Mingzu Yang, Bo Xu
Ċentru tal-Applikazzjoni R&D
Introduzzjoni
L-antibijotiċi huma klassi ta 'metaboliti sekondarji prodotti minn mikro-organiżmi (inklużi batterji, fungi, actinomycetes) jew komposti simili li huma sintetizzati kimikament jew semi-sintetizzati. L-antibijotiċi jistgħu jinibixxu t-tkabbir u s-sopravivenza ta 'mikro-organiżmi oħra. L-ewwel antibijotiku skopert mill-bniedem, il-peniċillina, ġie skopert mill-mikrobijologu Ingliż Alexander Fleming fl-1928. Huwa osserva li l-batterja fil-viċinanza tal-moffa ma setgħetx tikber fid-dixx tal-kultura Staphylococcus li kien ikkontaminat bil-moffa. Huwa postula li l-moffa għandha tnixxi sustanza antibatterika, li hu jismu Penicillin fl-1928. Madankollu, l-ingredjenti attivi ma ġewx ippurifikati dak iż-żmien. Fl-1939, Ernst Chain u Howard Florey tal-Università ta ’Oxford iddeċidew li jiżviluppaw mediċina li tista’ tittratta infezzjonijiet batteriċi. Wara li jikkuntattjaw lil Fleming biex jiksbu razez, huma estratti b'suċċess u ppurifikati peniċillina mir-razez. Għall-iżvilupp b'suċċess tagħhom ta 'peniċillina bħala mediċina terapewtika, Fleming, Chain u Florey qasmu l-Premju Nobel tal-1945 fil-mediċina.
L-antibijotiċi jintużaw bħala aġenti antibatteriċi biex jikkuraw jew jipprevjenu infezzjonijiet batteriċi. Hemm bosta kategoriji ewlenin ta 'antibijotiċi użati bħala aġenti antibatteriċi: antibijotiċi β-lactam (inklużi peniċillina, cefalosporin, eċċ.), Antibijotiċi ta' aminoglycoside, antibijotiċi macrolide, antibijotiċi tetracycline, kloramphenicol (antibijotiċi sintetiċi totali), u eċċ. Semi-sintesi u sinteżi totali. L-antibijotiċi prodotti mill-fermentazzjoni bijoloġika jeħtieġ li jiġu modifikati strutturalment permezz ta 'metodi kimiċi minħabba stabbiltà kimika, effetti sekondarji tossiċi, spettru antibatteriku u kwistjonijiet oħra. Wara modifikat kimikament, l-antibijotiċi jistgħu jiksbu stabbiltà akbar, imnaqqsa effetti sekondarji tossiċi, estiż spettru antibatteriku, reżistenza għall-mediċini mnaqqsa, bijodisponibilità mtejba, u b'hekk imtejjeb l-effett tat-trattament tad-droga. Għalhekk, l-antibijotiċi semi-sintetiċi bħalissa huma l-aktar direzzjoni popolari fl-iżvilupp ta 'mediċini antibijotiċi.
Fl-iżvilupp ta 'antibijotiċi semi-sintetiċi, l-antibijotiċi għandhom il-proprjetajiet ta' purità baxxa, ħafna prodotti sekondarji u komponenti kumplessi peress li huma derivati minn prodotti ta 'fermentazzjoni mikrobjali. F'dan il-każ, l-analiżi u l-kontroll ta 'l-impuritajiet f'antibijotiċi semi-sintetiċi huma partikolarment importanti. Sabiex tidentifika u tikkaratterizza b'mod effettiv l-impuritajiet, huwa meħtieġ li jinkiseb ammont suffiċjenti ta 'impuritajiet mill-prodott sintetiku ta' antibijotiċi semi-sintetiċi. Fost it-tekniki ta 'preparazzjoni ta' impurità użati b'mod komuni, il-kromatografija flash hemm metodu kosteffikaċi b'vantaġġi bħal ammont kbir ta 'tagħbija ta' kampjun, prezz baxx, iffrankar ta 'ħin, eċċ. Il-kromatografija flash kienet dejjem aktar impjegata minn riċerkaturi sintetiċi.
F'din il-kariga, l-impurità ewlenija ta 'antibijotiku ta' aminoglycosid semi-sintetiku ġiet użata bħala l-kampjun u ppurifikata minn skartoċċ Sepaflash C18AQ flimkien mas-sistema tal-kromatografija flash sepabean ™. Il-prodott fil-mira li jissodisfa r-rekwiżiti nkiseb b'suċċess, li jissuġġerixxi soluzzjoni effiċjenti ħafna għall-purifikazzjoni ta 'dawn il-komposti.
