimiċi minħabba stabbiltà kimika, effetti sekondarji tossiċi, spettru antibatteriku u kwistjonijiet oħra.Wara modifikati kimikament, l-antibijotiċi jistgħu jiksbu stabbiltà akbar, effetti sekondarji tossiċi mnaqqsa, spettru antibatteriku estiż, reżistenza mnaqqsa għall-mediċina, bijodisponibilità mtejba, u b'hekk effett imtejjeb tat-trattament tad-droga.Għalhekk, antibijotiċi semi-sintetiċi bħalissa huma l-aktar direzzjoni popolari fl-iżvilupp ta 'mediċini antibijotiċi.
Fl-iżvilupp ta 'antibijotiċi semi-sintetiċi, l-antibijotiċi għandhom il-proprjetajiet ta' purità baxxa, lottijiet ta 'prodotti sekondarji u komponenti kumplessi peress li huma derivati minn prodotti ta' fermentazzjoni mikrobjali.F'dan il-każ, l-analiżi u l-kontroll tal-impuritajiet f'antibijotiċi semi-sintetiċi huma partikolarment importanti.Sabiex jiġu identifikati u kkaratterizzati b'mod effettiv l-impuritajiet, huwa meħtieġ li jinkiseb ammont suffiċjenti ta 'impuritajiet mill-prodott sintetiku ta' antibijotiċi semi-sintetiċi.Fost it-tekniki ta 'preparazzjoni ta' impurità użati b'mod komuni, il-kromatografija flash hija metodu kost-effettiv b'vantaġġi bħal ammont kbir ta 'tagħbija ta' kampjun, prezz baxx, iffrankar ta 'ħin, eċċ. Il-kromatografija flash ġiet aktar u aktar impjegata minn riċerkaturi sintetiċi.
F'din il-kariga, l-impurità ewlenija ta 'antibijotiku semi-sintetiku aminoglycoside ġiet utilizzata bħala l-kampjun u ppurifikata minn skartoċċ SepaFlash C18AQ flimkien mal-magna SepaBean™ tas-sistema ta' kromatografija flash.Il-prodott immirat li jissodisfa r-rekwiżiti nkiseb b'suċċess, li jissuġġerixxi soluzzjoni effiċjenti ħafna għall-purifikazzjoni ta 'dawn il-komposti.
Taqsima Sperimentali
Il-kampjun ġie ġentilment ipprovdut minn kumpanija farmaċewtika lokali.Il-kampjun kien tip ta 'karboidrati poliċikliċi amino u l-istruttura molekulari tiegħu kienet simili ma' antibijotiċi aminoglycoside.Il-polarità tal-kampjun kienet pjuttost għolja, li tagħmilha solubbli ħafna fl-ilma.Id-dijagramma skematika tal-istruttura molekulari tal-kampjun kienet murija fil-Figura 1. Il-purità tal-kampjun mhux maħdum kienet ta 'madwar 88% kif analizzat mill-HPLC.Għall-purifikazzjoni ta 'dawn il-komposti ta' polarità għolja, il-kampjun bilkemm jinżamm fuq il-kolonni regolari C18 skont l-esperjenzi preċedenti tagħna.Għalhekk, kolonna C18AQ ġiet impjegata għall-purifikazzjoni tal-kampjun.
Figura 1. Id-dijagramma skematika tal-istruttura molekulari tal-kampjun.
Biex tipprepara s-soluzzjoni tal-kampjun, 50 mg kampjun mhux raffinat ġie maħlul f'5 mL ilma pur u mbagħad ultrasonikat sabiex issir soluzzjoni kompletament ċara.Is-soluzzjoni tal-kampjun imbagħad ġiet injettata fil-kolonna flash b'injettur.Is-setup sperimentali tal-purifikazzjoni flash kienet elenkata fit-Tabella 1.
| Strument | Magna SepaBean™ 2 | |
| Skrataċ | Skartoċċ flash SepaFlash C18AQ RP 12 g (silika sferika, 20 - 45μm, 100 Å, Numru tal-ordni: SW-5222-012-SP(AQ)) | |
| Tul tal-mewġ | 204 nm, 220 nm | |
| Fażi mobbli | Solvent A: Ilma Solvent B: Aċetonitrile | |
| Rata tal-fluss | 15 mL/min | |
| Tagħbija tal-kampjun | 50 mg | |
| Gradjent | Ħin (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Riżultati u diskussjoni
Il-kromatogramma flash tal-kampjun fuq l-iskartoċċ C18AQ kienet murija fil-Figura 2. Kif muri fil-Figura 2, il-kampjun polari ħafna nżamm b'mod effettiv fuq l-iskartoċċ C18AQ.Wara lijofolizzazzjoni għall-frazzjonijiet miġbura, il-prodott fil-mira kellu purità ta '96.2% (kif muri fil-Figura 3) permezz ta' analiżi HPLC.Ir-riżultati indikaw li l-prodott purifikat jista 'jiġi utilizzat aktar fil-pass li jmiss ta' riċerka u żvilupp.
Figura 2. Il-kromatogramma flash tal-kampjun fuq skartoċċ C18AQ.
Figura 3. Il-kromatogramma HPLC tal-prodott fil-mira.
Bħala konklużjoni, l-iskartoċċ flash SepaFlash C18AQ RP flimkien mas-sistema ta 'kromatografija flash SepaBean™ magna jistgħu joffru soluzzjoni veloċi u effettiva għall-purifikazzjoni ta' kampjuni polari ħafna.
Dwar il-flash cartridges SepaFlash C18AQ RP
Hemm serje ta 'skrataċ flash SepaFlash C18AQ RP bi speċifikazzjonijiet differenti minn Santai Technology (kif muri fit-Tabella 2).
| Numru tal-Oġġett | Daqs tal-Kolonna | Rata tal-Fluss (mL/min) | Max.Pressjoni (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabella 2. Skrataċ flash SepaFlash C18AQ RP.Materjali tal-ippakkjar: Silika sferika ta 'effiċjenza għolja C18(AQ)-bonded, 20 - 45 μm, 100 Å.
Għal aktar informazzjoni dwar speċifikazzjonijiet dettaljati tal-magna SepaBean™, jew l-informazzjoni dwar l-ordnijiet dwar l-iskrataċ flash tas-serje SepaFlash, jekk jogħġbok żur il-websajt tagħna.
Ħin tal-post: Ottubru-26-2018