Mingzu Yang, Bo Xu
Permohonan R & D Pusat
Pengenalan
Antibiotik adalah kelas metabolit sekunder yang dihasilkan oleh mikroorganisma (termasuk bakteria, kulat, actinomycetes) atau sebatian serupa yang disintesis secara kimia atau separa sintesis. Antibiotik boleh menghalang pertumbuhan dan kelangsungan hidup mikroorganisma lain. Antibiotik pertama yang ditemui oleh manusia, penisilin, ditemui oleh ahli mikrobiologi British Alexander Fleming pada tahun 1928. Dia mendapati bahawa bakteria di sekitar acuan tidak dapat tumbuh di hidangan budaya Staphylococcus yang tercemar dengan acuan. Dia mengumumkan bahawa acuan itu mesti merembeskan bahan antibakteria, yang mana dia menamakan penisilin pada tahun 1928. Walau bagaimanapun, bahan -bahan aktif tidak disucikan pada masa itu. Pada tahun 1939, rantaian Ernst dan Howard Florey dari Oxford University memutuskan untuk membangunkan ubat yang boleh merawat jangkitan bakteria. Selepas menghubungi Fleming untuk mendapatkan strain, mereka berjaya diekstrak dan disucikan penisilin dari strain. Untuk pembangunan penisilin mereka yang berjaya sebagai ubat terapeutik, Fleming, Chain dan Florey berkongsi Hadiah Nobel 1945 dalam bidang perubatan.
Antibiotik digunakan sebagai agen antibakteria untuk merawat atau mencegah jangkitan bakteria. Terdapat beberapa kategori utama antibiotik yang digunakan sebagai agen antibakteria: antibiotik β-laktam (termasuk penisilin, cephalosporin, dan lain-lain), antibiotik aminoglikosida, antibiotik makrolida, antibiotik dan antibiotik, antibiotik. Semi-sintesis dan sintesis total. Antibiotik yang dihasilkan oleh penapaian biologi perlu diubahsuai secara struktural oleh kaedah kimia akibat kestabilan kimia, kesan sampingan toksik, spektrum antibakteria dan isu -isu lain. Selepas diubah suai secara kimia, antibiotik dapat mencapai peningkatan kestabilan, mengurangkan kesan sampingan toksik, spektrum antibakteria yang diperluaskan, mengurangkan rintangan dadah, bioavailabiliti yang lebih baik, dan dengan itu meningkatkan kesan rawatan dadah. Oleh itu, antibiotik separa sintetik kini merupakan arah yang paling popular dalam pembangunan ubat-ubatan antibiotik.
Dalam perkembangan antibiotik separa sintetik, antibiotik mempunyai sifat kesucian yang rendah, banyak produk sampingan dan komponen kompleks kerana ia berasal dari produk penapaian mikrob. Dalam kes ini, analisis dan kawalan kekotoran dalam antibiotik separa sintetik sangat penting. Untuk mengenal pasti dan mencirikan kekotoran secara berkesan, adalah perlu untuk mendapatkan jumlah kekotoran yang mencukupi daripada produk sintetik antibiotik separa sintetik. Di antara teknik penyediaan kekotoran yang biasa digunakan, kromatografi kilat adalah kaedah kos efektif dengan kelebihan seperti jumlah pemuatan sampel yang besar, kos rendah, penjimatan masa, dan lain-lain. Kromatografi kilat semakin banyak digunakan oleh penyelidik sintetik.
Dalam jawatan ini, kekotoran utama antibiotik aminoglycoside separa sintetik digunakan sebagai sampel dan disucikan oleh kartrij C18AQ Sepaflash yang digabungkan dengan mesin kromatografi flash Sepabean ™ mesin. Produk sasaran yang memenuhi syarat -syarat telah berjaya diperolehi, menunjukkan penyelesaian yang sangat efisien untuk penyucian sebatian ini.
Bahagian eksperimen
Sampel itu disediakan oleh syarikat farmaseutikal tempatan. Sampel itu adalah sejenis karbohidrat polycyclic amino dan struktur molekulnya sama dengan antibiotik aminoglycoside. Polariti sampel agak tinggi, menjadikannya sangat larut dalam air. Gambarajah skematik struktur molekul sampel ditunjukkan dalam Rajah 1. Kesucian sampel mentah adalah kira -kira 88% seperti yang dianalisis oleh HPLC. Untuk penyucian sebatian polariti yang tinggi, sampel itu akan hampir tidak disimpan pada lajur C18 biasa mengikut pengalaman terdahulu kami. Oleh itu, lajur C18AQ digunakan untuk pembersihan sampel.
Rajah 1. Rajah skematik struktur molekul sampel.
Untuk menyediakan penyelesaian sampel, sampel 50 mg mentah dibubarkan dalam 5 ml air tulen dan kemudian ultrasonicated untuk menjadikannya menjadi penyelesaian yang jelas. Penyelesaian sampel kemudian disuntik ke dalam lajur Flash oleh penyuntik. Persediaan eksperimen pemurnian kilat disenaraikan dalam Jadual 1.
| Instrumen | Mesin Sepabean ™ 2 | |
| Kartrij | 12 G Sepaflash C18AQ RP Kartrij Flash (Silika Sfera, 20-45μm, 100 Å, Nombor Pesanan: SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| Panjang gelombang | 204 nm, 220 nm | |
| Fasa mudah alih | Pelarut A: air Pelarut B: Acetonitrile | |
| Kadar aliran | 15 ml/min | |
| Memuatkan sampel | 50 mg | |
| Kecerunan | Masa (min) | Pelarut b (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
Keputusan dan perbincangan
Kromatogram flash sampel pada kartrij C18AQ ditunjukkan dalam Rajah 2. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, sampel yang sangat kutub telah dikekalkan dengan berkesan pada kartrij C18AQ. Selepas lyopholization untuk pecahan yang dikumpulkan, produk sasaran mempunyai kesucian 96.2% (seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3) oleh analisis HPLC. Hasilnya menunjukkan bahawa produk yang disucikan dapat digunakan lagi dalam penyelidikan dan pembangunan langkah seterusnya.
Rajah 2. Kromatogram flash sampel pada kartrij C18AQ.
Rajah 3. Kromatogram HPLC produk sasaran.
Kesimpulannya, kartrij flash Sepaflash C18AQ RP yang digabungkan dengan sistem kromatografi Flash Sepabean ™ boleh menawarkan penyelesaian yang cepat dan berkesan untuk pemurnian sampel yang sangat kutub.
Mengenai kartrij flash c18aq sepflash
Terdapat satu siri kartrij flash Sepaflash C18AQ dengan spesifikasi yang berbeza dari teknologi SAITAI (seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 2).
| Nombor item | Saiz lajur | Kadar aliran (ml/min) | Max.pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (aq) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (aq) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (aq) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (aq) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (aq) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-52222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (aq) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Jadual 2. Sepaflash C18AQ RP Kartrij Flash. Bahan Pembungkusan: Silika Silika Sfera C18 (AQ), 20-45 μm, 100 Å.
Untuk maklumat lanjut mengenai spesifikasi terperinci mesin Sepabean ™, atau maklumat pesanan mengenai kartrij flash siri Sepaflash, sila lawati laman web kami.
Masa Post: Okt-26-2018