Sezzjoni sperimentali
Il-kampjun kien ġentilment ipprovdut minn kumpanija farmaċewtika lokali. Il-kampjun kien tip ta 'karboidrati amminiċi poliċikliċi u l-istruttura molekulari tagħha kienet simili ma' antibijotiċi ta 'aminoglycoside. Il-polarità tal-kampjun kienet pjuttost għolja, u dan jagħmilha solubbli ħafna fl-ilma. Id-dijagramma skematika tal-istruttura molekulari tal-kampjun kienet murija fil-Figura 1. Il-purità tal-kampjun mhux maħdum kienet ta 'madwar 88% kif analizzat mill-HPLC. Għall-purifikazzjoni ta 'dawn il-komposti ta' polarità għolja, il-kampjun bilkemm jinżamm fuq il-kolonni C18 regolari skont l-esperjenzi preċedenti tagħna. Għalhekk, kolonna C18AQ kienet użata għall-purifikazzjoni tal-kampjun.
Figura 1. Id-dijagramma skematika tal-istruttura molekulari tal-kampjun.
Biex tħejji s-soluzzjoni tal-kampjun, 50 mg kampjun mhux raffinat ġie maħlul f'5 ml ilma pur u mbagħad ultrasonikat sabiex issir soluzzjoni kompletament ċara. Is-soluzzjoni tal-kampjun imbagħad ġiet injettata fil-kolonna tal-flash minn injettur. Is-setup sperimentali tal-purifikazzjoni tal-flash ġie elenkat fit-Tabella 1.
| Strument | Sepabean ™ Machine 2 | |
| Skartoċċi | 12 g Sepaflash C18AQ RP Flash Cartridge (silika sferika, 20 - 45μm, 100 Å, numru tal-ordni ： SW-5222-012-SP (aq)) | |
| Tul tal-mewġa | 204 nm, 220 nm | |
| Fażi mobbli | Solvent A: Ilma Solvent B: Acetonitrile | |
| Rata tal-fluss | 15 ml / min | |
| Tagħbija tal-kampjun | 50 mg | |
| Gradjent | Ħin (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Riżultati u diskussjoni
Il-kromatogramma flash tal-kampjun fuq l-iskartoċċ C18AQ intwera fil-Figura 2. Kif muri fil-Figura 2, il-kampjun polari ħafna nżamm effettivament fuq l-iskartoċċ C18AQ. Wara l-lajofolizzazzjoni għall-frazzjonijiet miġbura, il-prodott fil-mira kellu purità ta '96 .2% (kif muri fil-Figura 3) bl-analiżi tal-HPLC. Ir-riżultati indikaw li l-prodott purifikat jista 'jintuża aktar fir-riċerka u l-iżvilupp tal-pass li jmiss.
Figura 2. Il-kromatogramma flash tal-kampjun fuq skartoċċ C18AQ.
Figura 3. Il-kromatogramma HPLC tal-prodott fil-mira.
Bħala konklużjoni, SEPAFLASH C18AQ RP Flash Cartridge flimkien mas-sistema tal-kromatografija flash sepabean ™ magna tista 'toffri soluzzjoni mgħaġġla u effettiva għall-purifikazzjoni ta' kampjuni polari ħafna.
Dwar is-sepaflash c18aq rp flash cartridges
Hemm serje ta 'skartoċċi tal-flash Sepaflash C18AQ RP bi speċifikazzjonijiet differenti mit-teknoloġija Santai (kif muri fit-Tabella 2).
| Numru tal-oġġett | Daqs tal-kolonna | Rata tal-fluss (ml / min) | Max.Pressure (psi / bar) |
| SW-5222-004-SP (aq) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (aq) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (aq) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-52222-220-SP (aq) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
Tabella 2. Sepaflash C18AQ RP Flash Cartridges. Materjali tal-ippakkjar: silika sferika ta 'effiċjenza għolja C18 (aq), 20 - 45 μm, 100 Å.
Għal aktar informazzjoni dwar l-ispeċifikazzjonijiet dettaljati tal-magna Sepabean ™, jew l-informazzjoni li tordna dwar l-iskrataċ tal-flash tas-serje Sepaflash, jekk jogħġbok żur il-websajt tagħna.
POST ĦIN: Ottubru-26-2018