रुई हुआंग, बो झू
अर्ज R&D केंद्र
परिचय
आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी (आयईसी) ही एक क्रोमॅटोग्राफिक पद्धत आहे जी सामान्यतः द्रावणात आयनिक स्वरूपात सादर केलेली संयुगे विभक्त आणि शुद्ध करण्यासाठी वापरली जाते.एक्सचेंज करण्यायोग्य आयनच्या वेगवेगळ्या चार्ज अवस्थांनुसार, IEC दोन प्रकारांमध्ये विभागले जाऊ शकते, केशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी आणि आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी.केशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, अम्लीय गट पृथक्करण माध्यमाच्या पृष्ठभागाशी जोडलेले असतात.उदाहरणार्थ, सल्फोनिक ऍसिड (-SO3H) हा स्ट्राँग कॅशन एक्सचेंज (SCX) मध्ये सामान्यतः वापरला जाणारा गट आहे, जो H+ वेगळे करतो आणि नकारात्मक चार्ज केलेला समूह -SO3- अशा प्रकारे द्रावणातील इतर केशन शोषू शकतो.आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, अल्कधर्मी गट पृथक्करण माध्यमाच्या पृष्ठभागाशी जोडलेले असतात.उदाहरणार्थ, चतुर्थांश अमाईन (-NR3OH, जेथे R हा हायड्रोकार्बन गट आहे) सामान्यतः मजबूत आयन एक्सचेंज (SAX) मध्ये वापरला जातो, जो OH- विलग करतो आणि सकारात्मक चार्ज केलेला गट -N+R3 द्रावणातील इतर आयन शोषू शकतो, परिणामी आयनॉन तयार होतो. विनिमय प्रभाव.
नैसर्गिक उत्पादनांपैकी, फ्लेव्होनॉइड्सने संशोधकांचे लक्ष वेधून घेतले आहे कारण हृदय व रक्तवाहिन्यासंबंधी रोगांच्या प्रतिबंध आणि उपचारांमध्ये त्यांची भूमिका आहे.फिनोलिक हायड्रॉक्सिल गटांच्या उपस्थितीमुळे फ्लेव्होनॉइड रेणू अम्लीय असल्याने, या आम्लीय संयुगे वेगळे करण्यासाठी आणि शुद्धीकरणासाठी पारंपारिक सामान्य फेज किंवा रिव्हर्स्ड फेज क्रोमॅटोग्राफी व्यतिरिक्त आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी हा पर्यायी पर्याय आहे.फ्लॅश क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, आयन एक्सचेंजसाठी सामान्यतः वापरले जाणारे पृथक्करण माध्यम सिलिका जेल मॅट्रिक्स आहे जेथे आयन एक्सचेंज गट त्याच्या पृष्ठभागाशी जोडलेले असतात.फ्लॅश क्रोमॅटोग्राफीमध्ये सर्वात सामान्यपणे वापरल्या जाणाऱ्या आयन एक्सचेंज मोड्स आहेत SCX (सामान्यतः सल्फोनिक ऍसिड ग्रुप) आणि SAX (सामान्यत: क्वाटरनरी अमाइन ग्रुप).संताई टेक्नॉलॉजीज द्वारे "द ॲप्लिकेशन ऑफ सेपाफ्लॅश स्ट्राँग कॅशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी कॉलम्स इन द प्युरिफिकेशन ऑफ अल्कलाइन कंपाऊंड्स" या शीर्षकासह यापूर्वी प्रकाशित केलेल्या ऍप्लिकेशन नोटमध्ये, SCX कॉलम्स अल्कधर्मी संयुगे शुद्धीकरणासाठी वापरण्यात आले होते.या पोस्टमध्ये, अम्लीय यौगिकांच्या शुद्धीकरणामध्ये SAX स्तंभांचा वापर शोधण्यासाठी नमुना म्हणून तटस्थ आणि अम्लीय मानकांचे मिश्रण वापरले गेले.
प्रायोगिक विभाग
आकृती 1. SAX पृथक्करण माध्यमाच्या पृष्ठभागाशी जोडलेल्या स्थिर टप्प्याचे योजनाबद्ध आकृती.
या पोस्टमध्ये, क्वाटरनरी अमाइन बॉन्डेड सिलिकासह पूर्व-पॅक केलेला SAX स्तंभ वापरला गेला (आकृती 1 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे).क्रोमोन आणि 2,4-डायहायड्रॉक्सीबेंझोइक ऍसिडचे मिश्रण शुद्ध करण्यासाठी नमुना म्हणून वापरले गेले (आकृती 2 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे).हे मिश्रण मिथेनॉलमध्ये विरघळले गेले आणि इंजेक्टरद्वारे फ्लॅश कार्ट्रिजवर लोड केले गेले.फ्लॅश शुद्धीकरणाचा प्रायोगिक सेटअप तक्ता 1 मध्ये सूचीबद्ध आहे.
