रुई हुआंग, बो झू
अनुप्रयोग आर अँड डी सेंटर
परिचय
आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी (आयईसी) ही एक क्रोमॅटोग्राफिक पद्धत आहे जी सामान्यत: सोल्यूशनमध्ये आयनिक स्वरूपात सादर केलेल्या संयुगे वेगळे आणि शुद्ध करण्यासाठी वापरली जाते. एक्सचेंज करण्यायोग्य आयनच्या वेगवेगळ्या शुल्काच्या राज्यांनुसार, आयईसीला दोन प्रकारांमध्ये विभागले जाऊ शकते, कॅशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी आणि आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी. केशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, आम्ल गट विभक्त माध्यमांच्या पृष्ठभागावर बंधनकारक आहेत. उदाहरणार्थ, सल्फोनिक acid सिड (-एसओ 3 एच) एक सामान्यतः मजबूत केशन एक्सचेंज (एससीएक्स) मध्ये वापरला जाणारा गट आहे, जो एच+ आणि नकारात्मक चार्ज केलेला गट-एसओ 3- अशा प्रकारे द्रावणामध्ये इतर केशन्सला अनुकूल करू शकतो. आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, अल्कधर्मी गट विभक्त माध्यमांच्या पृष्ठभागावर बंधनकारक आहेत. उदाहरणार्थ, क्वाटरनरी अमाईन (-एनआर 3 ओएच, जेथे आर हायड्रोकार्बन ग्रुप आहे) सहसा मजबूत आयन एक्सचेंज (एसएएक्स) मध्ये वापरला जातो, जो ओएच- आणि सकारात्मक चार्ज केलेला गट -एन+आर 3 सोल्यूशनमध्ये इतर ions नीन्सला शोषून घेऊ शकतो, परिणामी एनिओन एक्सचेंज इफेक्टचा परिणाम होतो.
नैसर्गिक उत्पादनांमध्ये, हृदय व रक्तवाहिन्यासंबंधी रोगांच्या प्रतिबंध आणि उपचारांमध्ये त्यांच्या भूमिकेमुळे फ्लेव्होनॉइड्सने संशोधकांचे लक्ष वेधून घेतले आहे. फिनोलिक हायड्रॉक्सिल गटांच्या उपस्थितीमुळे फ्लेव्होनॉइड रेणू अम्लीय असल्याने, आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी हा पारंपारिक सामान्य टप्पा किंवा या आम्लिक संयुगेच्या विभक्ततेसाठी आणि उलट फेज क्रोमॅटोग्राफी व्यतिरिक्त एक पर्यायी पर्याय आहे. फ्लॅश क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, आयन एक्सचेंजसाठी सामान्यतः वापरल्या जाणार्‍या पृथक्करण माध्यमांमध्ये सिलिका जेल मॅट्रिक्स आहे जिथे आयन एक्सचेंज गट त्याच्या पृष्ठभागावर बंधनकारक आहेत. फ्लॅश क्रोमॅटोग्राफीमध्ये सर्वात सामान्यपणे वापरल्या जाणार्‍या आयन एक्सचेंज मोडमध्ये एससीएक्स (सामान्यत: सल्फोनिक acid सिड ग्रुप) आणि एसएएक्स (सामान्यत: क्वाटरनरी अमाइन ग्रुप) असतात. पूर्वी प्रकाशित केलेल्या अनुप्रयोग नोटमध्ये "सेपॅफ्लॅश स्ट्रॉंग केशन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी कॉलम ऑफ अल्कधर्मीय संयुगेच्या शुद्धीकरणातील अनुप्रयोग" सॅंटाई तंत्रज्ञानाद्वारे, एससीएक्स स्तंभ अल्कधर्मीय संयुगेच्या शुद्धीकरणासाठी कार्यरत होते. या पोस्टमध्ये, अम्लीय संयुगेच्या शुद्धीकरणात एसएएक्स स्तंभांच्या अनुप्रयोगाचा शोध घेण्यासाठी तटस्थ आणि अम्लीय मानकांचे मिश्रण नमुना म्हणून वापरले गेले.
प्रायोगिक विभाग
आकृती 1. स्थिर टप्प्यातील योजनाबद्ध आकृती एसएएक्स पृथक्करण माध्यमांच्या पृष्ठभागावर बंधनकारक आहे.
या पोस्टमध्ये, क्वाटरनरी अमाइन बॉन्ड सिलिकासह प्री-पॅक केलेला एक सॅक्स कॉलम वापरला गेला (आकृती 1 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे). क्रोमोन आणि 2,4-डायहाइड्रॉक्सीबेन्झोइक acid सिडचे मिश्रण शुद्ध करण्यासाठी नमुना म्हणून वापरले गेले (आकृती 2 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे). मिश्रण मिथेनॉलमध्ये विरघळली गेली आणि इंजेक्टरद्वारे फ्लॅश कार्ट्रिजवर लोड केली गेली. फ्लॅश शुध्दीकरणाचा प्रायोगिक सेटअप सारणी 1 मध्ये सूचीबद्ध आहे.
