L-applikazzjoni tal-kolonni C18AQ fil-purifikazzjoni ta 'peptidi polari b'saħħithom

Rui Huang, Bo Xu
Ċentru tal-Applikazzjoni R&D

Introduzzjoni
Peptide huwa kompost magħmul minn aċidi amminiċi, li kull wieħed minnhom għandu proprjetajiet fiżiċi u kimiċi uniċi minħabba t-tipi differenti u l-ordni ta 'residwi ta' aċidu amminiku li jikkostitwixxu s-sekwenza tiegħu. Bl-iżvilupp ta 'sinteżi kimika ta' fażi solida, is-sinteżi kimika ta 'diversi peptidi attivi għamlet progress kbir. Madankollu, minħabba l-kompożizzjoni kkumplikata tal-peptide miksub permezz ta 'sinteżi tal-fażi solida, il-prodott finali għandu jiġi ppurifikat permezz ta' metodi ta 'separazzjoni affidabbli. Il-metodi ta 'purifikazzjoni użati b'mod komuni għall-peptidi jinkludu kromatografija ta' skambju ta 'joni (IEC) u kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja b'fażi maqluba (RP-HPLC), li għandhom l-iżvantaġġi ta 'kapaċità baxxa ta' tagħbija ta 'kampjun, spiża għolja ta' mezzi ta 'separazzjoni, tagħmir ta' separazzjoni kkumplikat u għalja, eċċ. Għall-purifikazzjoni rapida ta 'peptidi ta' molekula żgħira (MW <1 KDA), applikazzjoni ta 'suċċess kienet ippubblikata qabel ippubblikat minn teknoloġiji ta' suċċess, li fih intuża skartoċċ Sepaflash RP C18 għall-purifikazzjoni rapida ta 'thymopentin (TP-5) u l-prodott fil-mira li jissodisfa r-rekwiżiti.

Figura 1. 20 aċidi amminiċi komuni (riprodotti minn www.bachem.com).

Hemm 20 tip ta 'aċidi amminiċi li huma komuni fil-kompożizzjoni tal-peptidi. Dawn l-aċidi amminiċi jistgħu jinqasmu fil-gruppi li ġejjin skont il-polarità tagħhom u l-propjetà ta 'aċidu-bażi: mhux polari (idrofobiċi), polari (mhux iċċarġjati), aċidużi jew bażiċi (kif muri fil-Figura 1). F'sekwenza ta 'peptidi, jekk l-aċidi amminiċi li jikkostitwixxu s-sekwenza huma l-aktar dawk polari (kif immarkati bil-kulur roża fil-Figura 1), bħal cysteine, glutamina, asparagine, serine, treonina, tyrosine, eċċ. Imbagħad dan il-peptide jista' jkollu polarità qawwija u jkun li jinħall ħafna fl-ilma. Matul il-proċedura ta 'purifikazzjoni għal dawn il-kampjuni ta' peptidi polari b'saħħithom permezz ta 'kromatografija b'fażi maqluba, se jseħħ fenomenu msejjaħ kollass tal-fażi idrofobika (irreferi għal nota ta' applikazzjoni ppubblikata qabel minn Santai Technologies: kollass tal-fażi idrofobika, Kolonni tal-kromatografija tal-fażi maqluba AQ u l-applikazzjonijiet tagħhom). Meta mqabbel mal-kolonni C18 regolari, il-kolonni mtejba C18AQ huma l-iktar adattati għall-purifikazzjoni ta 'kampjuni polari jew idrofiliċi b'saħħithom. F'din il-kariga, peptide polari qawwi ġie użat bħala l-kampjun u ppurifikat minn kolonna C18AQ. Bħala riżultat, il-prodott fil-mira li jissodisfa r-rekwiżiti nkiseb u jista 'jintuża fir-riċerka u l-iżvilupp li ġejjin.