आकृती 2. नमुना मिश्रणातील दोन घटकांची रासायनिक रचना.
| वाद्य | SepaBean™ मशीन T | |||||
| काडतुसे | 4 ग्रॅम SepaFlash मानक मालिका फ्लॅश काडतूस (अनियमित सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å, ऑर्डर क्रमांक: S-5101-0004) | 4 g SepaFlash बॉन्डेड मालिका SAX फ्लॅश काडतूस (अनियमित सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å, ऑर्डर क्रमांक：SW-5001-004-IR) | ||||
| तरंगलांबी | 254 एनएम (डिटेक्शन), 280 एनएम (निरीक्षण) | |||||
| मोबाइल टप्पा | सॉल्व्हेंट ए: एन-हेक्सेन | |||||
| सॉल्व्हेंट बी: इथाइल एसीटेट | ||||||
| प्रवाह दर | 30 मिली/मिनिट | 20 मिली/मिनिट | ||||
| नमुना लोड करत आहे | 20 मिग्रॅ (घटक A आणि घटक B चे मिश्रण) | |||||
| प्रवण | वेळ (CV) | सॉल्व्हेंट बी (%) | वेळ (CV) | सॉल्व्हेंट बी (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| १.७ | 12 | 14 | 100 | |||
| ३.७ | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
परिणाम आणि चर्चा
प्रथम, नमुना मिश्रण नियमित सिलिकासह प्री-पॅक केलेल्या सामान्य फेज फ्लॅश काडतूसद्वारे वेगळे केले गेले.आकृती 3 मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, नमुन्यातील दोन घटक एकामागून एक काडतूसमधून बाहेर काढले गेले.पुढे, नमुन्याच्या शुद्धीकरणासाठी SAX फ्लॅश काडतूस वापरण्यात आले.आकृती 4 मध्ये दाखवल्याप्रमाणे, SAX कार्ट्रिजवर आम्लीय घटक B पूर्णपणे राखून ठेवला होता.मोबाइल फेजच्या उत्सर्जनासह काडतूसमधून न्यूट्रल घटक A हळूहळू काढला गेला.
आकृती 3. नियमित सामान्य फेज कार्ट्रिजवरील नमुन्याचा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम.
आकृती 4. SAX कार्ट्रिजवरील नमुन्याचा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम.
आकृती 3 आणि आकृती 4 ची तुलना करताना, घटक A मध्ये दोन भिन्न फ्लॅश काडतुसे वर विसंगत शिखर आकार आहे.एल्युशन पीक घटकाशी संबंधित आहे की नाही याची पुष्टी करण्यासाठी, आम्ही SepaBean™ मशीनच्या कंट्रोल सॉफ्टवेअरमध्ये तयार केलेल्या संपूर्ण तरंगलांबी स्कॅनिंग वैशिष्ट्याचा वापर करू शकतो.दोन पृथक्करणांचा प्रायोगिक डेटा उघडा, क्रोमॅटोग्राममधील टाइम अक्ष (CV) वरील निर्देशक रेषेकडे सर्वोच्च बिंदूपर्यंत आणि घटक A शी संबंधित उत्सर्जन शिखराच्या दुसऱ्या सर्वोच्च बिंदूवर ड्रॅग करा आणि या दोघांचा पूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम. गुण क्रोमॅटोग्रामच्या खाली स्वयंचलितपणे दर्शविले जातील (आकृती 5 आणि आकृती 6 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे).या दोन पृथक्करणांच्या संपूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम डेटाची तुलना करताना, घटक A मध्ये दोन प्रयोगांमध्ये सातत्यपूर्ण अवशोषण स्पेक्ट्रम आहे.घटक A च्या दोन भिन्न फ्लॅश काडतुसांवर विसंगत शिखर आकार असल्याच्या कारणास्तव, असा अंदाज आहे की घटक A मध्ये विशिष्ट अशुद्धता आहे ज्याची सामान्य फेज कार्ट्रिज आणि SAX कार्ट्रिजवर भिन्न धारणा आहे.म्हणून, घटक A साठी इल्युटिंग अनुक्रम भिन्न आहे आणि या दोन फ्लॅश काडतुसेवरील अशुद्धता, परिणामी क्रोमॅटोग्रामवर विसंगत शिखर आकार आहे.