आकृती 2. नमुना मिश्रणातील दोन घटकांची रासायनिक रचना.
| साधन | सेपाबियन ™ मशीन टी | |||||
| काडतुसे | 4 ग्रॅम सेपफ्लॅश मानक मालिका फ्लॅश कार्ट्रिज (अनियमित सिलिका, 40-63 μ मी, 60 Å, ऑर्डर क्रमांक: एस -5101-0004) | 4 ग्रॅम सेपफ्लॅश बाँड्ड मालिका सॅक्स फ्लॅश कार्ट्रिज (अनियमित सिलिका, 40-63 μ मी, 60 Å, ऑर्डर क्रमांक ● एसडब्ल्यू -5001-004-आयआर) | ||||
| तरंगलांबी | 254 एनएम (शोध), 280 एनएम (देखरेख) | |||||
| मोबाइल टप्पा | सॉल्व्हेंट अ: एन-हेक्सेन | |||||
| सॉल्व्हेंट बी: इथिल एसीटेट | ||||||
| प्रवाह दर | 30 मिली/मिनिट | 20 मिली/मिनिट | ||||
| नमुना लोडिंग | 20 मिलीग्राम (घटक ए आणि घटक बी चे मिश्रण) | |||||
| ग्रेडियंट | वेळ (सीव्ही) | दिवाळखोर नसलेला बी (%) | वेळ (सीव्ही) | दिवाळखोर नसलेला बी (%) | ||
| 0 | 0 | 0 | 0 | |||
| 1.7 | 12 | 14 | 100 | |||
| 3.7 | 12 | / | / | |||
| 16 | 100 | / | / | |||
| 18 | 100 | / | / | |||
परिणाम आणि चर्चा
प्रथम, नमुना मिश्रण सामान्य फेज फ्लॅश कार्ट्रिजद्वारे नियमित सिलिकासह प्री-पॅकद्वारे विभक्त केले गेले. आकृती 3 मध्ये दर्शविल्यानुसार, नमुन्यातील दोन घटक एकामागून एक काडतूसमधून एलिट केले गेले. पुढे, नमुन्याच्या शुद्धीकरणासाठी एक सॅक्स फ्लॅश कार्ट्रिजचा वापर केला गेला. आकृती 4 मध्ये दर्शविल्यानुसार, एसएक्सएएक्स कार्ट्रिजवर आम्ल घटक बी पूर्णपणे कायम ठेवला गेला. तटस्थ घटक ए हळूहळू मोबाइल फेजच्या विघटनाने काडतूसमधून एलिट केले गेले.
आकृती 3. नियमित सामान्य फेज कारतूसवरील नमुन्याचा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम.
आकृती 4. सॅक्स कारतूसवरील नमुन्याचा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम.
आकृती 3 आणि आकृती 4 ची तुलना करणे, घटक ए मध्ये दोन भिन्न फ्लॅश काडतुसेवर विसंगत पीक आकार आहे. एलिशन पीक घटकाशी संबंधित आहे की नाही याची पुष्टी करण्यासाठी, आम्ही सेपाबियन ™ मशीनच्या नियंत्रण सॉफ्टवेअरमध्ये तयार केलेल्या पूर्ण तरंगलांबी स्कॅनिंग वैशिष्ट्याचा वापर करू शकतो. दोन विभक्ततेचा प्रायोगिक डेटा उघडा, क्रोमॅटोग्राममधील टाइम अक्ष (सीव्ही) वर निर्देशक रेषेवर ड्रॅग करा उच्च बिंदूवर आणि घटक एशी संबंधित एलिशन पीकचा दुसरा उच्च बिंदू आणि या दोन बिंदूंचे संपूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम स्वयंचलितपणे क्रोमॅटोग्रामच्या खाली दर्शविले जाईल (आकृती 5 आणि आकृती 6 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे). या दोन विभाजनांच्या पूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम डेटाची तुलना करताना, घटक ए मध्ये दोन प्रयोगांमध्ये सुसंगत शोषण स्पेक्ट्रम आहे. घटक ए च्या कारणास्तव दोन भिन्न फ्लॅश काडतुसेवर विसंगत पीक आकार आहे, असा अंदाज आहे की घटक ए मध्ये विशिष्ट अशुद्धता आहे ज्याचा सामान्य टप्पा कारतूस आणि सॅक्स कार्ट्रिजवर भिन्न धारणा आहे. म्हणूनच, एल्युटिंग सीक्वेन्स घटक ए आणि या दोन फ्लॅश काडतुसेवरील अशुद्धतेसाठी भिन्न आहे, परिणामी क्रोमॅटोग्रामवरील विसंगत पीक आकार.