आकृती 5. घटक A चे पूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम आणि सामान्य फेज कार्ट्रिजद्वारे विभक्त केलेली अशुद्धता.
आकृती 6. घटक A चे पूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम आणि SAX कार्ट्रिजद्वारे विभक्त केलेली अशुद्धता.
संकलित केले जाणारे लक्ष्य उत्पादन तटस्थ घटक A असल्यास, नमुना लोड केल्यानंतर सोल्युशनसाठी SAX कार्ट्रिजचा थेट वापर करून शुद्धीकरण कार्य सहजपणे पूर्ण केले जाऊ शकते.दुसरीकडे, संकलित केले जाणारे लक्ष्य उत्पादन आम्लीय घटक बी असल्यास, प्रायोगिक चरणांमध्ये फक्त थोड्या समायोजनासह कॅप्चर-रिलीझ पद्धत अवलंबली जाऊ शकते: जेव्हा नमुना SAX काडतूस आणि तटस्थ घटक A वर लोड केला जातो. सामान्य फेज ऑर्गेनिक सॉल्व्हेंट्सने पूर्णपणे काढून टाकले होते, मोबाइल फेजला 5% एसिटिक ऍसिड असलेल्या मिथेनॉल सोल्यूशनवर स्विच करा.मोबाइल फेजमधील एसीटेट आयन SAX कार्ट्रिजच्या स्थिर टप्प्यावर चतुर्थांश अमाईन आयन गटांना बंधनकारक करण्यासाठी घटक B शी स्पर्धा करतील, ज्यामुळे लक्ष्य उत्पादन मिळविण्यासाठी काडतूसमधून घटक B दूर होईल.आयन एक्सचेंज मोडमध्ये विभक्त नमुन्याचा क्रोमॅटोग्राम आकृती 7 मध्ये दर्शविला गेला.
आकृती 7. घटक B चा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम SAX कार्ट्रिजवर आयन एक्सचेंज मोडमध्ये उलगडला आहे.
शेवटी, आम्लयुक्त किंवा तटस्थ नमुना SAX कार्ट्रिजद्वारे सामान्य फेज कार्ट्रिजसह वेगवेगळ्या शुद्धीकरण धोरणांचा वापर करून जलद शुद्ध केले जाऊ शकते.शिवाय, SepaBean™ मशीनच्या कंट्रोल सॉफ्टवेअरमध्ये तयार केलेल्या संपूर्ण तरंगलांबी स्कॅनिंग वैशिष्ट्याच्या मदतीने, इल्युटेड अपूर्णांकांच्या वैशिष्ट्यपूर्ण अवशोषण स्पेक्ट्रमची सहज तुलना आणि पुष्टी केली जाऊ शकते, ज्यामुळे संशोधकांना इल्युटेड अपूर्णांकांची रचना आणि शुद्धता त्वरीत निर्धारित करण्यात मदत होते आणि त्यामुळे सुधारणा होते. कामाची कार्यक्षमता.
| आयटम क्रमांक | स्तंभ आकार | प्रवाह दर (mL/min) | कमाल.दाब (पीएसआय/बार) |
| SW-5001-004-IR | ५.९ ग्रॅम | 10-20 | ४००/२७.५ |
| SW-5001-012-IR | 23 ग्रॅम | 15-30 | ४००/२७.५ |
| SW-5001-025-IR | 38 ग्रॅम | 15-30 | ४००/२७.५ |
| SW-5001-040-IR | 55 ग्रॅम | 20-40 | ४००/२७.५ |
| SW-5001-080-IR | 122 ग्रॅम | 30-60 | ३५०/२४.० |
| SW-5001-120-IR | 180 ग्रॅम | 40-80 | ३००/२०.७ |
| SW-5001-220-IR | 340 ग्रॅम | 50-100 | ३००/२०.७ |
| SW-5001-330-IR | 475 ग्रॅम | 50-100 | 250/17.2
|
तक्ता 2. SepaFlash बॉन्डेड सीरीज SAX फ्लॅश काडतुसे.पॅकिंग साहित्य: अल्ट्रा-प्युअर अनियमित SAX-बॉन्डेड सिलिका, 40 - 63 μm, 60 Å.
SepaBean™ च्या तपशीलवार वैशिष्ट्यांबद्दल अधिक माहितीसाठीमशीन, किंवा SepaFlash मालिका फ्लॅश काडतुसे वरील ऑर्डरिंग माहिती, कृपया आमच्या वेबसाइटला भेट द्या.
पोस्ट वेळ: नोव्हेंबर-09-2018