आकृती 5. घटक ए चे संपूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम आणि सामान्य फेज कारतूसद्वारे विभक्त केलेले अशुद्धता.
आकृती 6. घटक ए चे संपूर्ण तरंगलांबी स्पेक्ट्रम आणि सॅक्स कार्ट्रिजद्वारे विभक्त केलेले अशुद्धता.
जर एकत्रित केले जाणारे लक्ष्य उत्पादन तटस्थ घटक ए असेल तर, नमुना लोडिंगनंतर एलिशनसाठी एसएएक्स कार्ट्रिजचा थेट वापर करून शुद्धीकरण कार्य सहजपणे पूर्ण केले जाऊ शकते. दुसरीकडे, जर एकत्रित केले जाणारे लक्ष्य उत्पादन acid सिडिक घटक बी असेल तर, कॅप्चर-रीलिझ रीतीने प्रयोगात्मक चरणांमध्ये फक्त थोडीशी समायोजन करून स्वीकारले जाऊ शकते: जेव्हा सॅक्स कारतूस आणि तटस्थ घटक ए पूर्णपणे लोड केले गेले तेव्हा मोबाइल फेज 5% एसीटिक acid सिड असलेल्या मेथॅनॉल सोल्यूशनमध्ये स्विच केले गेले. मोबाइल फेजमधील एसीटेट आयन सॅक्स कार्ट्रिजच्या स्थिर टप्प्यावर क्वाटरनरी अमाइन आयन गटांना बंधनकारक करण्यासाठी घटक बीशी स्पर्धा करतील, ज्यामुळे लक्ष्य उत्पादन मिळविण्यासाठी कार्ट्रिजमधून घटक बी मिळतील. आयन एक्सचेंज मोडमध्ये विभक्त केलेल्या नमुन्याचा क्रोमॅटोग्राम आकृती 7 मध्ये दर्शविला गेला.
आकृती 7. सॅक्स कार्ट्रिजवरील आयन एक्सचेंज मोडमध्ये घटक बी एलिटेड घटकांचा फ्लॅश क्रोमॅटोग्राम.
निष्कर्षानुसार, अम्लीय किंवा तटस्थ नमुना वेगवेगळ्या शुध्दीकरण रणनीतींचा वापर करून सामान्य फेज कार्ट्रिजसह एकत्रित सॅक्स कार्ट्रिजद्वारे वेगाने शुद्ध केला जाऊ शकतो. शिवाय, सेपाबियन ™ मशीनच्या नियंत्रण सॉफ्टवेअरमध्ये तयार केलेल्या पूर्ण तरंगलांबी स्कॅनिंग वैशिष्ट्याच्या मदतीने, एलिट अपूर्णांकांचे वैशिष्ट्यपूर्ण शोषण स्पेक्ट्रम सहजपणे तुलना केली जाऊ शकते आणि पुष्टी केली जाऊ शकते, संशोधकांना एलिट अपूर्णांकांची रचना आणि शुद्धता द्रुतपणे निर्धारित करण्यात मदत करते आणि अशा प्रकारे कामाची कार्यक्षमता सुधारते.
| आयटम क्रमांक | स्तंभ आकार | प्रवाह दर (एमएल/मिनिट) | मॅक्स.प्रेस (पीएसआय/बार) |
| एसडब्ल्यू -5001-004-आयआर | 5.9 ग्रॅम | 10-20 | 400/27.5 |
| एसडब्ल्यू -5001-012-आयआर | 23 ग्रॅम | 15-30 | 400/27.5 |
| एसडब्ल्यू -5001-025-आयआर | 38 जी | 15-30 | 400/27.5 |
| एसडब्ल्यू -5001-040-आयआर | 55 ग्रॅम | 20-40 | 400/27.5 |
| एसडब्ल्यू -5001-080-आयआर | 122 जी | 30-60 | 350/24.0 |
| एसडब्ल्यू -5001-120-आयआर | 180 ग्रॅम | 40-80 | 300/20.7 |
| एसडब्ल्यू -5001-220-आयआर | 340 ग्रॅम | 50-100 | 300/20.7 |
| एसडब्ल्यू -5001-330-आयआर | 475 ग्रॅम | 50-100 | 250/17.2
|
सारणी 2. सेपफ्लॅश बाँड्ड मालिका सॅक्स फ्लॅश काडतुसे. पॅकिंग मटेरियल: अल्ट्रा-शुद्ध अनियमित सॅक्स-बॉन्ड्ड सिलिका, 40-63 μm, 60 Å.
सेपाबियन Secture च्या तपशीलवार वैशिष्ट्यांविषयी अधिक माहितीसाठीमशीन किंवा सेपफ्लॅश मालिका फ्लॅश काडतुसेवरील ऑर्डरिंग माहिती, कृपया आमच्या वेबसाइटला भेट द्या.
पोस्ट वेळ: नोव्हेंबर -09-2018